小立碗藓叶绿体分裂相关基因PpMinE的克隆及其功能与进化分析

用RT-PCR技术从小立碗藓中(Physcomitrella patens)克隆了核编码的MinE基因,命名为PpMinE,并克隆了该基因的基因组DNA。序列比对显示该基因编码的蛋白质与真细菌和绿藻叶绿体编码的MinE蛋白具有较高的相似性。pMinE-EGFP融合蛋白在烟草中的瞬时表达证明该蛋白定位于叶绿体内。在大肠杆菌中过量表达PpMinE导致细胞不正常分裂,产生无染色体的小细胞,这表明MinE的功能在进化上是保守的。在系统发育树中,PpMinE和高等陆生植物有较近的亲缘关系。在已知的陆生植物的叶绿体基因组中没有找到MinE的同源蛋白,这暗示在进化过程中MinE从叶绿体到细胞核的水平转移可能发生在陆生植物发生以前。     

会议报道

中国(合肥)生物技术与产业发展论坛成功举行我国政府高度重视生物技术与生物产业的发展,在《国民经济和社会发展第十一个五年规划纲要》、《国家中长期科学技术发展规划纲要》中,都将生物技术列为实现重点跨越的领域。今年4月,国务院办公厅转发了《生物产业发展“十一五”规划》,明确提出了“十一五”期间,我国生物产业的发展思路、总体目标、主要任务和发展重点。在这样的大背景下,中国生物工程学会与安徽省科学技术协会、合肥市人民政府联合举办“中国(合肥)生物技术与产业发展论坛”,在促进和推动我国生物技术的研究与生物产业的发展方面…     

薰衣草非特异性脂质转移蛋白基因nsLTP2-1和nsLTP2-2的克隆与功能分析

非特异性脂质转移蛋白（nsLTP,non-specific lipid transfer proteins）在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草（Lavandula angustifolia）中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析表明,nsLTP2-1和ns LTP2-2分别编码119个和117个氨基酸,具有脂转移蛋白（LTP,lipid transfer proteins）保守结构域和8个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示它们处于两个分支,与同科的紫苏（Perilla frutescens）相似性最高。基因表达分析显示2个基因均在花蕾中高表达,在叶片、茎和花瓣中几乎不表达,在花萼中的表达存在差异,nsLTP2-1和nsLTP2-2分别在成熟花萼和幼嫩花萼中表达量更高;2个基因在花蕾和叶片中的表达均受到强光诱导,且在花蕾中的表达均受脱落酸诱导,而叶片中nsLTP2-1和nsLTP2-2的表达分别受茉莉酸甲酯和乙烯诱导。亚细胞定位显示2个nsLTPs均定位在细胞膜和细胞壁上,可能与次生代谢物的转运有关。...     

C57BL/6小鼠Lewis皮下移植瘤肺转移灶的病理及超微结构观察

目的 构建C57BL/6小鼠Lewis皮下移植瘤肺转移模型,观察肺转移灶病理以及超微结构变化。方法 C57BL/6小鼠右前肢腋窝皮下接种Lewis细胞,定期测量肿瘤体积,绘制生存曲线,对存活期35 d以上的小鼠进行解剖学观察,HE染色检测肺组织病理变化,透射电镜观察肺组织的超微结构。结果 接种14 d小鼠右前肢腋窝皮下成瘤率为100%,22 d小鼠开始出现死亡,平均生存周期(33.00±6.98)d;解剖学可见肺表面出现典型转移灶,外观呈圆形半透明状,周围有出血;HE染色显示肺转移灶染色深,外观近似圆形,与周围组织界限明显,肿瘤细胞排列紧密,内部可见丰富的毛细血管;透射电镜下可见肺转移灶内肿瘤细胞具有显著的异型性,出现巨核、双核和奇异型核,胞质内含有大量的糖原颗粒和线粒体数量,肿瘤细胞间可见细胞连接。结论 延长存活时间可使皮下移植瘤小鼠形成典型的肺转移灶,肺转移灶内病理学和超微结构变化符合恶行肿瘤的病变特点。     

小细胞肺癌原代细胞脑转移模型研究初探

目的 本研究拟分离培养保留原始肿瘤的重要特征和功能的小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)原代细胞,并在此基础上构建SCLC原代细胞脑转移小鼠模型,为SCLC脑转移患者的药物研发和评估提供更贴近临床的动物模型。方法 收集临床病人的新鲜SCLC肿瘤组织样本进行小鼠皮下移植,通过小鼠的荷瘤情况、肿瘤组织大小和肿瘤生长曲线的结果,确定小细胞肺癌人源肿瘤异种移植(patient-derived xenograft, PDX)模型的构建情况。并对成瘤后的肿瘤组织进行原代细胞分离培养,通过细胞划痕实验和增殖实验检测细胞的增殖和侵袭能力。通过颈动脉注射原代细胞构建SCLC脑转移模型,并通过临床表现和病理观察确定转移模型是否成功。结果 (1)成功构建SCLC皮下PDX模型,肿瘤传代时间约为56 d,肿瘤生长曲线呈对数生长趋势。(2)成功分离筛选出具备成瘤性的SCLC原代L0细胞,并证实该L0细胞具备较强的细胞迁移和增殖能力。(3)颈动脉注射法成功构建SCLC脑转移模型,并分离出具备脑转移特性的SCLC脑转移B0细胞。结论 本研究利用分离培养SCLC原代细胞,成功构建SC...     

Application of proteomics in the study of tumor metastasis

Tumor metastasis is the dominant cause of death in cancer patients. However, the molecular and cellular mechanisms underlying tumor metastasis are still elusive.The identification of protein molecules with their expressions correlated to the metastatic process would help to understand the metastatic mechanisms and thus facilitate the development of strategies for the therapeutic interventions and clinical management of cancer. Proteomics is a systematic research approach aiming to provide the global characterization of protein expression and function under given conditions. Proteomic technology has been widely used in biomarker discovery and pathogenetic studies including tumor metastasis. This article provides a brief review of the application of proteomics in identifying molecular factors in tumor metastasis process. The combination of proteomics with other experimental approaches in biochemistry, cell biology, molecular genetics and chemistry, together with the development of new technologies and improvements in existing methodologies will continue to extend its application in studying cancer metastasis.     

FLT3配基在人骨髓基质细胞系中的基因转移与表达

目的：研究逆转录病毒介导的FL在骨髓基质细胞系HFCL中的表达。方法：采用脂质体法将重组质粒pLF-SN/HFCL和空载体pLXSN/HFCL转染包装细胞PA317,G418筛选抗性克隆,用抗性克隆上清液感染HFCL。RT－PCR和基因组DNA－PCR检测外源基因mRNA水平的表达及染色体的整合,小鼠CFU－GM集落法检测FL生物学活性。结果：在mRNA水平上有FL的表达,染色体基因组中整合有标记neo基因和FL基因。活性测试结果显示转染的骨髓基质细胞分泌FL。结论：提示骨髓基质细胞可作为基因治疗的靶细胞。     

受体介导的基因转移技术

通过受体对DNA-配体复合物的特异识别和内吞, 可以将外源基因导入特定的细胞内进行表达,称为受体介导的基因转移技术. 对该项技术的基本方法、体内外应用研究进展以及发展方向等进行了介绍和综述.     

类杆菌耐药基因转移的分子生物学研究进展

类杆菌耐药基因转移的分子生物学研究进展华西医科大学传染病学教研室成都６１００４１包勇范昕建类杆菌是人类肠道中数量最多的条件致病菌,其耐药菌株局部流行提示类杆菌存在耐药因子。７０年代末发现大肠杆菌氨苄青霉素耐药基因可向类杆菌作属间转移,克林霉素、红霉...     

外源基因直接转移技术之评价

外源基因直接转移技术有ＰＥＧ法、电击法、基因枪法、微注射法、脂质体法、生殖细胞转化法等．本文对它们进行了比较分析,指出它们各自的优缺点,并提出生殖细胞转化法是一种值得探索和应用的转化方法