全文获取类型
收费全文 | 479篇 |
免费 | 35篇 |
国内免费 | 277篇 |
出版年
2024年 | 22篇 |
2023年 | 41篇 |
2022年 | 43篇 |
2021年 | 37篇 |
2020年 | 22篇 |
2019年 | 21篇 |
2018年 | 11篇 |
2017年 | 11篇 |
2016年 | 18篇 |
2015年 | 15篇 |
2014年 | 32篇 |
2013年 | 24篇 |
2012年 | 39篇 |
2011年 | 31篇 |
2010年 | 23篇 |
2009年 | 33篇 |
2008年 | 49篇 |
2007年 | 28篇 |
2006年 | 22篇 |
2005年 | 21篇 |
2004年 | 24篇 |
2003年 | 19篇 |
2002年 | 25篇 |
2001年 | 32篇 |
2000年 | 11篇 |
1999年 | 22篇 |
1998年 | 16篇 |
1997年 | 15篇 |
1996年 | 11篇 |
1995年 | 12篇 |
1994年 | 10篇 |
1993年 | 9篇 |
1992年 | 11篇 |
1991年 | 1篇 |
1990年 | 9篇 |
1989年 | 7篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 4篇 |
1986年 | 1篇 |
1985年 | 4篇 |
1984年 | 1篇 |
排序方式: 共有791条查询结果,搜索用时 15 毫秒
161.
目的 将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果制备出抗阴道毛滴虫多克隆抗体,抗体效价在1:8000以上,用于免疫印迹实验。经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)分析,重组质粒在大肠埃希菌中表达出Fd。结论在大肠埃希菌中表达出了Fd。 相似文献
162.
摘要 目的:探讨甲硫氨酸限制对骨肉瘤细胞增殖,凋亡和铁死亡的影响。方法:使用细胞计数检测剥夺甲硫氨酸对三株不同的骨肉瘤细胞系增殖的影响;高通量测序(RNA-seq)分析甲硫氨酸限制后骨肉瘤细胞的转录组学变化;流式细胞术检测细胞周期,凋亡以及ROS,脂质ROS水平;Western blot检测铁死亡关键蛋白谷胱甘肽过氧化物GPX4以及铁死亡标志蛋白前列腺素内过氧化物合成Cox-2的表达。结果:甲硫氨酸限制显著抑制骨肉瘤细胞的增殖(P<0.001);RNA-seq分析筛选出1719个差异表达基因,基因富集分析发现甲硫氨酸限制可显著激活铁死亡通路并显著抑制细胞周期通路;细胞实验证实甲硫氨酸限制将骨肉瘤细胞阻滞在G2M期,显著诱导凋亡细胞比例增加;同时,细胞内Cox-2的表达增加,GPX4的活性降低,活性氧和脂质活性氧积累,最终导致细胞死亡,且这种作用可以被铁死亡抑制剂Fer-1部分挽救。结论:本研究的结果为甲硫氨酸限制治疗骨肉瘤提供了一定的科学依据。 相似文献
163.
164.
该研究探究铁过载对Wnt信号诱导的小鼠骨髓基质细胞(ST2)成骨分化的作用及其可能的机制.采用柠檬酸铁铵(FAC)模拟铁过载微环境,用碱性磷酸酶(ALP)染色及生化定量检测成骨分化水平,qRT-PCR检测成骨分化标志基因Alp、Runx2、Osx、Coll以及Wnt信号靶基因Smad6、CyclinD1、Lef1、BM... 相似文献
165.
铁代谢与铁调素hepcidin 总被引:10,自引:0,他引:10
铁是机体必需的营养元素。然而,铁过载则导致细胞的损伤。由于生物体缺少排泄铁的机制,因而,肠铁吸收的调控便成为维持机体铁稳态的关键。新近研究发现hepcidin对机体铁稳态的调节起着至关重要的作用,被人们称为铁调节激素。Hepcidin主要在肝细胞中合成,之后分泌至血液将体内铁需要的信号传至小肠,调控肠铁的吸收。这一过程主要通过调节小肠铁转运相关蛋白的表达而实现。任何影响hepcidin表达的因素都可能破坏体内的铁平衡,造成铁代谢相关疾病。 相似文献
166.
Hepcidin:具有抗菌活性的铁调节激素 总被引:2,自引:0,他引:2
Hepcid in是近年来发现的由肝细胞分泌的小分子多肽,具有广谱抗菌活性,同时也参与铁代谢,目前认为它是维持铁稳态极其重要的负激素,并参与或介导多种铁代谢紊乱性疾病。本文就hepcid in的鉴定、结构、功能及其与铁代谢紊乱性疾病的研究进展作一综述。 相似文献
167.
168.
研究了鲁米诺化学发光体系测定痕量铁的条件.在选定条件下测定铁(Ⅲ)的线性响应范围为0.2 ng/ml-0.1 μg/ml,检出限为0.0014 ng/ml,对含0.5 ng/ml的试样进行10次重复测定,其结果的变异系数为3.4%.对二十几种常见阴阳离子的干扰情况进行了试验和讨论.将本方法应用于正常人血清中微量铁的测定,结果较满意. 相似文献
169.
170.
二氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是青蒿素的一种衍生物,在多种肿瘤中表现出明显的抗肿瘤活性,但其具体机制不详。本文探讨了DHA对肝癌细胞的毒性作用机制。利用CCK-8试剂检测DHA对肝癌细胞株活力的影响,通过荧光探针染色及流式细胞术分析细胞内ROS及脂质过氧化物水平的变化;通过谷胱甘肽测定试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽含量的变化,并通过免疫印迹分析DHA作用下细胞内铁死亡通路蛋白质中GPX4的变化。结果发现,DHA能显著抑制SMMC-7721及Huh-7细胞活力,其半数抑制浓度分别为23.74 μmol/L及26.92 μmol/L。 在35 μmol/L DHA 处理下,SMMC-7721及Huh-7细胞内ROS分别升高2.6倍和2.1倍,脂质过氧化物升高2.3倍和1.7倍。DHA可诱导细胞内GSH含量下降,并能下调铁死亡相关蛋白质GPX4蛋白水平。通过利用小分子抑制剂进行功能恢复实验发现,ROS抑制剂、铁螯合剂及铁死亡抑制剂都可不同程度恢复DHA引起的细胞活力下降。进一步检测发现,铁死亡抑制剂可抑制DHA诱导的脂质过氧化,并恢复GSH含量及GPX4蛋白水平。结果表明,在肝癌细胞中,DHA可通过诱导细胞发生铁死亡抑制肝癌细胞生长。 相似文献