强磁场重力环境对Pseudomonas aeruginosa N1207的影响

旨在研究由超导磁体产生的强磁场重力环境(HMGE)对Pseudomonas aeruginosa N1207的影响。该磁体是经特殊设计的大梯度超导磁体,可产生多个重力梯度(从失重到超重)以及相应的磁场强度,分别为(0 g,12 T)、(1 g,16 T)和(2 g,12 T)。Pseudomonas aeruginosa N1207在HMGE中分别诱变24h、48h和72h之后,从磁场强度最高(16 T)组别中筛选得到最佳的突变株M14808。结果表明M14808的鼠李糖脂产量提高了30%以上并且遗传特性稳定。比较生长周期发现,突变株到达指数生长期早于原始菌株。诱变实验结果表明强磁场是引起诱变的主要因素从而导致鼠李糖脂产量变化和生长周期改变。抗肿瘤实验结果显示双鼠李糖脂可抑制四株肿瘤细胞,分别为MCF-7、H460、HepG2和A549,双鼠李糖脂对MCF-7的效果最佳,其IC₅₀为125.13μg/ml。     

蓝黄红菇的化学成分

从野生真菌蓝黄红菇Ｒｕｓｓｕｌａ ｃｙａｎｏｘａｎｔｈａ Ｓｃｈａｅｆｆ．Ｆｒ．子实体中分得６个化合物,经光谱法分别鉴定为４个麦角甾醇：５α,８α－ｅｐｉｄｉｏｘｙ－（２２Ｅ,２４Ｒ）－ｅｒｇｏｓｔａ－６,２２－ｄｉｅｎ－３β－ｏｌ １,５α,８α－ｅｐｉｄｉｏｘｙ－（２４Ｓ）－ｅｒｇｏｓｔａ－６－ｅｎ－３β－ｏｌ ２,（２４Ｓ）－ｅｒｇｏｓｔａ－７－ｅｎｅ－３β,５α,６β－ｔｒｉｏｌ ３,     

铜绿假单胞菌噬菌体的分离鉴定及耐噬菌体突变频率测定

用铜绿假单胞菌为宿主菌自污水中分离到3株不同的铜绿假单胞菌噬菌体,命名为PaP1、PaP2及PaP3者均为DNA双链噬菌体,基因组大小分别约为47kb、34kb及24kb。3株噬菌体原液滴度（pfu）分别为109/mL、1011/mL和1011/mL。PaP1为裂菌性噬菌体,PaP2及PaP3为溶原性噬菌体。电镜观察,3株噬菌体头部均为多面体立体对称颗粒,直径分别约为70nm、55nm和65nm。PaP1属肌尾噬菌体科,PaP2和PaP3属短尾噬菌体科。研究中还发现了铜绿假单胞菌的耐噬菌体现象及耐受菌与敏感菌之间的“菌群交替”现象,经测定铜绿假单胞菌耐噬菌体的突变机率在1.4×10-7～7.9×10-7之间。     

铜绿假单胞菌锌离子摄取系统的研究进展

锌作为一种结构、催化和信号的成分,在许多生理过程中起着关键的作用.它也是病原微生物生长所必需的,不但参与病原微生物代谢和各种毒力因子的调控,而且是病原微生物在宿主中感染和定殖所必需的.铜绿假单胞菌侵染宿主发挥毒力时,宿主会采取营养免疫的策略来限制体内环境中游离的锌离子浓度而抑制该病原菌的感染和定殖.反过来,铜绿假单胞菌...     

构建冻干无细胞生物传感器快速检测临床铜绿假单胞菌感染北大核心

【目的】铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是常见于医院感染的条件致病革兰氏阴性细菌,其群体感应信号3-氧代十二烷酰基高丝氨酸内酯(3-oxo-dodecanoyl-homoserine lactone,3OC12-HSL)可作为铜绿假单胞菌感染的生物标志物。本研究期望开发针对3OC12-HSL的冻干无细胞生物传感器,以实现临床铜绿假单胞菌感染的快速诊断。【方法】首先构建报告质粒以重建3OC12-HSL的应答过程,而后将该质粒加入冻干无细胞表达系统中以实现生物传感器的制备;接着利用梯度浓度的3OC12-HSL表征该传感器的灵敏度与动力学特征,并测试其底物特异性;最后通过临床样本测试验证其效果,并优化临床样本的预处理方法。【结果】本研究构建的冻干无细胞生物传感器能够在60 min内实现对临床呼吸道样本中铜绿假单胞菌感染的诊断,具有高灵敏度和高特异性。【结论】本研究构建了针对3OC12-HSL的冻干无细胞生物传感器,并借助RNase抑制蛋白预表达的策略提升了其对体液样本的耐受性,最终证明其具备开发成临床铜绿假单胞菌感染的快速检测方法的潜力。     

铜绿假单胞菌中PA0847二鸟苷酸环化酶活性受非催化位点Y700调控

【目的】鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中PA0847胞内结构域及其突变体的二鸟苷酸环化酶活性,并初步探究其催化机制。【方法】利用刚果红平板染色法验证PA0847胞内域的二鸟苷酸环化酶活性;采用PCR技术构建PA0847 PAS-GGDEF结构域及其单点突变体,并经过表达纯化获得相应蛋白;经凝胶分子筛层析分析蛋白在溶液中的聚集状态;通过体外酶促反应鉴定蛋白的二鸟苷酸环化酶活性,基于噻唑橙荧光染色检测蛋白酶促反应后环鸟苷二磷酸(cyclic diguanylate monophosphate, c-di-GMP)的生成量,并筛选与二鸟苷酸环化酶活性密切相关的氨基酸残基;联用结构预测和分子对接获得PA0847 PAS-GGDEF二聚体以及结合三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate, GTP)的复合物结构模型。【结果】PA0847 PAS-GGDEF主要以二聚体形式发挥催化活性,PAS结构域促进二聚体形成,有效提高二鸟苷酸环化酶活性;突变筛选发现,在低蛋白浓度(0.6 mg/mL)下,非催化位点突变体Y700A活性较野生型显著提高;凝胶分子筛层析表明,其高活性可能与Y700A突变促进GGDEF (Gly-Gly-Asp-Glu-Phe)结构域二聚化有关;结构模型分析显示,PA0847 PAS-GGDEF与GTP结合位点保守,其中K722的氨基侧链在结合GTP的磷酸基团中发挥着重要作用,而Y700芳香环侧链与K722所在的α螺旋有疏水互作,因此Y700A突变可能改变了K722所在螺旋的空间取向,进而促进K722与底物GTP的结合以及GGDEF二聚化。【结论】铜绿假单胞菌PA0847的非催化位点Y700可间接调控二鸟苷酸环化酶活性。     

氮磷比对有机磷环境中微藻砷代谢的生态风险效应北大核心

【目的】探究了以单酯磷D-葡萄糖-6-磷酸二钠(D-glucose-6-disodium phosphate,GP)为唯一磷源时含砷(As5+)水体中不同氮磷质量比对铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)生长及砷代谢和微囊藻毒素(microcystins,MCs)释出的影响。【方法】将氮磷饥饿状态的藻细胞于含砷水体中不同氮磷比条件下进行实验,通过测定藻细胞密度(OD680)、叶绿素a(chlorophyll a,Chla)、实际光合产率(Yield)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、砷的存在形态以及微囊藻毒素含量,分析该藻在砷胁迫下的生理响应以及砷代谢机制。【结果】氮磷饥饿状态藻细胞对较高GP水平(0.1 mg/L)下的低氮磷比有更好的适应性,较低GP水平(0.02 mg/L)下的高氮磷比能显著促进培养初期藻细胞的OD680、Chla和Yield;SOD在培养初期与末期受氮磷比影响显著。GP环境下铜绿微囊藻经8 d培养后氮磷比为10:0.1介质中的砷表现为以亚砷酸盐(As^(3+))为主,占水体总砷(total arsenic,TAs)含量的78.8%,其余氮磷比环境中仍以As^(5+)为主,藻体砷形态则均以As^(5+)为主,氮磷比为1:0.1时有机砷占藻体TAs比例最高。藻细胞砷代谢受GP水平影响显著,较高GP环境(0.1 mg/L)下砷的代谢总量也更高,氮磷比为10:0.1时砷代谢以As^(5+)的还原和As^(3+)释出为主,低GP环境下(0.02 mg/L)砷代谢的甲基化水平提高。介质中MCs的含量与GP水平有关,较高GP的低氮磷比水体中MCs含量最低。【结论】研究结果对全面了解有机磷源含砷水体中藻华暴发及砷生态风险的科学管控具有重要意义。     

铜绿里叶甲的形态及生物学观察

<正> 铜绿里叶甲Linaeidea aenea L.属鞘翅目叶甲科。该虫是西伯利亚赤杨Alnus sibiricaFisch的重要食叶害虫。国内已知分布于吉林、辽宁。国外分布在欧洲;西伯利亚;日本。近年野外调查发现,在有赤杨分布的地方,铜绿里叶甲普遍发生,并且数量也比较大。为了掌握该虫的生物学特性,笔者于1988～1990年的5～9月间,在长白山自然保护区北坡,对该虫进行了较系统的室内外观察。现将结果报道如下。     

辽宁省近5年痰培养主要病原菌分布及临床意义

了解住院患者痰培养的病原菌分布及其对常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供参考.回顾性分析辽宁省2015年1月至2019年12月共3878份痰标本感染菌鉴定结果和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的药敏试验结果.采用法国梅里埃VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定,并...