从感染黄瓜花叶病毒的烟草叶筛选抗病毒细胞突变体

用绿岛法从感染CMV的普通烟草(G140)叶筛选到抗病毒细胞突变体R~CMV2、6,其当代无性系群体病情指数较对照降低41.5-45.2%。 Abstract:The 2 CMV-resistant-cell mutants,RCMV-2、6,were selected by using the method of culturing dark green island from CMV infected tobacco(N.tabacum cv G140)leaves.The disease in dex of RCMV-2、6′s was decreased by 41.5~45.2% in comparison with that of the control(G140).     

哺乳动物透明带糖蛋白及其生物活性

透明带在哺乳动物的受精过程中发挥着重要作用,透明带化学成分及其生物活性的研究对于了解精卵识别、顶体反应的诱导等过程的分子机理具有重要意义．近10年来的研究表明透明带主要由糖蛋白（ZPGPs）组成,是在细胞质内合成后转移至透明带的.大多数动物的ZPGPs为4～5种,不同种类动物的ZPGPs的氨基酸序列存在高度同源性.在受精过程中,ZPGPs具有精子受体和诱导顶体反应的双重作用,ZPGPs含有N－连接和O－连接寡聚糖,这些寡糖链是ZPGPs行使生物活性不可缺少的部分．     

异常激活的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶通过上调周期蛋白D1表达促进肾透明细胞癌增殖

葡萄糖6-磷酸脱氢酶（glucose 6-phosphate dehydrogenase,G6PD）为磷酸戊糖途径的调节酶。研究表明,G6PD与多种恶性肿瘤的发生密切相关。然而,G6PD在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma, ccRCC）中的功能及其作用机制却鲜有报道。本研究通过TCGA数据分析发现,G6PD在肾透明细胞癌TNM Ⅲ/Ⅳ期mRNA表达水平显著升高,与患者的性别、原发肿瘤直径、淋巴结转移、远端转移、病灶一侧的偏重性、病理分级以及TNM临床分期密切相关。并且,G6PD异常激活有可能成为评价肾透明细胞癌患者不良预后的分子。细胞系检测结果提示,与对照293T细胞及恶性程度较低的786-O细胞相比,恶性程度较高的Caki-1细胞中的G6PD表达及活性明显增加。基因稳定转染结合CCK8分析结果显示,G6PD过表达或异常激活可显著提高293T及786-O细胞的增殖能力,并且促进786-O细胞中周期蛋白D1基因表达上调。综上,本研究通过TCGA数据库分析和稳定细胞系检测及CCK8分析,结果显示,G6PD在肾透明细胞癌中异常激活,并可上调细胞周期蛋白D1表达,进而促进肿瘤细胞增殖。该研究为进一步揭示肾透明细胞癌分子发病机制以及开发有效的靶向治疗方案提供了借鉴。     

电穿孔介导小干扰RNA高效转染小鼠附植前胚胎

使用Cy3标记的阴性对照小干扰RNA(siRNA)转染小鼠附植前胚胎,建立向小鼠附植前胚胎导入siRNA的电穿孔方法。通过控制透明带弱化程度、电压、脉冲时间和脉冲次数等条件,采用不同参数组合并结合使用不同介质作为电转缓冲液将Cy3标记的阴性对照siRNA转染小鼠附植前胚胎。在荧光倒置显微镜下,观察胚胎的存活率、siRNA转染率以及阳性转染存活胚胎的囊胚发育率。结果显示小鼠附植前胚胎在使用台氏液消化胚胎透明带10 s后,以opti-MEM作为电转缓冲液,电穿孔参数设置为30 V,1 ms,3次的条件下取得最佳转染效果。总之,电穿孔方法可实现siRNA简便、高效地转染小鼠附植前胚胎。     

贴梗海棠组培中继代增殖条件的研究

研究了贴梗海棠组培快繁中,基本培养基、植物生长调节剂、培养温度及光照对芽继代增殖的影响,结果表明:适宜贴梗海棠芽增殖分化的基本培养基为MS;附加6-BA 0.5g/ml,NAA 0.5 g/ml为芽增殖的最佳浓度组合;最佳培养温度为25±2℃。     

几种观赏花卉的组织培养

自1982年来,我园用组织培养的方法对君子兰、五星花、重瓣矮牵牛、贴梗海棠、药百合等观赏花卉进行了实验,均取得了成功,其中部份试管苗移栽土壤成功,并已开花。下面将实验结果小结如下: 1.君子兰Clivia nobilis     

"三伏贴"对慢性阻塞性肺病系统炎症的影响

目的:观察"三伏贴"对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者系统炎症的影响,并评价其有效性。方法:收集稳定期慢性阻塞性肺疾病患者60例,按随机数字表随机分为"三伏贴"治疗组与安慰剂治疗组,每组30例;在常规西医治疗的基础上,分别给予"三伏贴"和安慰剂贴敷治疗,分别在入伏、初伏、中伏及末伏进行4次穴位贴敷,完成1疗程治疗者共56例。观察治疗前、1个疗程结束时、治疗后3个月、治疗后6个月血清炎症因子的变化。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-8(IL-8),免疫比浊法测定血清CRP,比较治疗前后两组间的炎症因子变化趋势,同时比较治疗前后两组间CAT评分(COPD assessment test,CAT)、呼吸困难评分(MRC)及生存质量评分。结果:"三伏贴"组、安慰剂组血清IL-8、CRP随时间变化趋势不同;其中试验组血清炎症因子随时间呈逐渐下降趋势,但治疗后6个月时炎症因子略有升高,而安慰剂组炎症因子水平呈逐渐升高趋势,治疗前试验组与安慰剂组炎症因子水平差异无统计学意义,治疗3个月后,两组患者IL-8、CRP水平差异即有统计学意义(P0.05)。试验组患者治疗后CAT评分、MRC评分较治疗前下降,生存质量评分升高,差异有统计学意义(P0.05),而安慰剂组患者在治疗后CAT评分、MRC评分较治疗前升高,差异有统计学意义(P0.05),生存质量评分下降,差异有统计学意义(P0.05)。同一时间点,试验组较安慰剂组CAT评分、MRC评分下降,生存质量评分明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:冬病夏治穴位敷帖可以改善COPD患者生存质量,缓解症状,其作用机理可能与降低系统炎症相关因子有关。     

草原兔尾鼠卵透明带3在Pichia pastoris酵母中的分泌表达

本研究通过酵母Pichia pastoris系统表达草原兔尾鼠卵透明带3(IZP3)蛋白．获得控制害鼠生育研究的抗原物质。根据本实验室克隆获得的IZP3基因序列设计引物．并分别在5’引物和3’引物中引入了EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点。经PCR扩增,将IZP3克隆至穿梭质粒pSuper Y上,获得的重组穿梭质粒pSuper Y—IZP3经线性化后．采用电激法将重组穿梭质粒转入酵母SMD1168菌株中．Zeocin 筛选阳性克隆,经小瓶发酵后,取上清作SDS—PAGE和Weaterm—blot检测,结果表明IZP3在酵母中得到了成功表达,表达产物的分子量约为55kD．为IZP3免疫不育控制鼠害的研究提供了检测抗原。     

利用基因工程菌VG1(pTU14)产聚β-羟基丁酸酯的研究

本文对透明颤菌血红蛋白基因(vgb)和λ噬菌体裂解基 因(SＲＲz)在不同宿主大肠杆菌中的外源表达及其在聚β羟基丁酸酯(PHB)生产中的应用进行了研究。实验结果表明,同时携带vgb、SＲＲz和phbCAB三种基因的产PHB基因工程菌VG1(pTU14),经过82h的摇瓶补料分批培养,菌体浓度可以高达25.9g/L,PHB百分含量则可在52h时达到95%以上;此外,该菌株不仅可以实现摇瓶高密度发 酵培养和PHB产品的大量积累,还可以同时实现菌体细胞的可诱导裂解破壁,因此是一株具有潜在工业应用价值的多功能PHB生产菌株。