一种同时测定十种类胡萝卜素的液相色谱方法的建立

建立了一种同时定量分析叶黄素、玉米黄素、α-隐黄素、β-隐黄素、ε-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、(6R)-δ-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素10种类胡萝卜素的方法。该方法的色谱条件为：YMC Carotenoid C₃₀(250 mm×4.5 mm,5 μm)色谱柱,柱温(25±1)℃,紫外检测波长450 nm,流速1 mL/min,进样体积10 μL,流动相分别由A1和B1按照不同比例混合制得A相和B相,A相中A1∶B1体积比为9∶1,B相中A1∶B1体积比为1∶9。其中,A1相为97%甲醇-水,含有0.05 mol/L乙酸铵和0.1%(W/V)2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT);B1相为100%甲基叔丁基醚(MTBE),含有0.1%(W/V)BHT,梯度洗脱。在0.5-20 μg/mL范围内,10种类胡萝卜素的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数(R²)均大于0.995,检出限(LOD,S/N=3)和定量限(LOQ,S/N=10)分别为0.01-1.6 μg/mL、0.2-4.0 μg/mL,且平均回收率在96.2...     

半枫荷调控RA模型的非靶向代谢组学研究

为探讨半枫荷干预类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)模型大鼠血浆内容物代谢轮廓的变化和特征,该研究以半枫荷正丁醇提取物给药前后RA模型大鼠血浆为研究对象,借助超高效液相色谱联用四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术进行非靶向代谢组学检测,并用SIMCA-P软件对代谢物测定结果进行多元变量统计分析,筛选差异代谢物并作通路富集分析。结果表明：(1)给药前后大鼠血浆代谢轮廓存在显著差异,与模型组相比,给药组在正负离子模式合并后筛选出321种差异代谢物,其中负离子模式鉴定到174种代谢物,正离子模式鉴定到192种代谢物。(2)鉴定到的所有代谢物根据其化学分类归属信息归为12种类型,有机酸及其衍生物和脂类及类脂分子这2类代谢物数量占比较高。(3)通路富集获得37个代谢通路且呈显著性差异(P<0.05),给药组中蛋白质的消化和吸收、肿瘤胆碱代谢通路和ABC转运蛋白通路出现较大扰动且富集到的差异代谢物数量最多,所有通路均显著上调(P<0.05)。这对阐明半枫荷调控RA症状的变化机制具有一定指导价值和理论意义。     

吸附树脂分离蛹虫草发酵液中虫草素

采用吸附法替代离子交换法从蛹虫草发酵液中分离虫草素.首先从5种具有不同孔结构的吸附树脂中筛选出一种吸附容量高(29 mg/g)、容易再生的树脂KA-I,随后在pH为5.0时,在25、40和60℃条件下,测定虫草素在KA-Ⅰ上的静态吸附容量,其吸附容量随温度的升高而降低,吸附过程符合Freundlich模型(R2＞0.9...     

干旱地区板蓝根优质种质筛选

从产量和有效成分含量两方面综合评价不同板蓝根种质在河北干旱地区的种植表现,筛选适宜当地种植的板蓝根优良种质。20份板蓝根种质按完全随机区组设计田间试验,采用高效液相色谱法测定(R,S)-告依春。20份种质的板蓝根产量范围为2.507～4.555 kg/m²,大青叶产量范围为66.070～118.897 g/m²,(R,S)-告依春含量范围为0.158%～0.315%。综合产量和含量数据,4号、13号、17号种质在根产量、叶产量和(R,S)-告依春含量三方面均表现优异。15号、3号、12号种质根产量和(R,S)-告依春含量两方面表现优异,而叶产量偏低。不同种质的板蓝根、大青叶产量及(R,S)-告依春含量均差异较大,综合产量与含量差异,筛选出根、叶产量和(R,S)-告依春含量均显著高的4号、13号、17号,根产量和(R,S)-告依春含量显著高,叶产量显著低的15号、3号、12号种质。可根据不同的生产需求选择适宜优良种质,用于后续大面积扩繁及作为育种材料继续选育新品种。     

应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原

本文旨在建立基于高效体积排阻色谱(high-performance size-exclusion chromatography,HPSEC)偶联多角度激光散射仪(multi-angle laser light scattering,MALLS)的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗抗原检测方法。以纯化的PCV2灭活病毒及病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)为参照,对4家生产企业的2种PCV2灭活病毒疫苗(a、b)及VLP疫苗(c、d)破乳后进行HPSEC-MALLS检测及分子量分析;结合PCV2抗原检测卡、Western blotting和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),鉴定了特征色谱峰;考察了方法的重复性和检测线性。结果表明,两家企业生产的PCV2灭活病毒疫苗破乳液水相经HPSEC分离,在保留时间约13.3 min处出现抗原特征峰;MALLS计算该色谱峰分子量分别为2.61×10⁶(±4.34%) Da和2.40×10⁶(±2.51%) Da。两种VLP疫苗也在13.3 min处出现抗原特征峰,分子量分别为2.09×10⁶(±2.94%) Da和2.88×10⁶(±11.85%) Da,接近PCV2的理论分子量;同时在保留时间约11.4 min处也出现色谱峰,经检测分子量为4.37×10⁶(±0.42%) Da,TEM表征显示为VLP二聚体。取疫苗d和PCV2 VLP纯品进行重复检测,抗原色谱峰面积的RSD(n=3)均小于1.5%,重复性好;将PCV2 VLP纯品梯度稀释检测,VLP及其多聚体的色谱峰面积与浓度均呈良好的线性关系,R²分别为0.999及0.997,能够满足定量及多聚体含量分析。该方法有望成为一种准确、高效的PCV2疫苗的体外评价方法,用于质量评价与提升。     

电子病历的信息交换接口设计

本文首先分析了电子病历中数据的特性,及其进行数据交换的需求,然后根据医学信息和电子病历的数据特性,分析了信息交换接口引擎的总体设计模型,阐述了总体设计的思路和模型.     

银耳深层发酵浸膏多糖抗氧化活性的研究

对银耳液体深层发酵多糖浸膏进行乙醇分级,得到乙醇终浓度为35%,50%,65%的3个多糖组分,即TF1,TF2,TF3。对其抗氧化活性进行了比较研究,结果表明:TF3的抗氧化活性最强,对超氧阴离子的清除率为16.9%,对羟基自由基的清除率为23.6%。     

钠-氢交换蛋白 mRNA在人胎儿两个发育阶段中的组织特异性表达

钠－氢交换蛋白（Na^ -H^ exchangers,NHE）至少包含6个不同的亚型,生长因子可激活其表达。目前,对在发育过程中NHE的表达了解甚少。本文利用RT－PCR观察了4种NHE亚型的mRNA在人胎儿的两个不同发育阶段（11周、16周）在不同组织中的表达,以研究它们的发育调控。结果显示,NHE1 mRNA在两种胎龄的多种组织中均有表达,和16周胚胎相比,11周的胚胎的NHE1 mRNA的表达较弱,并且表现出明显的组织差异。据此推测,NHE1的管家（house-keeping）功能可能至少在11周就开始形成,而最迟在16周已基本建立;NHE2和NHE3 mRNA在11周和16周的胚胎组织中的特异性表达呈现相反的变化趋势及组织分布上的重叠,后者与NHE2和NHE3在成人组织中的分布及功能的重叠的特点相吻合;NHE5 mRNA的表达在11周的胚胎组织中比较普遍,而在16周的胚胎组织中则局限在小脑组织中,本研究表明,在人胚胎发育11－16周期间,NHE的组织特异性表达表现出时间依赖性的调控,而在不迟于胚胎发育的第16周,具有“管家功能”的NHE1的基因表达已与成人相似。     

内毒诱导肺动脉内皮细胞生成过氧亚硝基阴离子的意义

目的：探讨牛肺动脉内皮细胞（BPAEC）产生过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）的能力及其作用。方法：用流式细胞免疫荧光技术,定量检测内毒素主要成分脂多糖（LPS）诱导培养的BPAEC中ONOO^-生成标志物硝基酪氨酸（NT）的含量,观察ONOO^-对BPAEC形态变化的影响。结果：LPS可剂量依赖性诱导BPAEC产生ONOO^-明显增多,并为氮基胍部分翻转;ONOO^-可导致BPAEC明显回缩,胞体变小,细胞间隙增宽。结论：LPS诱导BPAEC产生增多的ONOO^-可能参与介导LPS对BPAEC本身的损伤效应。     

反义寡核苷酸药物癌泰得的定性分析方法研究

 癌泰得 (ACTCACTCAGGCCTCAGACT)为端粒酶表达抑制活性反义寡核苷酸 .为了探讨其定性检测手段 ,通过阴离子交换高效液相色谱和毛细管凝胶电泳分析方法 ,确定了该硫代寡核苷酸以及与其有关的短序列和部分未被硫代类似物的保留时间 ,并分析了不同混合物样品 .结果表明 ,阴离子交换高效液相色谱对硫代寡核苷酸骨架上的差异非常敏感 ,可很好地分离长度相同的硫代和未完全硫代类似物 ,并且随未被硫代磷酸基数目增加 ,保留时间依次缩短 .阴离子交换高效液相色谱对硫代寡核苷酸的长度不敏感 ,不能分离相差一个碱基的硫代寡核苷酸 .毛细管凝胶电泳可很好地分离长度相差一个碱基的硫代寡核苷酸 ,不能分离同长硫代和部分硫代寡核苷酸 .高效液相色谱结合毛细管凝胶电泳可有效地确定癌泰得的纯度和修饰程度 .