γ射线照射对人肌腱组织形态学及羟脯氨酸含量的影响(英文)

目的:研究2.87Mrad剂量γ射线照射后,肌腱组织形态学及羟脯氨酸含量的变化。方法:选取40根人新鲜上肢掌深屈肌腱,-80℃深低温冷冻6周,等分为二:实验组(A组),对照组(B组)。A组肌腱在干冰低温保存条件下行γ射线照射,检测肌腱最终吸收剂量为2.87Mrad。分别行HE、VG染色,在普通光镜和透射电镜下观察其组织形态学变化。用柱前衍生高效液相色谱检测肌腱胶原蛋白水解液中羟脯氨酸含量。结果:①形态学观察发现,同非照射组肌腱相比,照射组肌腱胶原纤维束间隙较大,纤维排列卷曲紊乱,并可见部分断裂。电镜下胶原纤维横纹模糊消失,腱细胞膜溶解消失,核崩解,细胞器减少。②在同等水解条件下,胶原蛋白水解液中照射组羟脯氨酸含量与非照射组相比,有显著差异(P0.05)。结论:2.87Mrad剂量γ射线照射可引起肌腱组织形态结构发生显著改变。在同等水解条件处理下,照射组肌腱胶原蛋白水解液中羟脯氨酸含量显著高于非照射组。     

HPLC-MS/MS法检测星形胶质细胞兴奋性氨基酸释放

目的:建立一种快速测定星形胶质细胞上清中兴奋性氨基酸释放的高效液相-串联四级杆质谱方法.方法:使用高效液相-串联四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式快速测定星形胶质细胞(AST)兴奋性氨基酸(EAAs)的释放量.结果:该方法检测细胞上清液中兴奋性氨基酸释放量能够在4分钟内完成,有很好的精密度(Glu 1.0%,Asp 1.6%),较好的稳定性(组内的变异系数Glu为1.34%,Asp为1.41%;组间变异系数Glu为2.32%,Asp为2.18%)和回收率(Glu 97.1%;Asp 95.8%).结论:该方法定量检测兴奋性氨基酸快速、准确,可用于大批量样品的快速测定.     

红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化

研究确立了一种高效液相色谱法,能有效地对红曲霉代谢产物中的桔霉素分离和定量分析。色谱柱:Shimadzu VP-ODS C18(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相组成为V(乙腈):V(甲醇):V(水)=70:10:20,pH≤2.8。荧光检测器:λex=331 nm,λem=500 nm。在优化的色谱条件下绘制标准曲线,当桔霉素质量浓度为0.1 mg.L-1~1 mg.L-1时线性关系良好,R2=0.9992。对桔霉素标品的最低检测质量浓度为0.01 mg.L-1,在红曲霉发酵样品中的定量回收率达到了0.9187722~1.029138。     

半制备高效液相色谱制备5种苯乙醇苷类单体

利用MCI柱层析和半制备型反相高效液相色谱法从牛耳朵中分离制备了5种苯乙醇苷类单体。在Eclipse XDB-C18(9.4mm×250mm,5μm)半制备柱上,以甲醇-水为流动相,流速为4mL/min,采用梯度洗脱方式,制备得到5个组分。经波谱(EI-MS、1H-NMR、13C-NMR)分析,分别鉴定为plantainoside(1)、chirito-sideC(2)、plantaninosideB(3)、plantamajoside(4)和desrhamnosylverbascoside(5)。高效液相色谱分析表明所制备5种化合物纯度均高于98%。该方法分离条件简单,高效,一次可得到5个单体,目标产物纯度较高。     

层析辅助体外复性含有多对二硫键的融合蛋白质

为建立一种基于阴离子交换介质辅助的含多对二硫键的抗凝溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白质 (HV12p-rPA) 的复性方法,采用Q Sepharose XL作为层析复性介质,通过正交实验考察蛋白质上样量、流速、脲梯度、洗脱液中精氨酸浓度、脲浓度、pH、还原型及氧化型谷胱甘肽等因素对复性过程的影响,探索最佳层析复性条件。结果表明：脲梯度、上样量及精氨酸浓度是影响复性的3个主要因素。脲梯度是复性成功的关键,上样量增大时复性蛋白质比活降低,精氨酸辅助HV12p-rPA复性的最佳浓度为1 mol/L。创建了脲、pH双梯度下的阴离子交换层析辅助HV12p-rPA的复性方法,复性后蛋白质的溶栓比活达到46 520 IU/mg,抗凝比活达到9 980 ATU/mg,与稀释复性方法相比,该方法能使复性蛋白质的溶栓比活提高14~15倍,抗凝比活提高7~8倍。     

顺序式模拟移动色谱纯化木糖醇母液北大核心CSCD

以木糖醇母液为原料,采用顺序式模拟移动色谱技术纯化木糖醇母液。在制备色谱研究的基础上,研究顺序式模拟移动床(SSMB)技术纯化木糖醇母液的最佳工艺参数。结果表明最佳工艺参数为:进料浓度60%,进料量为546.00 g/h,进水量为819.00 g/h,循环量382.2 m L。在此条件下木糖醇出口浓度为41.2%,纯度达到94.8%,收率达到90.6%,较木糖醇母液纯度提高31.12%,本研究为木糖醇母液产业化利用奠定了实践基础。     

超高效液相色谱法测定麻黄中l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)测定麻黄中l-麻黄碱和d-伪麻黄碱含量的方法,为麻黄药材质量评价提供依据。方法:UPLC测定麻黄碱色谱柱为Waters Acquity BEH-C_(18)(2.1 mm×50 mm, 1.7μm);检测波长:214 nm;流动相为0.15%氨水水溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱(0.0～4.0 min,5%B→55%B;4.0～4.1 min,55%B→95%B;4.1～4.7 min,95%B;4.7～4.8 min,95%B→5%B;4.8～5.0 min,5%B),流速:0.7mL/min;柱温:25℃。结果:l-麻黄碱和d-伪麻黄碱分别在12.50～500.00μg/mL和10.50～420.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数均为0.9999,UPLC方法测定l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的回收率分别为101.99%和98.68%。应用UPLC方法测定麻黄药材中的l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的含量,麻黄药材两者含量分别为0.80%和0.18%。结论:与常规HPLC测定l-麻黄碱和d-伪麻黄碱含量方法比较,本文所用方法测定结果更加准确、全面、且重复性好,能够快速测定麻黄药材中的l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的实际含量;并且对麻黄碱及相关物质的测定有一定的指导意义。     

灌胃不同剂量钙对大肠肿瘤模型大鼠肿瘤及血氨基酸的影响的实验研究

目的:研究不同口服剂量钙对大肠肿瘤和血清中氨基酸代谢的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠适应性喂养一周后随机分为5组每组10只,碳酸钙灌胃6个月。对照组(钙摄入量0.5 g/kg/d)、模型对照组(钙摄入量0.5 g/kg/d)、低剂量钙组(钙摄入量1.0 g/kg/d)、中剂量钙组(钙摄入量1.5 g/kg/d)和高剂量钙组(钙摄入量2.0 g/kg/d)。模型对照组及低中高钙剂量组在实验的第2周开始,颈部皮下连续注射二甲基肼20周进行大肠肿瘤造模。大鼠解剖后观察肿瘤数量和直径,亚甲蓝染色观察大肠内异常隐窝(ACF)数量,HE染色观察腺癌发生情况。液相色谱-质谱联用检测大鼠血液中相关氨基酸含量。结果:从第20周开始,与模型组相比,中剂量钙组的体重增加,有显著性差异(P0.05)。在肿瘤数、肿瘤发生率、肿瘤平均直径和肠重这些指标中,中剂量钙组和高剂量钙组均显著低于模型对照组(均P0.05)。病理组织学结果显示,正常对照组未见任何组织增生,模型对照组以腺瘤为主,出现小部分腺癌。而其余各组均以腺瘤为主,未出现腺癌。与模型对照组相比,中剂量钙组的谷氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸均显著升高。结论:钙灌胃对大鼠大肠肿瘤发生具有抑制作用,血清中谷氨酸、谷氨酰胺和鸟氨酸的代谢发生变化。     

冬虫夏草鲜品及干品游离氨基酸比较分析

采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,测定并比较烘干、晒干所得的冬虫夏草干燥样品及未经处理的鲜冬虫夏草样品的游离氨基酸含量。结果表明:3类样品均含有19种游离氨基酸,其中鲜冬虫夏草的游离氨基酸总量、药效氨基酸、呈味氨基酸及必需氨基酸含量均最高,显著高于晒干和烘干冬虫夏草(P0.01),晒干和烘干冬虫夏草之间无显著差异。冬虫夏草的游离氨基酸在晒干、烘干过程中会造成损失。该研究为冬虫夏草加工工艺的提升提供了科学依据。