安徽庐江鸭乙型肝炎病毒LJ-76转染细胞系的建立

为建立鸭乙型肝炎病毒ＬＪ－７６的转染细胞系,将ＬＪ－７６病毒ＤＮＡ插入到ｐＵＣ１９的ＥｃｏＲⅠ位点上,分离得到含有双拷贝ＬＪ－７６ＤＮＡ的重组质粒．通过磷酸钙沉淀方法,将经ＣｓＣｌ等密度离心纯化的ＬＪ－７６ＤＮＡ双体导入到人肝癌细胞ＢＥＬ７４０２中．收集转染细胞的培养液进行蔗糖密度梯度离心,所得沉淀经检测发现含有ＬＪ－７６ＤＮＡ并具有特异性ＤＨＢＶ内源性ＤＮＡ多聚酶活性;对上述样品通过ＤｏｔＥＩＡ检测ＤＨＢＶ核心抗原及表面抗原结果为阳性．Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明转染细胞内存在病毒ＤＮＡ复制中间体ｃｃｃＤＮＡ、ｓｓＤＮＡ和ｒｃＤＮＡ,而ｃｃｃＤＮＡ被认为是复制活动较为活跃的标志．电镜观察转染细胞的上清发现有病毒颗粒的存在．     

稻鸭共作对水稻条纹叶枯病发生规律的影响

由灰飞虱传毒危害的水稻条纹叶枯病是近年来在我国部分稻作区严重发生的病毒病害.作为稻作生产生态实践模式之一的稻鸭共作技术对稻田病虫草具有显著的控制效应,然而目前还没有关于稻鸭共作对灰飞虱和条纹叶枯病影响的报道.因此,于2004～2005年在南京农业大学东台试验场进行了田间实验,共设计了4个处理,分别为常规稻作区（不养鸭、施药）、稻鸭共作区（养鸭、不施药）和秧田期覆盖防虫网、栽后大田稻鸭共作区（秧田覆盖防虫网、栽后稻田养鸭、不施药）和对照区（不养鸭、不施药）.结果表明：稻鸭共作以及秧田期覆盖防虫网、栽后大田稻鸭共作处理对灰飞虱有显著的控制效应,因此也显著降低了两处理在水稻整个生长期间条纹叶枯病的发病率;稻鸭共作处理对条纹叶枯病的综合防效为79.44﹪,略高于常规稻作78.82﹪的防效,而秧田期覆盖防虫网、栽后大田稻鸭共作处理对稻田灰飞虱和条纹叶枯病的防治效果最好,对条纹叶枯病的防效超过94.01﹪.总之,通过以上试验结果可知,稻鸭共作尤其是秧田期覆盖防虫网、栽后稻鸭共作处理为防治条纹叶枯病提供了一条安全高效的生态控制途径.     

错位双链RNA,丙氧鸟苷和原核细胞DNA促旋酶B对鸭乙肝病毒的抑制作用

人工合成错位双链ＲＮＡ（ａｍｐｌｉｇｅｎ）是一种已知的干扰素诱导剂。单独和／或与其它抗病毒药物联合使用治疗鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）阳性鸭。这些药物包括丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）和原核细胞ＤＮＡ促旋酶Ｂ抑制物（ｃｏｕｍｅｒｍｙｃｉｎＡｌ）。单独和／或联合该两种药物时,对鸭血清和肝组织内ＤＨＢＶ均有抑制作用,但以三种药物联合时抑制效果最好。上述下种方案治疗结束后肝内松弛环状ＤＮＡ（ＲＣ）和超螺旋ＤＮＡ（ＳＣ）持续存在,而且不能消除血中鸭乙肝表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）。对治疗的大多数鸭血清干扰素,测定结果表明,ａｍｐｌｉｇｅｎ能诱生鸭干扰素,但其出现时间与抗病毒效果产生没有平行关系。本研究为人慢性乙型肝炎治疗合理使用抗病毒药物和免疫诱导剂提供了参考。     

鸭乙型肝炎病毒复制复合体（DHBVRCs）的提纯及其对外源模板的利用

鸭乙型肝炎病毒复制复合体（ＤＨＢＶＲＣｓ）的提纯及其对外源模板的利用邵兴无,陶佩珍,郭巨涛,陈鸿珊（中国医学科学院医药生物技术研究所,北京１０００５０）关键词鸭乙型肝炎病毒复制复合体,ＤＮＡ聚合酶,核心抗原,外源模板１鸭乙型肝炎病毒复制复合体（ＤＨＢ...     

鸭疫里默氏杆菌流行菌株的分离鉴定及生物学特性

【背景】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是引起雏鸭、鹅、火鸡等多种家禽、野禽发生传染性浆膜炎的病原,在全世界范围内广泛存在,危害养禽业发展,造成严重的经济损失。【目的】了解国内RA的流行现状,探究该菌的生物学特性,更好地指导防控鸭疫里默氏杆菌病。【方法】对2020-2021年从山东省、河北省、广东省、山西省等地分离的RA疑似菌株进行PCR、生化和血清型鉴定,并根据药物敏感性结果分析耐药现象,根据半数致死量(median lethal dose,LD₅₀)测定结果分析致病力差异。【结果】共鉴定78株RA分离株,其中,血清1型4株、2型21株、10型11株、6型3株、7型17株,1株有交叉凝集现象,21株血清型未定型;药敏结果显示78株分离株对多粘菌素B、磷霉素、克林霉素等的耐药性最强,对头孢拉定、多西环素、呋喃唑酮、氟苯尼考等抗生素最为敏感,并且78株分离株均存在多重耐药性,其中77株耐药5重及以上;动物试验结果显示,RA的分离株致病力普遍较强,而且不同地区分离株、同地区不同分离株之间均存在差异,数株RA分离株的LD₅₀在10⁴-10⁷ CFU不等。【结论】RA在国内流行表现了强致病力及严重耐药情况,本研究结果为更好地预防控制、临床用药及后续致病机制研究提供了参考依据。     

西藏鸟类新纪录——夜鹭

<正>2014年1月21日下午在西藏自治区贡嘎县索岗村雅鲁藏布江边(29°16'59.40″E,91°5'13.10″N)观察到4只鹭鸟正在灌丛上休息,该鸟头顶及背部黑色,胸部白色,颈背具两条白色丝状羽,根据这些羽色颜色及形态特征确定为夜鹭Nycticorax nycticorax的成鸟。与夜鹭在同域活动的还有普通鸬鹚Phalacrocorax carbo、针尾鸭Anas acuta、斑头雁Anser indicus、黑颈鹤Grus nigricollis等水鸟正在附近农田中取食。经查阅《中国鸟类野外手册》(马敬能等,1999)、《中国鸟类分类与分布名录》(郑光美,     

氧化苦参碱在鸭原代肝细胞中抗鸭乙肝病毒(DHBV)作用的研究

通过建立鸭原代肝细胞-DHBV感染模型研究氧化苦参碱抗DHBV的作用。分别在DHBV感染前、感染同时以及感染后给药,利用打点杂交、Southern印迹核酸杂交和荧光定量PCR方法分别检测培养细胞上清及细胞内病毒核酸,观察氧化苦参碱在病毒感染的各个环节所起的抗病毒作用。实验结果显示:1mg/mL氧化苦参碱处理细胞后,鸭原代肝细胞培养上清及细胞内的DHBV核酸明显低于病毒感染对照组,病毒抑制率达91.6%;在病毒感染同时加药对病毒的抑制率可达98.5%;感染后持续用药能使不同培养天数的鸭肝细胞内的DHBV核酸降低60.5%~96.6%;氧化苦参碱与DHBV共孵育后,可以使病毒感染力下降69.6%。结果说明氧化苦参碱可以在DHBV感染鸭原代肝细胞的多个环节,包括病毒吸附、进入细胞及细胞内复制等方面发挥抗病毒作用。     

雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒致鸭胚成纤维细胞凋亡初探

细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡[1](Programmed Cell Death,PCD),是细胞在内处物理、化学、生物等因素作用下启动系列自身调节基因而发生的一种生理性细胞死亡过程.     

鸭儿芹根、茎、叶挥发油的化学成分

采用水蒸气蒸溜法提取其根、茎、叶中的挥发油,利用GC-MS联用仪对其化学成分进行分析,以归一化法计算各个化学成分的相对含量.鸭儿芹根挥发油中共分离出11个峰,鉴定出11种化合物,占总离子峰的98.61％,主要成分为α-芹子烯、γ-芹子烯等;茎中共分离出25个峰,鉴定出25种化合物,占总离子峰的100.00％,主要成分为...     

血清2型鸭疫里默氏杆菌脂多糖单克隆抗体的研制及特性鉴定

【背景】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)可感染雏鸭、鹅、火鸡等多种禽类,引起急性或慢性传染病。RA血清型众多且各血清型之间缺乏有效的交叉保护。细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)位于革兰氏阴性菌细胞壁的外侧,其组成和结构变化决定了细菌表面抗原决定簇的多样性。【目的】制备血清2型鸭疫里默氏杆菌LPS单克隆抗体并对其特性进行研究。【方法】以血清2型RA NJ3株免疫BALB/c小鼠,细胞融合后以RA NJ3株LPS作为包被抗原,筛选出能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过体内诱生腹水法制备抗体,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测单克隆抗体效价,玻片凝集试验和Westernblot检测单抗特异性。【结果】获得两株能稳定分泌抗血清2型鸭疫里默氏杆菌LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为8G5和8G10;两株单抗的亚型均为IgM/κ链。ELISA结果表明,8G5和8G10腹水效价分别为1:32 000和1:16 000。Western blot结果显示,两株单抗仅与血清2型RA菌株发生特异性反应,而与其他血清型RA菌株和禽源致病菌无反应性。【结论】研究获得的单克隆抗体具有良好的反应性和血清型特异性,可用于RA致病机制的基础研究和进一步建立RA血清型快速检测方法。