硫胺素及溶氧对解脂亚洛酵母联产酮酸的影响

α-酮戊二酸和丙酮酸是重要的酮酸,广泛应用于食品、医药等领域。以本研究室在前期的工作中诱变选育的Yarrowia lipolytica WSH-Z06 C3为出发菌株,高效联产α-酮戊二酸和丙酮酸。在摇瓶水平上初步确定了最佳氮源浓度以及接种密度。在此基础上,重点考察了在15 L发酵罐上硫胺素浓度以及溶氧控制参数对酮酸联产的影响。结果显示,硫胺素最佳浓度为0.2μg/L,α-酮戊二酸和丙酮酸分别高达24.5、53.7 g/L。与未优化的对照相比,酮酸总产量和丙酮酸总转化率均提高了57.9%。溶氧水平控制在50%,发酵96 h酮酸总产量高达53.2 g/L。通过两阶段溶氧调控,酮酸总产量高达64.7 g/L,比未调控前提高了21.2%。通过硫胺素与溶氧水平的优化,显著提高了酮酸的产量,进一步为酮酸的工业化生产提供参考。     

鼠李糖脂快速定量分析方法及其影响因素研究*

为探寻简单、快速的由铜绿假单胞菌生产鼠李糖脂的定量分析方法,对比分析了蒽酮-硫酸法、L-半胱氨酸-硫酸法、苯酚-硫酸法及其影响因素。结果显示,蒽酮-硫酸法优于其它两种方法,并得出了其最佳测试条件。发酵液中剩余的葡萄糖、上清液对鼠李糖脂定量分析的影响可以忽略,菌体和中层杂质对鼠李糖脂的定量分析有一定程度的影响。因而,分析时要去除菌体。而中层杂质对定量分析的影响可以通过制备含中层杂质的鼠李糖溶液标准曲线而消除。     

苦荞和甜荞查尔酮合成酶基因的克隆及序列比较

以苦荞品种‘西农9920’和甜荞品种‘西农9976’为材料,根据其它植物查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因DNA序列的保守区域设计的一对简并引物,进行PCR扩增,从2种荞麦基因组中克隆出了长度均为860 bp的CHS基因片段,对其进行回收、克隆,挑选阳性克隆测序;序列分析表明这2个片段含有CHS基因的N端和C端的结构域,分别为苦荞和甜荞的CHS基因片段,命名为FtCHS和FeCHS。对获得的2种荞麦CHS基因的DNA序列进行比较分析,发现两者间存在多达43处单碱基多态性,这些单碱基多态性可能是苦荞和甜荞种子中类黄酮含量差异的重要原因之一。苦荞和甜荞CHS与其它植物CHS的氨基酸序列的进化分析表明,其与同为蓼科的掌叶大黄和石竹科的满天星的同源性较近。     

Penicillium raistrickii15α羟基化左旋乙基甾烯双酮工艺研究*

通过生物转化技术对甾体化合物左旋乙基甾烯双酮进行15α位羟基化,合成了重要的药物中间体15α-羟基左旋乙基甾烯双酮,对生物转化工艺进行了优化。重点对底物的助溶剂进行了筛选,同时对培养基成分,接种量,初始pH,通气量,投料浓度,投料时间,转化时间等转化条件进行了优化。结果表明:在摇瓶发酵中,Penicilliumraistrickii对甾体化合物左旋乙基甾烯双酮生物转化,产物15α-羟基左旋乙基甾烯双酮转化率达到60%,在发酵罐放大试验中,转化率达到50%以上。具有工业生产前景。     

金双歧联合丁螺环酮治疗肠易激综合征的临床疗效观察

目的 观察并分析金双歧联合丁螺环酮治疗肠易激综合征的临床疗效.方法 对80例门诊患者,年龄在18～70岁,采用随机数字表法,分为治疗组40例,采用金双歧联合丁螺环酮治疗;对照组40例,采用单用金双歧治疗,两组其他内科常规治疗相同,疗程4周,评估两组治疗前后临床疗效及汉密尔登焦虑(HAMA)和汉密尔登抑郁(HAMD)量表评分变化.结果 治疗前,两组IBS症状、肠外症状、生活质量、汉密尔登焦虑和抑郁量表评分比较差异无统计学意义.治疗后两组IBS症状、肠外症状、生活质量治疗后均较治疗前明显改善,联合治疗组较单用金双歧组更显著.汉密尔登焦虑和抑郁量表评分两药联合治疗后显著改善,但单用金双歧无明显改善.结论 金双歧联合丁螺环酮治疗肠易激综合征,安全、有效、不良反应少.     

帕利哌酮和奥氮平在急性期精神分裂症的随机对照研究

目的:研究帕利哌酮治疗急性期精神分裂症的疗效和安全性.方法:94例符合国际疾病分类第10版(ICD-10)诊断标准的精神分裂症急性期患者随机分为帕利哌酮组(N=45)和奥氮平组(N=49),采用简明精神病量表(the Brief Psychiatric Rating Scale,BPRS)、阳性和阴性症状量表(the Positive and Negative Syndrome Scale,PANSS)及个人和社会功能量表(Personal and Social Performance Scale,PSP)评定疗效,采用治疗中需处理的不良反应症状量表(Treatment Emergent Symptoms Scale,TESS)评定安全性.结果:两组治疗后BPRS和PANSS评分均低于治疗前,帕利哌酮组BPRS评分(23.15± 4.12)vs.(47.45± 3.87),PANSS评分(51.06± 6.87)vs.(87.96± 4.16),P＜0.05;奥氮平组BPRS评分(26.96± 4.30)vs.(45.11±3.18),PANSS评分(58.42± 5.72)vs.(84.71± 10.31),P＜0.05;治疗后,帕利哌酮组BPRS、PANSS评分低于奥氮平组,但差异无统计学意义(P＞o.05).两组治疗后PSP评分均优于治疗前,且帕利哌酮组效果较奥氮平组效果更好(P＜0.05).两组TESS评分在治疗后差异无统计学意义(P＞0.05).结论:帕利哌酮治疗急性期精神分裂症疗效,安全性较高,是一种值得借鉴的策略.     

建立转酮酶酶活测定方法及应用

摘要：目的 转酮酶是非氧化磷酸化戊糖途径中的关键酶。5-磷酸木酮糖是分析测定转酮酶酶活性的底物,然而因该底物难以化学合成,生产成本高,从而导致厂家停止生产,目前市场上无法得到。因此有必要建立起新的转酮酶酶活测定方法。方法 （1）将酿酒酵母的木酮糖激酶基因（XKS1）克隆于pET30a载体。（2）纯化木酮糖激酶。（3）建立酶偶联反应,以木酮糖为底物,将其转化为5-磷酸木酮糖,用于转酮酶酶活的测定。结果 （1）成功地将XKS1基因克隆于pET 30a得到质粒pXZ-X004。（2）质粒pXZ-X004诱导表达产生C端His-tag标签的XK,用Ni柱分离得到纯化的木酮糖激酶(XK)。（3）纯化的XK活性为21.0 U/mg protein,当用12.5%的甘油保存于?80 ℃环境1个月,仍有74%的活性。（4）用纯化的XK建立了转酮酶（TK）酶活测定新方法,当TK酶活低至0.00875 U时仍能够利用新方法检测。结论 本实验通过克隆和表达XKS1基因,成功地建立了TK酶活性测定的新方法,并应用于木糖代谢工程菌株TK酶活的测定,为医学和生态学领域中TK酶活的分析奠定了基础。     

利用CRISPR/Cas9系统检测果蝇细胞中组蛋白甲基化修饰对20E信号传导的调控

[目的]利用CRISPR/Cas9基因敲除系统在黑腹果蝇Drosophila melanogaster细胞中筛选并检测组蛋白甲基化修饰对蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)信号传导的调控.[方法]通过Flybase网站分析并总结黑腹果蝇组蛋白甲基转移酶及其修饰位点;将5个组蛋白甲基转...     

石菖蒲中一新倍半萜

石菖蒲（Acorus gramineus Soland）的精油经GC/MS/DS检测,硅胶加压柱层分离,得到一新的倍半萜,其在精油中的含量达60.30％,通过波谱方法确定了结构,并命名为石菖蒲酮（gramenone）。