高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型的研究进展

2型糖尿病大鼠模型的建立能够为糖尿病及其并发症的发病机制、预防、诊断及治疗的研究提供理想的动物实验技术平台。2型糖尿病大鼠模型的成模率受多种因素的影响,本文就建立2型糖尿病大鼠模型的主要影响因素STZ的应用、高脂高糖饮食及大鼠的选择与饲养等做一综述。以期对建立2型糖尿病大鼠模型的方法提供一定的参考价值。     

长爪沙鼠资源开发利用进展

长爪沙鼠是源于我国的＂多功能＂实验动物资源,在某些研究领域发挥重要作用。随着研究深入,越来越多的长爪沙鼠生物学特性将被发现,这些将使长爪沙鼠资源利用更加多元化。本文对长爪沙鼠的开发研究历程及在分类学、寄生虫学、脑缺血、脂质代谢、神经性疾病和肿瘤学等研究中的应用作简要概述。     

白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株拮抗物质的分离纯化、解析及活性分析

从浙江省金华市郊水稻田土壤中筛到1株拮抗水稻白叶枯病菌的白蚁链霉菌(Streptomyces termitum)ACT-2菌株。该菌株的菌体和发酵液对水稻白叶枯病菌均表现出较强的拮抗能力;水稻盆栽生防试验结果表明:对水稻白叶枯病有较好的防效,生防效果最高可达80.80%。通过分步萃取、硅胶柱层析、凝胶柱层析等步骤,分离纯化获得拮抗活性物质,对目标物进行核磁共振氢谱分析和质谱分析,通过解析与比对该目标物为Aloesaponarin II(1-甲基-3,8-二羟基蒽醌),分子式为C15H10O4。以氯霉素为对照,测定纯化的Aloesaponarin II对水稻白叶枯病菌拮抗活性,结果表明Aloesaponarin II具有较强的抗菌活性,半抑制浓度为IC50=19.2μg/mL,但较氯霉素弱(半抑制浓度为IC50=0.39μg/mL)。     

葡萄糖酸氧化杆菌木糖醇脱氢酶基因的克隆与表达

【目的】获得葡萄糖酸氧化杆菌(Gluconobacter oxydans CGMCC 1.637)的木糖醇脱氢酶基因,研究其酶学性质及碳源特别是D-阿拉伯醇和木糖醇对该酶活性的影响。【方法】通过已报道序列的木糖醇脱氢酶的保守区设计引物,用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增获得目的基因片段。根据获得的片段序列设计引物克隆目的基因的5’和3’片段,将所获得的片段拼接,获得完整的木糖醇脱氢酶基因。通过构建工程菌获得重组蛋白,并利用氧化还原反应测定重组酶的活性。用含不同碳源的培养基培养G.oxydans CGMCC 1.637,并测定其破胞上清液木糖醇脱氢酶氧化木糖醇的活性;用不同碳源培养的G.oxydans CGMCC 1.637转化木酮糖,用高效液相色谱法测定木糖醇的产量。【结果】获得一个新的798bp的木糖醇脱氢酶基因,所编码的木糖醇脱氢酶含265个氨基酸,属于短链脱氢酶家族。酶学性质研究发现,该木糖醇脱氢酶催化木糖醇氧化的最适合条件为35℃、pH 10.0,最高活性为23.27 U/mg,催化木酮糖还原为木糖醇的最适条件为30℃、pH 6.0。最高活性为255.55 U/mg;该木糖醇脱氢酶的对木糖醇的Km和Vmax分别为78.97 mmol/L和40.17 U/mg。碳源诱导实验表明,d-山梨醇对G.oxydans CGMCC 1.637木糖醇脱氢酶的活性有明显的促进作用,而葡萄糖、果糖、木糖、木糖醇、D-阿拉伯醇对木糖醇脱氢酶活性有明显的抑制作用。而在转化实验中,用d-甘露糖培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力明显高于其他碳源培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力,其中,用阿拉伯醇培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力最低,仅为对照的35%。【结论】克隆自G.oxydans CGMCC 1.637的木糖醇脱氢酶基因是一个新的基因,用阿拉伯醇培养的G.oxydans CGMCC 1.637破胞液木糖醇脱氢酶活性低;且阿拉伯醇对G.oxydans CGMCC 1.637木酮糖的还原能力具有抑制作用。     

不同2型糖尿病肾病模型建立方法及成模特点比较

综述不同的2型糖尿病肾病建模方式并进行比较,以方便实验者根据实验目的、实验室条件及经验等,从中选择出适合的建模方式,为2型糖尿病肾病的预防和治疗提供科学依据。     

一种用于优化PCR引物设计的短链DNA熔点分析方法

目前,PCR引物设计主要依赖于软件对引物熔点的模拟计算,而PCR退火条件的优化需进行不同条件下的扩增实验。为开发一种可高效、精确评价引物和确定退火条件的方法,本研究采用高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）测定技术直接分析短链DNA的熔点,用于引物优劣性的评价,并为退火条件的优化提供参考。本文用HRM法直接测定了非完全互补的双链DNA以及DNA发卡结构的熔点,结果显示：（1）与完全互补的双链DNA相比,较为稳定的单碱基错配A?G、G?G和T?G的熔点只降低2℃ ~ 3℃,部分双碱基错配的熔点只降低4℃ ~ 6℃,单碱基突出熔点只降低4℃~ 5℃。因此,如果采用的退火温度不当,部分错配的非目的模板可能会被扩增。（2）即使发卡结构的茎干区只有6 bp,当其环区碱基少于10 nt时,其熔点也可达到60℃以上。此外,环区的长度对发卡熔点也有较大影响。根据本研究结果发现,引物设计时应尽量避免模板引物结合区同其邻近的30 nt碱基有6 bp以上的互补部分。综上所述,本研究证明HRM熔点法是一种高效评价引物及确定退火温度的方法。     

长链非编码RNA(lncRNA)及其在昆虫学研究中的进展

长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）是一类转录本长度超过200 nt的非编码RNA,主要通过转录调控和转录后调控调节基因的表达,也可通过影响蛋白质定位和端粒复制发挥其强大的生物学功能。本文在介绍lncRNA的特征、分类及其主要作用机制的基础上,综述了有关昆虫lncRNA的鉴定及功能研究等方面的最新进展。近5年来已经从黑腹果蝇Drosophila melanogaster、小菜蛾Plutella xylostella和褐飞虱Nilaparvata lugens等8种昆虫中鉴定出了大量lncRNA,为进一步研究lncRNA在昆虫生长发育过程中的功能奠定了重要基础。非编码RNA参与调控害虫抗药性的分子机制已经成为昆虫毒理学研究的一个新兴领域,因此本文对有关lncRNA与害虫抗药性关系的最新研究进展也做了介绍。     

白马雪山自然保护区响古箐滇金丝猴活动时间分配

2008 年6 月至2009 年5 月,在白马雪山国家级自然保护区南端的响古箐(北纬27°37′,东经99°22′),采用瞬时扫描取样法对一群数量约480 只的滇金丝猴群的活动时间分配进行了研究。研究期间共观察取样1 609 h,扫描个体数为260 546。研究表明,响古箐滇金丝猴用38.8% 的时间取食、27. 4% 的时间移动、20. 9%的时间休息、12.9% 的时间从事其他类型活动。滇金丝猴活动时间分配季节性差异明显。冬季,滇金丝猴的取食时间长于其他季节,达到41. 5% ;秋季,取食时间在全年最短(36.5% )。夏季的高温没有影响滇金丝猴的移动,它们移动的时间达到32.8% ,高于其他3 个季节。寒冷的冬季,响古箐滇金丝猴为了减少能量损失,用于休息的时间达到24.4% 。秋季,滇金丝猴从事其他类型活动的时间(15.7% )多于另外3 个季节。研究发现,
绝对移动时间与昼长和月平均温度呈明显正相关(P < 0. 01),绝对休息时间与月平均温度呈负相关(r =- 0. 585,P = 0.046),但降水量的多少与猴群各种活动时间分配之间没有明显的相关性(P > 0.05)。食物贡献率与滇金丝猴日活动时间分配也存在相关性。取食松萝比例与猴群移动时间呈负相关(r = - 0.902,P <0.001),与休息时间呈正相关(r = 0.860,P < 0.001)。猴群取食树叶比例增加时,它们移动时间也随之增加(r = 0.832,P = 0.001)。夏季,滇金丝猴取食竹笋的比例增加时,猴群移动时间也明显增多。以上结果表明,滇金丝猴活动时间分配受食物资源状况、昼长季节性变化和气候条件的影响。     

长爪沙鼠家庭内的攻击行为可调整其生理特征

长爪沙鼠家庭动态变化所导致的社群压力是一个很少被描述的现象。本研究测定了72只长爪沙鼠的一些生理参数,包括器官重(肝脏、肾脏和脾脏)和血液的生化指标(胆固醇、甘油三酯、葡萄糖和丙氨酸转氨酶)。此外,对家庭内攻击过程中动物的全血细胞数变化也进行了检测。以家庭为单位,所有动物被置于半圈养的实验室条件下,自由取食和饮水。家庭内被攻击的雄性个体的腹下腺显著减小(Mann-WhitneyU-TestU=48.0,P=0.04)。以绝对体重和去脂体重校正后,受到攻击个体的肝脏重量也显著高于未受攻击的个体(肝脏绝对重量Mann-WhitneyU-TestU=169,P=0.02;肝脏相对重量即占去脂体重的百分比U=166,P=0.02),但肾脏重量则显著低于未受攻击的个体(绝对肾脏重量Mann-WhitneyU-TestU=183.5,P=0.04;相对肾脏重量U=137,P=0.005)。被攻击个体的白细胞(U=11.0,P=0.02)和血小板(U=6.0,P=0.004)都显著增加。同时也发现分解作用产生的代谢物有所不同。被攻击的个体具有较高的胆固醇含量(U=13.5,P=0.005)和较低的丙氨酸转氨酶含量(U=13.0,P=0.006)。结果表明家庭内的攻击行为是直接针对那些地位较低的成员,导致其能量物质的释放增加,同时激活了免疫系统以应对由于攻击导致的身体损伤的增加。     

链霉菌Z314的分类鉴定及其转化产物普伐他汀的纯化研究

从土壤中筛选得到1株可转化美伐他汀(compactin)生产普伐他汀(pravastatin)的放线菌Z314,根据形态观察、培养特征、生理生化鉴定以及16S rRNA序列分析,初步判定该菌株为链霉菌属中的黄质产色链霉菌(Streptomyces xanthochromogenes).经发酵条件优化,该菌株转化美伐他汀生产普伐他汀的产量可达1580mg/L,转化率为49.45%.发酵液经中空纤维素柱过滤、大孔树脂吸附和HPLC纯化,普伐他汀的回收率为45.06%,纯度为99.02%,为进一步产业化开发奠定了基础.