High efficiency DNA delivery into swine oocytes and embryos by electronic pulse delivery （EPD）

The production of transgenic swine for xenotransplantation has been proposed as an optimal option to overcome the chronic shortage of human organ donors.Generation of genetically engineered swine has been elusive due to the difficulties in gene transfer.In order to achieve effective gene delivery,a key step for the genetic modification,we applied electronic pulse delivery (EPD) technology to introduce H2K^b-DC DNA construct into swine eggs.Using the developed EPD Protocols^TM,we have achieved good viability of the EPD treated oocytes,satisfactory embryonic development of the EPD treated embryos,and stable DNA transfer into the swine embryos with high efficiency.Thus,application of the EPD technology promises to effectively facilitate the generation of large trangenic mammals.     

A preliminary analysis of antineoplastic activity of parvovirus MVMp NS—1 proteins

Human gastric cancer MKN-45 cells were transfected with pULB 3238,a plasmid carrying MVMp MS-1 gene with its original P4 promoter replaced by the glucocorticoid inducible promoter MMTV-LTR.After the integration and expression of NS-1 gene,some of the transfectants died,while others remained alive,but the growth features of survived cells were changed.For further study on the antineoplastic function of parvoviral NS-1 protein in vivo,transgenic mice carrying NS-1 genes were established by conventional method.Among 4 founders,one of them was found to be able to transmit the transgene to around 50% of their offsprings.RT-PCR was performed to indicate the expression of NS-1 gene in transgenic mice and its mRNA appeared in a variety of tissues.The expression of integrated NS-1 gene may correlate with the decreased incidence of tumor induced in vivo by chemical carcinogens.     

乳腺生物反应器实用化研究-现状与问题

转基因家畜的乳腺有可能作为生物反应器来生产具有生物活性的多肽药物和具特殊营养意义的蛋白质。一个新兴的转基因动物制药业已开始崛起。用乳汁蛋白质基因的调节元件不仅有可能使转基因的表达只限于乳腺组织,而且有可能使转基因表达产物得到高水平表达和大量生产。各种酪蛋白,以及乳清蛋白和乳球蛋白等基因的调节元件已相继被克隆和投入使用。已经有多种具有生物活性的昂贵的医用蛋白质在乳腺组织中合成并分泌。迄今,转基因动物的研究明确了在乳蛋白基因启动区域上游区的一些乳腺特异和激素诱导转录元件,细胞系和原代培养细胞的转染的研究鉴别了一些组成性和激素诱导的因子。但转基因随机整合造成的“位置效应”所引起表达结果的不确定性,限制了乳腺生物反应器产业化的形成和发展。由于乳汁蛋白质基因的表达都具有典型的时空特异性格式,乳蛋白基因的表达受到了激素和发育调节的转录因子的综合调控。为使乳腺反应器的应用更卓有成效和得心应手,我们尚需对它的发育和激素调控密切相关的生理学和染色体座位具备充分了解。     

转基因雄性不育油菜选育的简介

转基因雄性不育油菜选育的简介彭仁旺,周雪荣,方荣祥,陈正华,莽克强（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０;中国科学院遗传研究所,北京１００１０１）杂种优势的利用是作物生产中用以提高产量、改进品质的重要措施之一,通过雄性不育系培植杂种是杂种优势利用...     

猫叫综合征一家系高分辨染色体分析

本文采用高分辨染色体技术,对一例猫叫综合征患儿及其家系进行了分析,结 果提示,猫叫综合征染色体关键片段位于5p15.3→5pter。     

生长素结合蛋白cDNA的克隆及其在烟草中的表达

基于拟南芥内质网生长素结合蛋白基因的ｃＤＮＡ序列,设计合成了Ａｐ５和Ａｐ３两个引物,应用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增了拟南芥的ＡＢＰ基因。将该基因克隆在植物表达载体ｐ３５ＳＳＩＮ的３５Ｓ启动子必Ｎｏｓ３‘端之间,得到植物表达载体ｐ３５ＳＥ。通过农杆菌介导的方法对烟草ＳＲ１进行了转化,由分子杂交等检测证明,生长素结合蛋白基因已在烟草中表达,同时转基因烟草后代对生长素的敏感性明显增加。     

根癌农杆菌介导转化诸葛菜获得转基因植株

以诸葛菜下胚轴和子叶为材料,在附加BA和NAA的MS培养基上诱导芽再生,在1／2MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株,建立了诸葛菜组织培养高频再生体系,再用很癌农杆菌介导转化诸葛菜下胚轴和子叶,在附加一定量的氨苄青霉素、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选,并培养再生成苗,获得完整抗性再生植株,移植到盛有土壤的花盆中均可存活,生长正常。将再生植株叶片,进行GUS、NPTⅡ酶活性测定和Southernblot分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中,并高效表达。     

生长素结合蛋白cDNA的克隆及其在烟草中的表达

基于拟南芥内质网生长素结合蛋白基因的cDNA序列,设计合成了Ap5和Ap3两个引物,应用RT－PCR技术扩增了拟南芥的ABP基因。将该基因克隆在植物表达载体p35SSIN的35S启动子和Nos3’端之间,得到植物表达载体p35SE。通过农杆菌个导的方法对烟草SR1进行了转化,由分子杂交等检测证明,生长素结合蛋白基因已在烟草中表达,同时转基因烟草后代对生长素的敏感性明显增加。     

铵态氮和硝态氮营养与大豆幼苗的抗氰呼吸作用

在植物体内,NO云还原成NHI是一个耗能很多的生化过程,每还原一个NO。大约要消耗15个ATP分子（Salsac等1987）。植物直接吸收和利用NHi＋,可以减少能量消耗,所节约的能量可用于植物的生长。因此,从理论上讲,供NHI的植株要比供NOt的植株能够获得更高的生物产量。然而,对于大多数植物,供NOS的植株常具有更大的生长量和产量。对于这种现象,过去人们一直在矿物质和有机物积累的差异（Robin和Salsac1985）、根际的酸化程度（Ruftv等1983,Tolley－Henry和Rapen1986）、NHt有害浓度的积累（Haynes和Goh1978）、对光合作用的…     

转甜菜碱醛脱氢酶基因植物的耐盐性研究

将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）基因经农杆菌介导转入草莓、烟草,转基因植株中该基因的转录水平、ＢＡＤＨ活性及耐盐性均明显高于对照,膜的相对电导率和大分子渗漏值说明在盐胁迫下转基因植株的膜结构所受损伤小于对照。