全文获取类型
收费全文 | 4650篇 |
免费 | 355篇 |
国内免费 | 1747篇 |
专业分类
6752篇 |
出版年
2024年 | 32篇 |
2023年 | 98篇 |
2022年 | 145篇 |
2021年 | 175篇 |
2020年 | 136篇 |
2019年 | 136篇 |
2018年 | 125篇 |
2017年 | 163篇 |
2016年 | 132篇 |
2015年 | 159篇 |
2014年 | 276篇 |
2013年 | 233篇 |
2012年 | 252篇 |
2011年 | 288篇 |
2010年 | 242篇 |
2009年 | 265篇 |
2008年 | 374篇 |
2007年 | 292篇 |
2006年 | 310篇 |
2005年 | 309篇 |
2004年 | 301篇 |
2003年 | 292篇 |
2002年 | 267篇 |
2001年 | 215篇 |
2000年 | 174篇 |
1999年 | 158篇 |
1998年 | 134篇 |
1997年 | 105篇 |
1996年 | 122篇 |
1995年 | 147篇 |
1994年 | 108篇 |
1993年 | 69篇 |
1992年 | 78篇 |
1991年 | 102篇 |
1990年 | 66篇 |
1989年 | 70篇 |
1988年 | 28篇 |
1987年 | 39篇 |
1986年 | 28篇 |
1985年 | 44篇 |
1984年 | 28篇 |
1983年 | 13篇 |
1982年 | 10篇 |
1981年 | 11篇 |
1980年 | 1篇 |
排序方式: 共有6752条查询结果,搜索用时 0 毫秒
101.
人胰岛素原C肽的合成及专一性抗体制备 总被引:4,自引:1,他引:4
利用固相多肽合成中的Boc途径合成了人胰岛素原C肽 ,经TSK柱层析一步纯化 ,产物达HPLC及毛细管电泳均一 ,蛋白质序列分析和质谱分析符合理论值 ,总回收率高达 41 %。为了提高寡肽抗体的专一性 ,我们将丙烯酰化的C肽经催化聚合形成了以聚丙酰为骨架 ,C肽为侧链的聚合体 ,分子量约为 2 5kD。免疫新西兰大白兔 1月 ,获得专一性抗体。用酶联免疫吸附法测得抗血清滴度达 2 .5× 1 0 4 ,与BSA无交叉反应。聚丙酰C肽抗原是制备C肽抗体的一种新的尝试 ,而且也可能成为新的多肽工程疫苗之一 ,为其他传染性疾病多肽疫苗的研究提供新的途径 相似文献
102.
p53可以同细胞内的许多种蛋白质形成复合物从而参与细胞周期调节、基因表达调控、细胞分化、细胞程序化死亡和抑制肿瘤的发生等各项生理过程。为了筛选与p53作用的蛋白质因子,利用酵母双杂交(two-hybrid)系统,筛选了HeLa细胞的cDNA文库。在1.5×106个转化子中筛选到6个阳性克隆。经DNA全序列分析,结果表明5个阳性克隆中的cDNA序列编码产物均由158个氨基酸构成,分子量为17kD的人泛肽交联酶。同源性比较表明,该泛肽交联酶与人的UBC9(97%)、线虫的UBC(76%)、裂殖酵母的HUS5(66%)、拟南芥菜的UBC(66%)和啤酒酵母的UBC9(56%)有较高的同源性。进行了16种正常人组织和7种肿瘤细胞株的Northern杂交分析,结果显示:它在心脏、胎盘、胸腺、睾丸、卵巢、结肠和外周血白细胞中的表达较在肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、前列腺和小肠中为高,而在脑和肺中则检测不到表达。它在宫颈癌细胞株、乳腺癌细胞株、淋巴瘤细胞株和畸胎瘤细胞株中的表达较高,而在肺癌细胞株、肝癌细胞株和神经胶质瘤细胞株中则无明显表达。 相似文献
103.
在无盐条件下,外源乙烯对苜蓿种子萌发有促进作用,但对最终发芽率无影响。盐渍严重抑制苜蓿种子萌发,加入1~50μl/L(v/v)外源乙烯或0.1~5.0mmol/L1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)或5~100mg/L(w/v)乙烯利(ETH)均能极显著地减轻NaCl对苜蓿种子萌发的抑制作用。激动素(KT)也有类似作用,并能促进萌发种子的乙烯产生,它与ACC一起使用,则对种子萌发和乙烯产生均显示加成作用。在NaCl胁迫下,应用乙烯和乙烯利虽有利萌发,但幼芽鲜重和下胚轴长度明显低于无盐对照。 相似文献
104.
反义寡核苷酸可作为基因表达的抑制剂和潜在的治疗药物,但多种类型的寡核苷酸为聚阴离子化合物,难以跨过细胞膜.已知包括融合肽、信号肽在内的多种生物活性多肽具有跨膜与核定位能力.讨论了反义寡核苷酸-肽缀合物的合成和生物活性. 相似文献
105.
人细胞质硫氧还蛋白(hTrx1)在抗氧化和氧化还原调控中起重要作用.如果静脉注射重组hTrx1,动物抗氧化能力将增高.近年来,随着人们对氧化还原调控的关注,hTrx1需求不断增加.为了快速获得高纯度重组hTrx1,N末端亲和标签,如组氨酸标签(His-tag)和谷胱甘肽S-转移酶标签(GST-tag),被用于hTrx1亲和纯化.带N末端标签的hTrx1融合蛋白在实验中用的越来越多.但N末端延长是否会影响hTrx1特性尚不清楚.我们构建与优化了hTrx1原核表达质粒,在大肠杆菌中高效表达了含天然N末端、带His-tag或带GST-tag的3种重组hTrx1.纯化蛋白在SDS-PAGE上呈现1条带,对应的分子量分别为12kD、17kD及38kD.在无氧化剂存在时,它们催化胰岛素还原的能力不分仲伯.当有H2O2存在时,天然N末端hTrx1通过形成可逆二聚体,对H2O2表现出较强的耐受性;而N末端亲和标签有干扰二聚体形成,使hTrx1对H2O2耐受性降低的作用,其中GST-tag干扰作用明显大于His-tag.此外,体内重要的氧化还原对GSH/GSSG,有增进hTrx1及其还原酶催化NADPH氧化的作用,N末端亲和标签可明显扩大GSH/GSSG的这种作用.我们分析了N末端亲和标签对hTrx1活性影响的可能机理. 相似文献
106.
108.
现代生物医药的发展越来越依赖大分子药物的开发与应用,其中蛋白质药物所占的比重越来越高,生产需求进一步加大.重组蛋白质技术作为一种方便的蛋白质生产来源,日益得到广泛运用.重组蛋白质纯化过程中往往使用到融合亲和纯化标签,然而这些冗余的标签在蛋白质精细化生产中,尤其是作为蛋白质医药存在时,是必须被予以去除的.切割蛋白酶发挥着不可替代的作用.本文就现有的各种常用切割蛋白酶进行比较和总结,为重组蛋白质生产与科研者提供参考. 相似文献
109.
110.
基因组编辑技术可以对DNA或RNA进行精准改造,极大地促进了生命科学的发展。CRISPR/Cas9系统在靶位点诱导DNA发生双链或单链损伤,细胞对损伤部位采用无供体模板的非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)或有供体模板的同源重组(homologous recombination,HR)修复。基于HR的基因组编辑策略通常被用于获得DNA的精准改造,而NHEJ在动物DNA损伤修复中起主导作用。为了提升HR效率,研究人员设计了多种方案,包括CRISPR/Cas9系统优化和DNA修复通路调控等。从DNA损伤修复途径、Cas9变体选择、sgRNA设计、供体模板设计、DNA修复途径相关蛋白功能调控、供体模板募集效率提升、细胞周期调控及编辑细胞生存效率提升等方面详细综述了相关研究成果,发现尚未开发出放之四海而皆准的HR提升策略,基于HR的基因组编辑需要针对具体案例制定个体化策略。旨在为动物基因组编辑中提升CRISPR/Cas9介导的HR效率研究提供理论参考,为动物基因功能分析、基因治疗和经济动物基因编辑育种提供帮助。 相似文献