新疆雪莲新的内切几丁质酶类冷诱导基因的分离、克隆和测序

通过RT-PCR技术,从经低温驯化的新疆雪莲的叶片中分离克隆了1个新的基因.实验证明,此基因的转录是由低温诱导激活,且随着雪莲低温驯化时间的推移,转录本的量明显增加.测序结果显示,此基因全长643 bp,编码200个氨基酸.序列分析发现,此基因属于Ⅱ类内切几丁质酶基因.初步预测此基因的编码产物可能具有抗冻活性.     

不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响

在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH⁺₄ NO^-₃比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0.5mg LGA₃和 0.5mg LIBA ;pH5.8;18h d的光照 (光强为 35.0.0lx) ;2.4℃ ;摇床转速为 100rmin有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过21d的培养毛状根生长量达到 12.8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192.2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2.5倍。     

新疆理化所建立雪莲规模化组培快繁技术体系

日前,中国科学院高技术研究与发展局组织专家对“西部行动”项目“新疆雪莲规模化组培快繁技术研究”进行了验收。项目由中国科学院过程工程研究所和中国科学院新疆理化技术研究所协作承担。     

水母雪莲培养细胞对糖尿病小鼠血糖的影响

目的:探讨水母雪莲细胞培养物对糖尿病小鼠的降血糖作用。方法:将KKay糖尿病小鼠随机分为水母雪莲组、二甲双胍组和对照组,连续灌胃6周,每7 d称重并测量给药后3 h的空腹血糖,6周后测试药物的时-效关系及动物的糖耐量,最后检测甘油三酯、胆固醇、血清胰岛素等生化指标。结果:KKay小鼠饲喂雪莲7 d后,血糖值明显下降(P0.01),在此后的5周时间内,一直维持在较低血糖水平,其效应与阳性药物二甲双胍类似。连续给药6周后,雪莲组动物的糖代谢调节能力得到明显改善,甘油三酯、胆固醇、血清胰岛素较对照组显著降低。与二甲双胍组相比,雪莲的时-效关系表现为起效时间长、维持时间久等特点,即血糖值在给药后6 h明显下降,14 h达到最低,20 h左右逐渐恢复到给药前水平;而二甲双胍在给药后2 h即可见血糖明显下降,6 h血糖值最低,14 h后逐渐恢复到药前水平。结论:雪莲细胞培养物能有效降低KKay糖尿病小鼠的血糖水平,其作用机制可能与胰岛素的敏感性增加以及脂代谢调节有关。     

转天山雪莲冷调节蛋白基因烟草的获得及其抗寒性鉴定

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF);构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析。结果表明:(1)siCOR大小661bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04%)。(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快;在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻。研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征。     

启动子RD29A对转雪莲SikCDPK1基因烟草抗逆性的影响

探究逆境诱导启动子RD29A对转雪莲SikCDPK1基因烟草抗逆性的影响,为SikCDPK1基因在植物遭遇低温、干旱时更好发挥作用奠定基础。采用基因重组技术构建RD29A启动子驱动SikCDPK1基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法遗传转化烟草,分别观察、测定和比较分析低温、干旱处理后,RD29A::SikCDPK1转基因烟草、35S::SikCDPK1转基因烟草和非转基因烟草的表型、POD活性、SOD活性、叶绿素含量、MDA含量和相对电导率的差异。结果显示,干旱和低温胁迫后,RD29A::SikCDPK1转基因烟草的生长状况优于35S::SikCDPK1转基因烟草,更优于非转基因烟草;同时,RD29A::SikCDPK1转基因烟草的POD活性、SOD活性、叶绿素含量显著高于35S::SikCDPK1转基因烟草,极显著高于非转基因烟草;但MDA含量与相对电导率显著低于35S::SikCDPK1转基因烟草,极显著低于非转基因烟草。表明启动子RD29A可通过减缓叶绿素降解速率、提高抗氧化系统酶活性、减小膜通透性,使转基因烟草表现出更强的干旱、低温耐受性。     

水母雪莲通气组织形成的相关基因SmLSD1克隆及表达

该研究以水母雪莲为实验材料,通过RT-PCR结合RACE技术克隆了通气组织形成相关基因SmLSD1(GenBank登录号为OL690334),并对该基因在不同胁迫下的表达量及编码蛋白结构进行测定分析。结果表明：(1)水母雪莲SmLSD1基因全长965 bp,包含537 bp的开放阅读框,编码178个氨基酸。(2)同源序列比对发现,水母雪莲SmLSD1蛋白与菊科植物牛蒡LSD1的氨基酸序列相似性最高,达到98.31%。(3)亚细胞定位显示SmLSD1基因主要在细胞核和细胞膜上表达;原核表达显示,SmLSD1基因编码氨基酸的分子量约为18 kD。(4)荧光定量分析显示,SmLSD1基因在根、茎、叶中均有表达,且在叶片中表达量最高;在低温、低氧及紫外胁迫下,SmLSD1基因的表达量下调。研究推测,SmLSD1基因在水母雪莲通气组织的形成以及对逆境胁迫的响应中发挥着重要作用。     

雪莲蚁王酒的医疗作用与保健价值

蚂蚁是一种天然药物,当前已成为世界上具有开发价值的药物和食品。中国蛇协沈阳生物资源医用研究所利用长白山黑多刺蚂蚁及天山雪莲为主料,伍用蝮蛇、桂元肉等中药,以低度白酒浸泡,经科学加工研制的雪莲蚁王酒,具有散寒祛湿、强筋壮阳、补肝益肾及抗衰老等作用,临床...     

水母雪莲的幼根培养及植株再生

1　植物名称　水母雪莲 (Ｓａｕｓｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａ) ,藏药中称为恰羔素巴。2　材料类别　无菌苗的根。3　培养条件　诱导愈伤组织培养基以ＭＳ、Ｃ1 7或Ｗ 1 4为基本培养基 ,附加 2 ,4 Ｄ 1～ 2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) 肌醇 2 0 0 蔗糖 3% 琼脂 0 .5%。继代培养基为ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 肌醇 2 0 0 ＣＨ 30 0 蔗糖 3%～ 5% 琼脂 0 .5%。分化培养基配方为 1 /2ＭＳ ＫＴ 1 ＣＨ 30 0 肌醇 2 0 0 蔗糖 3% 琼脂0 .5% ,再附加 ( 1 )ＮＡＡ 0 .5 6 ＢＡ 1或 ( 2 )ＮＡＡ1 6 ＢＡ 2。所用培养基的 ｐＨ均调为 5.8。培养温度为…     

我国雪莲植物的种类 生境分布及化学成分的研究进展

本文对雪莲花的原植物种类、生境分布、生长习性做了分析整理,并对新疆雪莲、水母雪莲、雪兔子等六种雪莲植物化学成分研究进展进行了综述。从比较已有的实验结果中发现不同种雪莲在其特定生境下的化学成分既有属的同一性又存在种的特征性差异。这不仅为植物化学分类提供了证据,也为细胞大量培养选用品质优秀的原植物材料提供了资料。