血红素加氧酶-1介导CD4+CD25High调节性T淋巴细胞拮抗哮喘气道炎症的实验研究

探讨血红素加氧酶-1(HO-1, heme oxygenase-1)介导CD4⁺CD25^High调节性T淋巴细胞(Treg, regulatory T cells)拮抗哮喘气道炎症的作用. 用卵清蛋白(OVA)致敏、激发小鼠制备并建立哮喘动物模型, 并在致敏、激发过程中经氯化高铁血红素(Hemin)或锡-原卟啉(SnPP, Sn- protoporphyrin)处理. 分别测定激发后各组动物血清OVA特异性IgE, 支气管肺泡灌洗液中(BALF, bronchial alveolar lavage fluid)细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS, eosinophil)数及外周血CD4⁺CD25^High Treg细胞变化和肺组织HO-1和Foxp3 mRNA表达量, 结合病理切片分析气道炎症状况. 结果显示: OVA组、Hemin组、SnPP组血清OVA-特异性IgE和BALF中细胞总数及EOS数明显高于正常对照组, 但Hemin组IgE水平及BALF中细胞总数和EOS数明显低于OVA组; 而OVA组和SnPP组间IgE水平及BALF中细胞总数和EOS数无显著性差异; 病理组织学显示OVA组、Hemin组和SnPP组气道组织均见EOS浸润, 但Hemin组气道炎症仍明显轻于OVA组和SnPP组; Hemin组外周血CD4⁺CD25^High Treg细胞比例及肺组织Foxp3 mRNA相对表达量明显高于OVA组. Hemin显著上调HO-1表达. 实验表明, 用Hemin诱导HO-1高表达后外周血CD4⁺CD25^High Treg细胞比例及Foxp3 mRNA相对表达量明显升高, 同时血清OVA特异性IgE明显下降, BALF中细胞总数和EOS数减少, 气道炎症减轻; 提示HO-1可通过提高CD4⁺CD25^High Treg细胞比例并增强其功能来调节体内Th1/Th2平衡, 在支气管哮喘中起到保护作用.     

重症肺结核的护理

重症肺结核病人,多为难治性肺结核并发肺部感染如肺气肿等其它合并症,患者的预后欠佳,病死率高,综合护理十分重要。我们自1999年10月～2004年10月,共收治重症肺结核病人48例,现将护理报告如下。     

哮喘动物模型评价与观察指标的研究进展

全面、成功地评价一个与临床发病机制相似的、稳定可靠的支气管哮喘动物模型非常重要,本文参考近年来哮喘动物模型的一般评价指标和机理研究评价指标,对观察与评价指标的研究进展进行了整理分析,以供参考。     

支气管哮喘小鼠模型气道血管变化及其影响因子分析

目的明确支气管哮喘时血管网络及血管内皮细胞变化,以及血管内皮生长因子（VEGF）亚型及其受体在支气管哮喘小鼠模型气管及肺组织中的变化及作用。方法在建立小鼠支气管哮喘模型的基础上,应用免疫荧光染色和HE染色观察气道旁血管密度变化并计数不同血管单位长度上内皮细胞数量,应用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测气管和肺组织血管内皮生长因子（VEGF）亚型及其受体mRNA表达情况。结果1.随着疾病时间的延长,小鼠气道壁血管密度增加,血管内皮细胞数量逐渐增加,特别在慢性期小血管尤为明显;2.应用RT-PCR技术及琼脂糖凝胶电泳,小鼠气管及肺组织VEGF120,VEGF164,VEGF188和VEGF205各个亚型mRNA均增高。其中VEGF164在气管组织,VEGF188在周围肺组织中mRNA表达在慢性哮喘期明显增高,少见的亚型VEGF144只在周围肺组织中检测到,而在支气管组织中无表达;VEGFR1 mRNA水平没有明显变化,而VEGFR2在正常气管组织中未检测到,而在支气管哮喘气管组织明显表达,并且在支气管哮喘慢性期高于急性期。结论随着疾病的进展,小鼠支气管哮喘时气道存在血管密度及血管内皮细胞数量增加,VEGF在此过程中起着重要的作用,各亚型的作用存在差异。另外,VEGFR2在支气管哮喘中对于介导和增强VEGF信号和VEGF活性起着重要的作用,并且可能是导致VEGF诱导小鼠气道血管再生与重塑的重要介质。     

重症监护病房脑膜脓毒金黄杆菌医院感染的调查分析

目的通过对重症监护病房（Intensive Care Unit,ICU）内脑膜脓毒金黄杆菌（Chryseobacterium meningosepticum）医院感染的临床特征和耐药性调查分析,为临床更好地预防和治疗该细菌所引起的感染提供参考。方法对我院2007年1月至2008年12月重症监护病房脑膜脓毒金黄杆菌医院感染的47例患者进行回顾性调查。结果45例（95．7％）患者均有严重的基础疾病,与感染相关的因素还包括侵入性操作、深静脉置管、环境污染及长期广谱抗菌药物的应用;47株脑膜脓毒金黄杆菌全部检测出金属β-内酰胺酶,具多重耐药性。体外抗菌活性较好的抗菌药物依次为万古霉素（100．0％）、头孢哌酮／舒巴坦（83．0％）、哌拉西林／他唑巴坦（57．1％）、替卡西林／克拉维酸（52．4％）和复方新诺明（45．2％）,其余所检测的抗菌药物体外抗菌活性均在6．4％-0。结论缩短住院时间、加强病区环境和空气监控、尽量减少侵入性操作和合理使用抗生素是减少脑膜脓毒金黄杆菌感染发生的重要措施。治疗脑膜脓毒金黄杆菌,可选用万古霉素、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、替卡西林／克拉维酸和复方新诺明。     

频率3 Hz的rTMS治疗重症颅脑损伤后意识障碍的效果分析

目的 探讨频率3Hz重复经颅磁刺激(rTMS)治疗重症颅脑损伤后意识障碍的效果.方法 选取2020年7月～2021年1月我院治疗的重症颅脑损伤后意识障碍患者82例,根据治疗方案不同将患者分为两组,每组41例.对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗基础上采用频率3Hz的rTMS治疗,观察比较两组患者的意识障碍情况和脑电图(...     

雾化吸入雷公藤内酯醇对哮喘大鼠气道平滑肌增生及NF-κB、Bcl-2表达的影响

目的：探讨雷公藤内酯醇对哮喘气道重构及核因子-kappaB（NF-κB）、Bcl-2表达的影响。方法：将40只SD大鼠随机分为5组（n=8）：正常对照组（A组）;哮喘4周组（B组）;哮喘6周组（C组）;治疗4周组（D组）;治疗6周组（E组）。测定气道反应性并观察气道壁嗜酸性粒细胞浸润;图像分析软件测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数量;免疫组织化学染色、Western印迹法检测PCNA、NF-κB、Bcl-2蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测Bcl-2mRNA表达。结果：①B组、C组NF-κB的蛋白表达量显著高于A组（P均〈0.01）,E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01、P〈0.01、P〈0.05）;②B组、C组Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著高于A组（P〈0.01）;E组蛋白表达量较B组、C组、D周组均显著降低（依次为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）,mRNA表达水平与上述各组比较亦均显著降低（P〈0.01）,E组蛋白及mRNA表达水平与A组相比仍较高（依次为P〈0.05、P〈0.01）;③B组、C组PCNA的蛋白表达量明显高于A组（P〈0.01）;④B组及C组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量均较A组明显增加（P〈0.01）,而E组上述指标较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01）;⑤B组、C组的气道反应性均高于A组（P均〈0.01）,E组较B组、C组、D组均显著降低（P〈0.01、P〈0.01、P〈0.05）。结论：哮喘气道平滑肌增生与气道平滑肌细胞（ASMCs）凋亡不足相关。NF-κB可能通过抑制ASMCs凋亡,参与哮喘气道高反应性及气道重构过程。雷公藤内酯醇可能通过下调NF-κB而抑制Bcl-2的表达,从而促进ASMCs凋亡、抑制气道平滑肌增生。     

补肾清肺方对小鼠支气管哮喘模型的影响

目的:探讨中药复方补肾清肺方对小鼠哮喘模型气道炎症及细胞因子的影响。方法:40只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、补肾清肺方低剂量组(C组)和补肾清肺方高剂量组(D组)。B、C、D组采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发制作哮喘模型。于OVA激发结束后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数炎性细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数目,并测定BALF上清液中白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平变化。结果:补肾清肺方的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数及EOS数量;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4水平显著下降。D、C组与A组、B组有显著性差异(P<0.05),C组与D组结果亦存在显著性差异(P<0.05)。结论:补肾清肺方能明显降低哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,从而改善哮喘气道炎症。     

黄芪注射液联合布地奈德治疗支气管哮喘急性发作期患者的疗效及对免疫功能的影响

目的:探讨黄芪注射液联合布地奈德治疗支气管哮喘急性发作期患者的疗效及对免疫功能的影响,为临床用药提供依据。方法:选取2016年2月至2017年2月在我院接受治疗的94例支气管哮喘急性发作期患者作为研究对象,根据治疗方式将患者分为布地奈德组(n=46)与联合组(n=48)。布地奈德组患者给予布地奈德经口吸入治疗,联合组患者在此基础上联用黄芪注射液治疗,两组均治疗2周。分别于治疗前和治疗2周后测量患者第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)和第一秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC),测定患者血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并检测所有患者的CD3~+、CD4~+和CD8~+,计算CD4~+/CD8~+。比较两组患者治疗2周后的疗效。结果:治疗2周后,两组患者FEV1%、FEV1/FVC均明显上升,且联合组的FEV1%、FEV1/FVC明显高于布地奈德组(P0.05)。治疗2周后,两组患者IL-4、IL-6、IL-8、IL-17及TNF-α水平均明显下降,且联合组的IL-4、IL-6、IL-8、IL-17及TNF-α水平明显低于布地奈德组P0.05)。治疗2周后,两组患者的CD3~+、CD4~+以及CD4~+/CD8~+均明显上升,且联合组的CD3~+、CD4~+以及CD4~+/CD8~+明显高于布地奈德组(P0.05)。联合组总有效率为95.83%,明显高于布地奈德组的82.61%(P0.05)。结论:黄芪注射液联合布地奈德对支气管哮喘急性发作期患者疗效显著,能明显改善患者肺功能和炎性指标,并能明显提高患者免疫功能,值得在临床上推广应用。     

SARS冠状病毒E蛋白基因的克隆与表达

E蛋白是存在于SARS病毒表面的一个小分子蛋白,在病毒的出芽过程中有重要的作用。为建立一种检测SARS病毒抗原的新方法,将E蛋白全基因序列分段合成,用连接酶连接后插入pET—GST载体,转化大肠杆菌BL21进行融合表达,结果得以成功表达GST-E融合蛋白;为SARS病毒致病机理研究和疫苗及诊断试剂的研制打下了基础。