肌源性调节蛋白MyoDl和肌球蛋白myosin在横纹肌肉瘤中的表达:免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ＳＰ方法,检测了肌源性调节蛋白ＭｙｏＤｌ和肌球蛋白ｍ ｙｏｓｉｎ 在３８例横纹肌肉瘤（ＲＭＳ） 中的表达。结果显示ＭｙｏＤｌ阳性表达主要定位于ＲＭＳ瘤细胞的胞核中; ｍ ｙｏｓｉｎ 的阳性表达定位于ＲＭＳ瘤细胞的胞浆中, 二者的表达阳性率分别为６５．８％ 和５５．３％ 。在ＲＭＳ不同病理分型中ＭｙｏＤｌ和ｍ ｙｏｓｉｎ 的阳性表达均无显著性差异。但ＲＭＳ分化程度低,ＭｙｏＤｌ阳性表达增强,ｍ ｙｏｓｉｎ 阳性表达下降。Ｍｙｏ－Ｄｌ在Ⅲ级（低分化） 中的表达阳性率显著高于Ⅰ级（高分化）、Ⅱ级（中等分化） 中的表达阳性率（Ｐ＜ ０．０５,Ｐ＜ ０．０５）。ｍ ｙｏｓｉｎ 在Ⅰ级中的阳性率显著高Ⅲ级中的表达阳性率（Ｐ＜ ０．０５）。本文认为, ＭｙｏＤｌ表达增高、ｍ ｙｏｓｉｎ 表达下降,不仅是ＲＭＳ生物学行为的重要特征,也为改进低分化ＲＭＳ的病理诊断和ＲＭＳ早期诊断提供了有益的思路。     

普伐他汀对泡沫细胞内胆固醇酯的影响及与小凹蛋白-1的关系

本文旨在观察普伐他汀对鼠源巨噬细胞性泡沫细胞内胆固醇酯含量的影响,探讨此作用与小凹蛋白一l的关系。采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,OX-LDL）使其形成泡沫细胞,运用高效液相色谱测定细胞内胆固醇酯的改变,同时运用Western blot检测细胞中小凹蛋白-1的表达,并观察普伐他汀对细胞内胆固醇酯和小凹蛋白-1影响的量效和时效关系。结果显示：普伐他汀可明显降低泡沫细胞内的胆固醇酯与总胆固醇的比值,且在一定范围内呈剂量依赖性和时间依赖性。在泡沫细胞中加入普伐他汀后能够促进小凹蛋白-1的表达,呈剂量依赖性和时间依赖性。上述结果提示普伐他汀通过降低细胞内胆固醇酯的含量,减轻细胞泡沫化程度。普伐他汀的这一作用可能与促进小凹蛋白-1表达上调有关。     

可溶性HLA-A*0203-BSP原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

目的：构建HLA-A*0203重链胞外域羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的融合蛋白（HLA-A*0203-BSP）的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法：以RT-PCR方法从HLA-A2+ 供者外周血单个核细胞(PBMC)中克隆HLA-A*0203重链基因的cDNA并测序鉴定,然后以PCR方法构建HLA-A*0203-BSP的原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达并以免疫印迹鉴定。结果：DNA测序显示,从3名HLA-A2+ 供者PBMC中克隆的cDNA中,只有从供者2获得编码HLA-A*0203重链基因的cDNA。将编码重链胞外域1-276的序列和编码BSP的序列融合,构建HLA-A*0203-BSP融合蛋白的原核表达载体并经测序验证。该融合蛋白在BL21(ED3)中获得高效表达,约占菌体总蛋白的30％;产物相对分子质量约为34 kD,与理论大小一致。Western印迹分析显示融合蛋白完全存在于包涵体中。结论：成功克隆HLA-A*0203重链基因的cDNA,构建HLA-A*0203-BSP融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达,为制备HLA-A*0203四聚体打下基础。     

转Bt基因抗虫玉米对亚洲玉米螟幼虫几种主要酶系活性的影响

研究了表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因抗虫玉米对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis (uenée) 幼虫解毒酶、保护酶和中肠蛋白酶活性的影响,测定比较了取食转Bt基因玉米后幼虫体内α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、中肠总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活力。结果表明,取食转Bt基因玉米48 h后亚洲玉米螟幼虫体内的α-乙酸萘酯酶、谷胱甘肽S转移酶活力明显低于对照;而乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照,在取食48 h、60 h和72 h的活力分别是对照的2.00、1.50和2.50倍。保护酶系、中肠总蛋白酶、弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活性在取食48 h后明显受到抑制;但强碱性类胰蛋白酶的活性显著高于对照,取食48 h、60 h和72 h的活力分别是对照的4.00、1.67和1.33倍。乙酰胆碱酯酶和强碱性类胰蛋白酶可能与亚洲玉米螟对Bt的抗性有关。     

非酶促转氨测定蛋白质相对分子量及研究空间结构的变化

在非酶促转氨过程中测定生成甘氨酸的量,计算蛋白质的相对分子量是一种方便、节省经费和快速的方法,该方法的应用不受蛋白分子量大小的限制。非酶促转氨的另一产物２－羰化氨基酸可作为制备各种喹喔啉衍生物的原料。苯丙氨酸非酶促形成的苯丙酮酸与邻苯二胺反应生成３－苯基－２－羰基喹喔啉。该产物在３６３ｎｍ具有荧光发色性质。胰岛素及不同一级结构的短肽２－羰酰衍生物和２－喹喔啉衍生物的荧光在盐酸胍和不同ＰＨ训的变化各     

蝮蛇毒蛋白C激活物对内毒素性离体大鼠心脏功能的影响

目的研究蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)组分对大鼠内毒素(LPS)性心肌损伤作用的影响。方法取SD雄性大鼠32只随机分成正常对照组、LPS组、PCA组和PCA LPS组,用Krebs-Henseleit(K-H)液对大鼠离体心脏行主动脉逆灌。在相应时点记录HR、LVSP、LVEDP、LVDP、 dp/dtmax、-dp/dtmax的变化,并测定冠脉流出液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果PCA明显减轻LPS诱导的心功能改变并抑制心肌SOD活性降低和MDA的升高(P<0.01)。结论PCA对内毒素诱导的心肌损伤改善作用明显,其机制可能是通过保护血管内皮功能,改善微循环,稳定心肌酶活性和膜相结构等途径有关。     

1株蛇足石杉根际铁载体细菌的分离、筛选与鉴定

对蛇足石杉根际铁载体细菌进行了分离、筛选与鉴定,以期筛选到潜在高效促生细菌.采用梯度稀释涂平板法从蛇足石杉根际土中分离细菌,再通过CAS检测平板分析,从中筛选出1株产生铁载体能力较强的菌,并结合16S rDNA基因系统发育分析对可产铁载体的蛇足石杉根际细菌初步鉴定.从蛇足石杉根际中筛选到1株产铁载体细菌JSX 389,经鉴定为Lysinibacillus属菌株.     

miR396基因家族的进化及功能分析

MicroRNA(miRNA)是由约22个核苷酸组成的内源性非编码小分子RNA,广泛存在于真核细胞中,通过与靶基因的互补配对在转录后水平对基因表达进行调控,导致mRNA的降解或翻译抑制。本文通过对目前miRBase中收录的miR396家族进行生物信息学分析发现,该家族在植物界中高度保守,它们可能起源于较为古老的物种,经历长期复杂的进化过程而保留了下来;靶基因预测结果显示生长调控因子GRF为其主要靶标;启动子分析表明, miR396编码基因的上游存在光、温度、激素、厌氧、干旱及病害等胁迫响应相关的顺式作用元件,它们可与转录因子结合,参与多种胁迫应答反应。本文可为全面深入研究miRNA的作用机制奠定基础。     

基于双聚类挖掘癌症共享的基因功能模块

基因多效性是癌症遗传机制中的普遍现象, 但罕见系统性的分析。文章提出采用双聚类挖掘基因功能模块的新思路探索癌症的共享分子机制和不同癌症间的关系。获取20种癌症的基因表达数据, 应用改良t检验和倍数法筛选出至少在两种癌症中差异表达的基因, 得到10417×20的数据矩阵; 采用双聚类方法获得22个癌症共享的基因簇; 进一步富集分析得到17个基因功能模块(Bonferroni校正后P<0.05), 主要参与有丝分裂染色单体分离的调控、细胞分化、免疫和炎症反应、胶原纤维组织等生物过程; 主要执行ATP结合和微管活动、MHCⅡ类受体活性、肽链内切酶抑制活性等分子功能; 活动区域主要在细胞骨架、染色体、MHCⅡ蛋白质复合体、中间丝蛋白、胶原纤维等。基于模块构建癌症相关网络, 显示胃癌、卵巢腺癌、宫颈鳞癌和间皮瘤等之间相关程度较高, 而两种血液系统癌症(急性髓细胞性白血病与多发性骨髓瘤)分子机制与其他癌症存在较大差异。可见癌症共享的基因功能模块与多种生物机制有关, 癌症之间相似性可能与组织起源、共同的致癌机制等有关。文章提出的基因多效性分析方法有助于解释人类复杂性疾病的共享分子机制。     

无乳链球菌临床株对四环素类的敏感性研究

为探讨无乳链球菌对四环素类的敏感性及其与耐药基因、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)之间的关系,本研究收集2014—2017年深圳市南山区人民医院分离自患者的136株无乳链球菌临床分离株,采用琼脂平板稀释法分析四环素类最低抑菌浓度(minimum inhibitory co...