Overexpression of Bax sensitizes prostate cancer cells to TGF-β induced apoptosis

NRP-154 is a tumorigenic epithelial cell line derived from the preneoplastic dorsal-lateral prostate of rats. These cells are exquisitely sensitive to TGF-β induced apoptosis. In contrast, we find that NRP-154 cells can sustain overexpression of exogenous Bax protein, which is different from non-tumor cells where Bax functions as a ubiquitous stimulator of apoptosis. NRP-154 cells stably overexpressing Bax show increased sensitivity to TGF-β induced apoptosis. The degree of TGF-β induced apoptosis displays high correlation with cleavage of Bax at the amino-terminus. Our data indicate that prostate cancer cells can host high levels of latent Bax which can be activated through post-translational modification.     

魁蒿叶多酚可对离体脂类过氧化作用产生抗氧化活性

Journal of Food Biochemistry2005年29卷3期305～312页报道：魁蒿又名黄花艾和艾叶（Artemisitrprinceps），日本常将其叶用于沏茶饮用、食用和药用。最近。日本大阪东方医学关西学院药物学系的科学家渡田静夫研究了魁蒿叶中的多酚，对于离体条件下自由基脂类过氧化作用（LPO）的抗氧化效应。结果发现。魁蒿叶中的总多酚含量为4．58％，缩合丹宁含量0．14％-0．6％。指出，通过血红蛋白与过氧化氢（H2O2）的互作，可产生反应活性氧，并诱发LPO，而魁蒿叶中的多酚则可抑制自由基引起的LPO。并清除自由基。这证明。魁蒿叶是一种可抗诸如LPO等的氧化胁迫的有益的茶料和食物。     

冰箱另有“十二生效”

1．熟鸡蛋放冰箱存放片刻再切，蛋黄不会碎。2．熟栗子冷却后放冷冻室两小时，能快剥，肉完整。3．绿豆、黄豆、赤豆等煮后冷却再入冷冻室两小时，取出再煮能快速煮烂。4．洋葱、尖椒等放冷冻室1小时后再切，不会流泪。5．受潮饼干入冷冻室24小时，可恢复香脆。6．黏上口香糖的衣物放冷冻室，待口香糖变硬后，轻轻用纸甲就能剥离。7．弄湿的书本放冷冻室两天，可恢复原状。8．蜡烛放冷冻室超过24小时，点燃时不会滴蜡。     

不同光照和温度对暗受冷菜豆幼苗的影响

将暗中（4±1℃）低温胁迫12h的菜豆幼苗分别置于中温弱光（15℃±1℃,72μmol·m-2·s-1）、高温强光（20℃±3℃,224-340μmol·m-2·s-1）、低温弱光（4℃±1℃,72μmol·m-2·s-1）3种条件下进行处理,结果发现2d中低温弱光和高温强光下菜豆幼苗的MDA含量不断上升,其SOD、POD、CAT酶活力也维持在较低水平．质膜外渗电导率在处理第1天时上升到最大,之后缓慢下降。而中温弱光条件下的菜豆幼苗MDA含量上升较少,SOD、POD、CAT酶活力恢复较快,质膜外渗电导率在2d后即接近正常值,菜豆幼苗冷害恢复较迅速。施用低温保护剂Mefluidide可减轻菜豆幼苗冷伤害并加快其恢复。     

MicroRNA-9过表达载体的构建与鉴定

目的:MicroRNA(miRNA)是一类对基因表达起着转录后调控的小分子RNA,在正常发育和疾病发生过程中都发挥着重要的功能。其中,miR-9是一个序列高度保守的成员,在神经发育中调节神经干细胞的多种行为,包括分化、迁移等。但是,目前研究发现的miR-9的功能还存在一些相互矛盾和不清楚的地方,因此,我们拟构建miR-9的过表达载体,以便于对miR-9进一步的仔细研究。方法:我们采用分子克隆的常用方法,以pcDNA6.2-GW/miR为基础,构建出pcDNA6.2-GW/miR-9的表达质粒,分别用PCR、酶切和测序的方法验证质粒构建的正确性,并在Hela细胞和NIH3T3细胞中验证该质粒是否可以过表达miR-9小分子。结果:我们成功构建出正确的pc DNA6.2-GW/miR-9表达质粒,并且该质粒无论在人源的Hela细胞还是在小鼠源性的NIH3T3细胞中都可以过表达miR-9小分子。结论:构建了一个在不同种属间通用的miR-9过载体,为我们进一步研究miR-9的功能奠定了基础。     

中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22的亚细胞定位及过表达作用分析

抗癌药物紫杉醇生物合成途径中羟化酶的发现是当今研究的热点和难点。文中利用前期分析得到的1个新的中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22(GenBank登录号:MF448646.1),构建了亚细胞定位载体pCAMIBA1303-TcCYP725A22-EGFP,瞬时侵染洋葱表皮细胞,激光共聚焦显微镜观察结果发现该基因编码蛋白定位在细胞膜。进一步构建了植物表达载体pBI121-TcCYP725A22,经根癌农杆菌AgrobacteriumtumefaciensLBA4404介导转化到中国红豆杉细胞中过表达后,利用荧光定量PCR (qRT-PCR)和液质联用(LC-MS)分析TcCYP725A22过表达对紫杉醇生物合成的影响。结果显示,瞬时转化pBI121-TcCYP725A22的红豆杉细胞中TcCYP725A22基因的转录水平明显高于pBI121空载体对照组。随着TcCYP725A22基因过表达,几个已知的紫杉醇合成关键酶基因的表达量也都有不同程度的上调,且细胞中各紫杉烷的含量普遍提高。这些结果说明羟化酶基因TcCYP725A22极有可能参与紫杉醇的生物合成路径。     

互花米草NHX2基因的克隆与功能鉴定

NHX2属于CPA1基因家族,编码Na~+/H~+逆向转运蛋白,控制液泡膜中活性K~+的摄取,同时调节气孔的关闭。该研究以耐盐植物互花米草为材料,采用PCR技术克隆NHX2基因,并将其转入拟南芥进行相关功能鉴定。结果显示:(1)成功克隆获得互花米草NHX2基因CDS序列(1 602 bp),命名为SaNHX2,该基因编码533个氨基酸,SaNHX2蛋白的分子量约为58.65 kD,定位于细胞核和细胞膜,表明SaNHX2基因可能发挥转录调控的功能。(2) qRT-PCR结果显示,在ABA、NaCl和干旱胁迫处理下,互花米草叶和根中SaNHX2基因的表达量均上调。(3)为进一步鉴定其功能,成功构建植物表达载体,将SaNHX2基因转入拟南芥;经RT-PCR检测结果显示,SaNHX2基因在转基因植株中过表达;高盐胁迫处理后,转SaNHX2基因拟南芥的主根长度、叶绿素总量和相关胁迫应答基因表达量均高于转空载拟南芥,表明转SaNHX2基因拟南芥的耐盐能力显著增强。研究表明,SaNHX2基因可能在盐胁迫调节机制中发挥调控作用,可作为改良农作物耐盐的重要候选基因。     

Over-expression of methionine sulfoxide reductase A in the endoplasmic reticulum increases resistance to oxidative and ER stresses

MsrA and MsrB catalyze the reduction of methionine-S- suifoxide and methionine-R-sulfoxide, respectively, to methionine in different cellular compartments of mammalian cells. One of the three MsrBs, MsrB3, is an endoplasmic reticulum （ER）-type enzyme critical for stress resistance including oxidative and ER stresses. However, there is no evidence for the presence of an ER-type MsrA or the ER local- ization of MsrA. In this work, we developed an ER-targeted recombinant MsrA construct and investigated the potential effects of methionine-S-sulfoxide reduction in the ER on stress resistance. The ER-targeted MsrA construct contained the N-terminal ER-targeting signal peptide of human MsrB3A （MSPRRSLPRPLSLCLSLCLCLCLAAALGSAQ） and the C-terminal ER-retention signal sequence （KAEL）. The over-expression of ER-targeted MsrA significantly increased cellular resistance to H202-induced oxidative stress. The ER-targeted MsrA over-expression also significantly enhanced resistance to dithiothreitol-induced ER stress; however, it had no positive effects on the resistance to ER stresses induced by tunicamycin and thapsigargin. Collectively, our data suggest that methionine-S-sulfoxide reduction in the ER compartment plays a protective role against oxidative and ER stresses.     

您吃的是排酸肉吗?

正最近几年,"排酸肉"颇受欢迎。但是,什么是排酸肉呢?"排酸"是一种噱头吗?排酸肉真的更有营养价值吗?说实话,一般人还真摸不清其中的门道。什么是排酸肉呢?现在市场上销售的生鲜肉类主要有三种,分别是热鲜肉、冷冻肉和冷却肉。其中,热鲜肉是指清晨宰杀,清早上市,还保持着一定温度的肉类;冷冻肉则是将肉置于零下18℃的环境中冻结保存的肉;冷却肉,又叫冷却排酸肉,也就是我们常说的     

单基因遗传性高胆固醇血症与非低密度脂蛋白受体致病基因的关系

家族性高胆固醇血症（FH）是一类异质性很强的单基因常染色体遗传性疾病。最近发现,除低密度脂蛋白受体和载脂蛋白B-100以外．前蛋白转化酶一枯草溶菌素9、衔接子蛋白、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G5和G8、胆固醇-7-α-羟化酶等多种基因的变异都能导致FH样表型。该文对利用基因剔除和过表达、RNA干扰、反义技术对单基因遗传性高胆固醇血症非低密度脂蛋白受体致病基因的功能和调控机制进行综述,有助于深入认识这些基因．从而为临床家族性高胆固醇血症的诊断和治疗提供新的思路。