子宫自然杀伤细胞在人类早孕蜕膜血管 生成中的作用研究

子宫内膜蜕膜化过程伴随着活跃的血管生成是妊娠时新血管形成的关键步骤. 本研究旨在明确子宫自然杀伤细胞(uNK, CD56⁺细胞)在人类早期妊娠蜕膜组织中的分布, 并观察这类细胞是否表达血管内皮生长因子(VEGF-A)和促血管生成素2(Ang2). 免疫组化研究发现, uNK细胞(CD56⁺)大量存在于子宫蜕膜间质中, 主要集中在血管和腺体周围的间质组织, 蛋白水平的VEGF-A和Ang2表达于蜕膜间质细胞、微血管内皮细胞和腺上皮细胞中, uNK细胞在子宫蜕膜间质中的阳性率与平均微血管密度(MVD)、uNK细胞的阳性率与VEGF-A蛋白阳性表达率呈正相关关系, 而与Ang2无相关性. 另外, 在激光微切获得的单个uNK细胞进行巢式PCR的研究结果显示, 人类蜕膜的uNK细胞能够表达VEGF mRNA, 未测得Ang2 mRNA在单个uNK细胞表达. 表明人类早孕子宫蜕膜中的uNK细胞通过表达VEGF-A, 在蜕膜化过程和胎盘早期形成时的血管生成中发挥重要作用.     

一氧化氮在血管紧张素Ⅱ激活蛋白激酶C中的作用

实验在培养新生大鼠心肌细胞中检测NO前体L－精氨酸（L－Arg）和NO供体硝普钠（SNP）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）激活蛋白激酶C（PKC）的作用,以探讨心肌细胞PKC水平的信号转导途径,实验结果如下：（1）无血清DMEM培养心肌细胞24h后加入AngⅡ,PKC活性呈剂量依赖性增高;（2）培养基中加入L－Arg,PKC活性呈剂量依赖性降低;（3）用L－Arg100μmol/L进行预处理,30min后分别加入AngⅡ0.1μmol/L或PMA10μmol/L,PKC活性均明显降低,与单纯AngⅡ组和单纯PMA组相比均有显著性差异;用NOS抑制剂L－NAME预处理后,再加入L－Arg,可明显阻断L－Arg对上述两个效应的影响;（4）培养液中加入NO供体SNP,PKC活性呈剂量依赖性地降低;（5）用SNP10μmol／L预处理心肌细胞,5min后分别加入AngⅡ或PMA,PKC活性分别与单纯AngⅡ和单纯PMA组相比均明显降低。以上结果表明,AngⅡ能剂量依赖性激活PKC,而NO可剂量依赖性抑制PKC活性;NOS参与L－Arg抑制AngⅡ或PMA激活PKC的作用。这些观察提示,NO抑制AngⅡ对心肌细胞的作用可能是通过抑制PKC活性实现的,PKC可能是NO和AngⅡ在心肌细胞内信号转导的交汇点（cross talk）。     

八肽胆囊收缩素激活钙离子通道和酪氨酸激酶诱导豚鼠心肌细胞内的游离钙增高

探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对豚鼠单个心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i的影响及其信号转导机制.Fluo 3-AM标记酶消化法分离的单个心室肌细胞,用激光共聚焦显微镜测定细胞内[Ca2+]i的浓度.[Ca2+]i的变化用荧光强度(Fi)和相对荧光强度(Fi/F0%)表示.实验结果如下(1)在含Ca2+1.0 mmol/L的Tyrode's液中,CCK-8(1～104pmoVL)均可引起[Ca2+]i快速显著上升(P＜0.01).(2)用钙离子鳌合剂EGTA(3 mmol/L)和钙离子通道阻断剂nisoldipine(0.5μmol/L)预孵育心肌细胞5 min,CCK-8(102pmol/L)仅可引起[Ca2+]i缓慢轻度上升(P＜0.01).(3)用非选择性CCK受体拮抗剂丙谷胺(proglumide 6μmo1/L)或酪氨酸激酶抑制剂genistein(1 μmol/L)预孵育心肌细胞5 min,则完全抑制CCK-8诱导的[Ca2+]i升高(P＜0.01).CCK-8可通过激活其受体控制的Ca2+通道,引起Ca2+内流,诱导细胞内Ca2+释放,引起豚鼠单个心肌细胞内[Ca2+]i上升,此作用可能由酪氨酸激酶介导.     

串珠素的生理与病理生理作用

串珠素 (perlecan)是细胞外基质中主要的蛋白聚糖之一 ,由核心蛋白和硫酸肝素侧链组成 ,可以通过调节生长因子的结合和活性影响血管壁细胞的增殖、迁移 ,并影响细胞与基质的粘附 ,在机体心血管和软骨发育、血管生成与功能调控等多种生命过程中均具有重要作用     

肾血管性高血压大鼠发病过程中心血管AT1-受体自身抗体的变化

实验观察了肾血管性高血压（RVH）大鼠血浆中抗AT1－受体自身抗体在发病过程中的作用及其变化规律。采用两肾一夹Goldblatt RVH模型,以合成的大鼠AT1－受体细胞外第二环165－191位氨基酸序列作为特慢性抗原,用SA－ELISA法检测大鼠血清中抗AT1-受体自身抗体。结果表明,RVH模型组术后2周时大鼠血清中抗AT1－受体自身抗体的阳性率和平均滴度与术前相比明显增高,较高的阳性率和平均滴度持续几周后逐渐下降,12周时下降到正常水平。结果提示,自身免疫机制参与了高血压的形成,抗AT1－受体自身抗体可能与心肌肥厚有关。     

白介素-10抑制TNF-α诱导的血管平滑肌细胞增殖

研究观察了重组人白介素 10 (rhIL 10 )对肿瘤坏死因子 (TNF α)刺激的离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖、细胞周期及对p4 4 /p4 2丝裂素活化蛋白激酶的影响。实验培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells,VSMCs)的增殖状态 ;应用流式细胞术测定细胞周期 ;利用p4 4 / 4 2磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定MAPK蛋白表达。结果显示 :( 1)TNF α处理组与对照组相比 ,TNF α对VSMC增殖具有明显的刺激作用 (P <0 0 5 )。rhIL 10单独应用对VSMCs生长没有影响 (P >0 0 5 )。在TNF α刺激下 ,低至 10ng/ml的rhIL 10可抑制VSMCs的生长 (P <0 0 5 )。流式细胞术测定的结果显示 ,rhIL 10分别可使TNF α作用下的VSMC大部分处于G0 /G1期 ,与对照组相比有明显差异 (P <0 0 1)。 ( 2 )TNF α对p4 4 /p4 2MAPK蛋白表达有显著的增强作用 ,此作用可被rhIL 10抑制。结果提示 ,rhIL 10可抑制TNF α诱导的VSMC增殖及p4 4 /p4 2丝裂素活化蛋白激酶的表达     

八肽胆囊收缩素对吗啡抑制大鼠离体空肠电与收缩活动的对抗作用

本研究探讨了八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对抗吗啡对大鼠离体空肠电与收缩活动的作用。结果表明,吗啡能抑制ＡＣｈ对空肠峰波发放和收缩的加强作用;ＣＣＫ－８可对抗吗啡的作用;在此基础上,ＣＣＫ－Ａ受体拮抗剂ｄｅｖａｚｅｐｉｄｅ（１０ｎｍｏｌ／Ｌ）能完全翻转ＣＣＫ－８的抗吗啡作用,但是ＣＣＫ－Ｂ受体拮抗剂Ｌ－３６５,２６０在１０ｎｍｏｌ／Ｌ时可部分翻转、在３０ｎｍｏｌ／Ｌ时能完全翻转ＣＣＫ－８的作用。上述     

促乳素抑制培养的大鼠颗粒细胞中卵泡素介导的组织纤溶酶原激活因子的表达

本文主要是观察促乳素（ＰＲＬ）是否曩体外培养的大鼠颗粒细胞中,组织纤溶酶原激活因子（ｔＰＡ）和Ｉ型纤溶酶原激活因子抑制因子（ＰＡＩ－Ｉ）基因表达间的协调作用。我们采用了多种方法,例如ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹等,来检测ＰＲＬ对ｔＰＡ和ＰＡＩ－Ｉ基因表达的作用。结果证实：（１）在离体条件下促乳素（ＰＲＬ）能刺激颗粒细胞（ＧＣ）中ＰＡＩ－Ｉ ｍＲＮＡ的合成,而ＦＳＨ无此作用。但ＦＳＨ可与ＰＲＬ协同增加     

缺氧时培养的肺动脉平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ自分泌的变化及其机制

缺氧是否通过影响血管平滑肌细胞的自分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不清楚。本实验动态了缺氧对培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）的血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）分泌的影响。结果发现：２．５％Ｏ２缺氧导致ＰＡＳＭＣｓ的ＡＴⅡ分泌降低,０％Ｏ２缺氧进一步抑制ＡＴⅡ分泌。常氧条件下,ＮＯ供体ＳＩＮ－１显著的抑制ＡＴⅡ分泌,而ＮＯ合酶凶制剂硝基精氨酸（ＬＮＡ）则能消除缺氧对ＡＴⅡ分泌的抑制作用。０     

cAMP与小鼠胸腺细胞凋亡相关性的研究

本文采用Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱导小鼠胸腺细胞凋亡,探讨胞内ｃＡＭＰ浓度上升与细胞凋亡的相关性,采用透射电镜,ＦＣＭ和ＭＴＴ法,结果显示：Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,不同浓度其作用程度不同,已由ＦＣＭ证实,透射电镜显示细胞凋亡的形态学特征,Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ激活胞内腺苷酸环化酶,产生大量ｃＡＭＰ,其诱导细胞凋亡数目最多的浓度,ＭＴＴ法显示其光密度（ＯＤ５７０）值最高,表示细胞活性最强。我