双拷贝固氮结瘤基因的大豆根瘤菌R.fredii基因工程菌的耐…

用热处理消除了快生型大豆根瘤菌Ｒ．ｆｒｅｄｉｉＵＳＤＡ１９４的非共生质粒,获得了突变株Ｈｏ４,以Ｈｃ４为受体菌,以Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１Ｅｃ８３（ＰＬＡＦＲＩ．ｎｏｄｎｉｆ）为供体菌,Ｅ．ＣｏｌｉＰＲＫ２０１３为助体,进行三亲本杂交,得到双重ｎｏｄｎｉｆ基因拷贝的杂合子Ｈｃ４－８。用它们完成共生固氮结瘤试验,结果表明,在初花期Ｈｃ４的固氮酶活性比出发株ＵＳＤＡ１９搞７５．７％Ｈｃ４－８比ＵＳＤＡ１     

酵母pro2基因转化紫云英的研究

用外植体－农杆菌共培养法将酵母脯氨酸合成酶基因２（ｐｒｏ２）导入豆科牧草紫云英,获得转基因植株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析检测到转化植株基因组中存在外源ＤＮＡ的同源顺序,证明酵母ｐｒｏ２基因已整合到紫云英细胞基因组中。转化植株具有强的ＮＰＴⅡ酶活性,而对照植株呈阴性反应。在含０．５％ＮａＣｌ的培养基上,紫云英植株内游离脯氨酸含量增高,一些转化植株叶片内游离脯氨酸含量显著高于对照,而且耐盐性有所     

利用rRNA基因ITS-Ⅰ序列构建的大豆属(Glycine)12个种的种系关系

属于大豆属Glycine亚属10个种、Soja亚属2个种的24份材料的ITS-Ⅰ序列,通过PCR扩增,已克隆并测序.根据序列的同源性确定了这24份材料的种系关系.从重建的谱系树中可以看出一些原先划分的种中存在不同的基因组分化类型,如G.tomentella,G.canescens和G.tabacina,它们可能是被形态划分所遮蔽的种.     

筛选转基因动物的新方法——PCR及其产物测序法

用特异性引物对肌球蛋白轻链2启动子(myosin light chain-2,MLC₂)-糜酶融合基因的转基因新生鼠鼠尾DNA进行PCR筛选, 低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性样品PCR所扩出的DNA条带,纯化后用同一对引物中的一个进行单引物PCR测序,与所转外源基因序列比较,进一步确定整合有外源基因的阳性鼠.PCR及PCR 产物测序法检测转基因动物具有操作方便,灵敏度高及特异性强等优点.     

基质结合区与转基因动物的基因表达

基质结合区(MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用.这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向.文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述.指出在转基因动物中,MAR的应用能导致建立独立的基因活性结构域.它对基因高效表达无疑具有重要作用.MAR可能是一种新的顺式作用元件,与增强子、启动子协同作用调节基因的表达.     

田间大豆植株N2O通量的测定及光照的影响

采用封闭式箱法,在田间自然状况下对大豆植株N₂O通量进行了测定.结果表明,在主要生育期内,大豆植株N₂O通量有2个释放高峰,分别位于苗期和开花结荚期.大豆植株N₂O通量的昼间变化模式基本上为上午有1个释放高峰,而下午有一个释放低谷.施肥和对照小区N₂O平均通量分别为2.27和1.28μgN₂Om^-2·h^-1.在较强的光照条件下(10⁴lx数量级),大豆植株N₂O通量较低,甚至可吸收大气中的N₂O,而在较弱光照条件下(10³～10²lx数量级),大豆植株N₂O通量较高.     

利用转基因植物生产乙肝口服疫苗

乙型肝炎危害全球大部分地区,由于没有切实可行的治疗方法,因此,控制和预防乙直炎便极其重要。转植物可表达外源乙肝表面抗原蛋白并保持自然状态的免疫一,产生的疫苗不需纯化就可供口服使用,所以,本文提出,利用转基因的生产廉价疫苗系统有巨大的前景,可代替微生物疫苗生产系统。     

田间大豆叶片光合作用与活性氧清除酶的日变化

开花期大豆叶片光合速率（Pn）在晴天中午伴随气孔导度（Gs）下降而降低,而叶温（TL）、光呼吸速率（Pr）以及Pr／Pn比值在中午前后明显上升。胞间CO2浓度（Ci）在上午下降,之后则逐渐增加。在最高光量子通量密度（PFD）低于1．2mmol·m-2·s-1的多云天气,大豆叶片Pn与Pr的日变化依赖于PFD、Ci与Pr／Pn比值在一天中基本恒定。晴天与多云天气大豆叶片细胞活性氧清除系统的超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氨酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）与抗坏血酸过氧化物酶（ASA－POD）活性均出现明显的日变化,中午前后酶活性明显增加。文中讨论了大豆叶片细胞活性氧清除酶系统日变化的适应性意义。     

转美洲拟鲽抗冻蛋白基因（AFP）番茄的叶片电导率测定

对转美州拟鲽抗冻蛋白基因（ＡＦＰ）的第三代（Ｄ３）番茄及其对照,经低温处理后进行幼苗叶片组织电导率测定,发现转基因各组电导率均比对照明显降低,说明导入的ＡＦＰ基因已经表达并使番茄获得抗寒性。     

High efficiency DNA delivery into swine oocytes and embryos by electronic pulse delivery （EPD）

The production of transgenic swine for xenotransplantation has been proposed as an optimal option to overcome the chronic shortage of human organ donors.Generation of genetically engineered swine has been elusive due to the difficulties in gene transfer.In order to achieve effective gene delivery,a key step for the genetic modification,we applied electronic pulse delivery (EPD) technology to introduce H2K^b-DC DNA construct into swine eggs.Using the developed EPD Protocols^TM,we have achieved good viability of the EPD treated oocytes,satisfactory embryonic development of the EPD treated embryos,and stable DNA transfer into the swine embryos with high efficiency.Thus,application of the EPD technology promises to effectively facilitate the generation of large trangenic mammals.