亚硝酸氧化细菌分离方法的比较

试验对亚硝酸氧化细菌的三种分离方法一稀释法,硅胶平板分离法和富集培养-微口吸管滴分法进行了比较,结果表明稀释法最简便易行,分离效果最好。     

5型腺病毒一步层析纯化方案研究

腺病毒(Adenovirus,AdV)是常见的基因治疗载体,已有的腺病毒下游纯化工艺通常采取阴离子交换层析搭配分子筛的方式,该方法存在耗时长、成本高、难以放大并且所获得的腺病毒中具有感染性的腺病毒比例较低的问题,本研究旨在探究并优化一步层析法,纯化得到高滴度的5型腺病毒。首先在5L生物反应器中利用HEK-293.2sus细胞扩增5型腺病毒,通过对细胞沉淀的反复冻融释放病毒,利用过滤和超滤技术去除部分杂质,并通过添加核酸酶降低料液的黏稠度,最后利用新型复合填料Capto core 700或Fractogel填料进行纯化。纯化后的病毒利用50%组织细胞感染量(Median tissue culture infective dose,TCID50)测定方法测定病毒滴度,利用PCR-荧光探针法检测宿主DNA的残留以及酶联免疫法检测宿主蛋白的残留以判断除杂效果。两种一步层析法纯化腺病毒的回收率均高于传统的两步法,但在宿主蛋白和宿主DNA的去除效果上Capto core700的结果均不如Fractogel填料与超滤置换的结合,所以利用超滤和Fractogel结合的纯化方式更适合获得临床级别的腺病毒...     

海金沙草多糖的提取及抗氧化活性(英文)

用响应面优化技术研究了提取时间、固液比、提取温度等对海金沙草粗多糖提取的定量影响,获得了提取工艺的最优工艺参数:提取时间为123.3 min,固液比(s/w)为1∶20.9,提取温度为49.9℃,二阶多项式曲线回归模型预测多糖产量为12.466%,多糖提取验证试验结果(提取率)为12.85±0.18%(n=3),比模型预测稍高。多糖经纯化并进行体外抗氧化活性研究(以维生素C为对照品),结果发现,多糖产物对超氧阴离子(O2–.)和羟基氧自由基(.OH)具有较好的清除作用。     

人凝血酶原复合物离子交换树脂的筛选及吸附性能研究

采用若干种人工合成的大孔阴离子交换树脂,对人血浆中凝血酶原复合物(PCC)的分离纯化性能进行了研究.同时.将DEAE-Sephadex A50时PCC的分离纯化性能与该类人工合成分离纯化材料进行了对比.研究结果表明,在各种人工合成大孔阴离子交换树脂中,CG-6对PCC具有较优的分离纯化性能;并系统研究了CG-6树脂对PCC分离纯化性能.     

单细胞光合生物莱茵衣藻光系统Ⅱ产生超氧阴离子自由基的ESR研究

强光辐照下高等植物光系统Ⅱ(PSⅡ)会产生超氧阴离子自由基(O-2),该过程中产生的O-2在高等植物光合作用活性氧自由基代谢中具有重要作用.莱茵衣藻光系统结构与高等植物非常相近.应用新型高特异性自旋捕获.ESR方法及四唑氮蓝还原法,首次在莱茵衣藻的类囊体膜和PSⅡ中检测到O-2的生成,通过与有关菠菜的ESR实验结果对比发现两者的O-2产生分子机制可能极为相似.相比高等植物,单细胞莱茵衣藻具有结构简单、遗传背景清晰与基因组测序工作完备等诸多特点.因而,针对莱茵衣藻的O-2分析可能为深入研究高等植物光合系统中的活性氧代谢机制提供新的契机.     

芦苇耐脱水能力的生理生态学分析

甘肃省河西走廊分布有不同生态环境的芦苇,包括沼泽芦苇、盐化草甸芦苇和沙丘芦苇。盐化草甸芦苇和沙丘芦苇表观出很强的耐脱水能力。 测定与植物耐脱水能力相关的SOD、CAT和POD活力,表现为SOD活力以沙丘芦苇最高,盐化草甸芦苇次之,沼泽芦苇最低,但CAT和POD则以沼泽芦苇高于其它生境芦苇。用聚丙烯酰胺垂直板电泳方法分析这3种酶同工酶谱,结果表明,3种不同生境芦苇的SOD同工酶谱基本相同,均有9条酶带,但沙丘芦苇和盐化草甸芦苇的CAT和POD同工酶带数比沼泽芦苇分别增多3条和2条。这些结果证明,芦苇在自然选择压力下形成的耐脱水能力与基因调控的酶多型性相关。     

钠/二羧酸转运蛋白研究进展

钠／二羧酸转运蛋白(NaDCs)是一类负责转运枸橼酸、琥珀酸及α—酮酸等三羧酸循环中间产物的跨膜有机阴离子转运蛋白。分布于小肠、肾脏、肝脏、肾上腺、脑、肺及胎盘等组织。它不仅参与能量代谢、酸碱平衡调节,而与氨基酸及糖皮质激素的合成也有密切关系,新近研究发现它可能还是调控哺乳类寿限的重要基因之一。本文对NaDCs的生物学功能及病理生理意义做一综述。     

动物细胞中过氧物酶体的功能

过氧物酶体是动物细胞中的一种重要的细胞器，其功能主要是把细胞内不需要的氨基酸、嘌呤、胺、酚、醇、醛等小分子有机化合物脱氢氧化分解，以免在细胞内累积，毒害细胞。故过氧物酶体在动物细胞内起着“废物处理站”的作用。同时过氧物酶体中富含的过氧化氢酶，则起着“安全闸”的作用。     

C3植物过氧物酶体酶活性的比较

菠菜等9种C_3植物过氧物酶体中与光呼吸有关的酶活性的差异,不足以说明不同 C_3植物的光呼吸明显差异,它可能是参与光呼吸的酶组成不同效率的多酶体系所致,或者是由过氧物酶体以外的原因所引起。     

两步串联层析法纯化鼠抗人CD80单克隆抗体4E5

采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法,纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后,在Tris-HCl缓冲溶液(pH8.0, 50mmol/L)条件下上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集,采用0-0.5 mol/L NaCl浓度分步洗脱;含目的单抗的洗脱馏分再上凝胶过滤柱纯化,用PB缓冲溶液（pH7.2, 20mmol/L）洗脱,获得目的单抗4E5,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体总回收率达61%。