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141.
王华  张正线 《遗传学报》1995,22(6):413-423
葡萄糖转运蛋白是一个在结构上相似功能上不同的多基因家族(GLUT1-GLUT5)。由于这一组蛋白和体内的葡萄糖利用有关,因此被认为是糖尿病胰岛素抵抗(抗性)的一个候选基因。本文比较了不同种生物这一基因家族的氨基酸和核苷酸顺序;推测了亲水性和疏水性分布;计算了蛋白质和核苷酸的进化距离,并在此基础上构建了分子进化树。研究表明:这一基因家族具有高度的同源性、极为相似的亲水性和疏水性分布以及结构的对称性。提示这一基因家族起源于一个共同的祖先并可能通过基因的重复而形成。这一进化机制可能有利于氨基酸结构的稳定及抵抗突变的作用。由于邻元法构建的进化树其分支长度存在差异,提示在这一基因家族的进化过程中,各分支上的进化速率并不相同。蛋白质进化距离和核苷酸进化距离所构建进化树的差异提示了在基因组中可能存在隐匿替换。两种方法构建的进化树都提示了GLUT1、3、4在结构和功能上要更为保守。  相似文献   
142.
黄病毒科成员多,且其基因组结构同源性高,弄清其结构与功能的关系可大大缩短疫苗研制和使用的进程。黄病毒NS3蛋白为分子量仅次于NS5的非结构蛋白,且具高度保守性。实验表明,NS3蛋白具蛋白酶活性。本文就NS3蛋白的酶活性中心、辅酸成分、底物结合部位及酶特异作用序列等加以阐明。  相似文献   
143.
研究了羧基修饰剂DCCD对泛醌结合蛋白QPs重组活力的影响。用0.1%Triton X-100增溶QPs,用250mol/molQPs的DCCD于室温处理5min,处理后的QPs丧失约50%与琥珀酸脱氢酶的重组活力。先将QPs与琥珀酸脱氢酸重组再用DCCD处理没有发现重组的琥珀酸泛醌还原酶活性的降低。此结果说明QPs中存在重组活性必需的羧基。  相似文献   
144.
用C^14参入法确定了在泛醌结合蛋白QPs中有四个对重组活性必需羧基,它们全部定位在24000亚基上。  相似文献   
145.
研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分,试图分离出新的核糖体失活蛋白,凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级盐析,分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析,分离出三种组分DrI,DrⅡ和DrⅢ.SDS-PAGE和IEF实验表明这三种蛋白质均达到单一纯,而HPLC实验则表明它们的纯度不低于90%,它们的分子量据SDS-PAGE和HPLC实验分别约23500、26000、285蛋0.IEF实验测得三者的等电点均  相似文献   
146.
石晓宏  杭长寿 《病毒学报》1995,11(2):124-130
应用杆状病毒表达载体成功地表达了汉滩病毒76-118株(HTNV)核壳蛋白,将HTNVS基因插入杆状病毒转染质粒pAcYMIB的多角体基因启动子下游附近,与经Bsu361酶切线性化的杆状病毒(AcVEPA)DNA共同转染S19细胞,经空斑筛选获得了高效表达NP的重组杆状病毒(AcVHanS)。经SDS-PAGE和Western blot证实,表达产物与HTNV毒粒NP分子量均为50KD左右,紫外扫  相似文献   
147.
A组轮状病毒SA11VP6基因的克隆和表达   总被引:4,自引:0,他引:4  
晋圣瑾  方肇寅 《病毒学报》1995,11(2):119-123
从SA11VP6基因全序列克隆开始,设计一对两端带有酶切位点的引物,逆转录PCR扩增出VP6全基因CDNA。经酶切后插入PUC19,构建了VP6全基因克隆PRA6。再经酶切后插入痘苗病毒载休质凿PJSA1175中。利用Lipofectin导入TK143细胞,利用TK基因和Lac基因作为重组病毒的筛选标记。表达产物用单克隆抗体ELISA法检测,发现细胞培养上清和细胞裂解液都是阳性。Western b  相似文献   
148.
在大肠杆菌中表达了丙型肝炎病毒基因组NS5区A段和部份B段蛋白。NS5A蛋白溶于水,可经过GST亲和层析柱纯化;NS5B蛋白不溶于水,经PBS-Triton X-100洗涤,尿素溶解后,通过离子交换柱纯化。经SDS-PAGE和Westemblot分析,NS5A蛋白除在57kD左右有条带外,还有不同程度的降解产物;NS5B蛋白主要在58kD左右有条带出现。为查明表达蛋白抗体在病人血清中的分布,取9  相似文献   
149.
以菜豆为实验材料,研究了蛋白质分子和生物膜在体外热稳定性的变化和原因,实验结果表明:热锻炼可增加细胞的耐热性,并赋予SOD、膜ATP酶和生物膜质子在体外的热稳定性;通过对可溶性蛋白热变性后的浊度分析和用ANS荧光探针探测蛋白质的结构变化,发现蛋白热变性的原因是疏水区的暴露和相互轩聚,^35S-Met标记分析和二维电泳谱揭示,热锻炼诱导合成的热激蛋白具有阻止蛋白质热变性和生物膜热破坏的功能。  相似文献   
150.
SHICAN  PEIWANG 《Cell research》1995,5(1):25-34
This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed.  相似文献   
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