人源抗菌肽LL-37

LL-37是迄今在人体中发现的抗菌肽cathelicidin家族中的唯一成员,也是人体内唯一的双亲性α螺旋结构的抗菌肽. LL-37在人体的血液细胞和上皮细胞中广泛分布,具有广谱抗菌作用.抗菌活性依赖其螺旋构象的形成,通过“地毯样”机制杀灭细菌. LL-37有中和内毒素的作用,能与LPS和CD14结合,中和LPS的生物活性,还能利用formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1) 作为受体介导趋化作用,招募免疫细胞到感染部位,清除病原物. 很多感染性疾病都与LL-37低表达或功能失活有关. LL-37是一种多功能的抗菌肽,有开发成为具有抗菌和增强免疫力双重作用药物的潜力.     

小鼠体内转染CH50多肽真核表达载体趋化免疫细胞在肿瘤治疗中的作用

目的 研究体内转染表达CH50多肽对免疫细胞的趋化,聚集作用,探讨趋化聚集的免疫细胞增强抗肿瘤以及化疗后抗肿瘤的免疫力。方法 分别在小鼠后肢肌肉,接种肿瘤组织或化疗的肿瘤组织内注射pCH510质粒进行转染,取转染部位组织制备石蜡切片,观察免疫细胞的聚集情况,并观察转染pCH510及联合化疗对肿瘤的治疗作用。结果 正常小鼠后肢肌肉转染pCH510后,注射部位有大量免疫细胞聚集,其中主要是巨噬细胞,淋巴细胞,中性粒细胞,聚集的免疫细胞至少持续存在一周,肿瘤部位转染后,趋化聚集的免疫细胞分布于肿瘤组织周围,抑制了肿瘤细胞的生长,化疗后转染,仍有趋化聚集免疫细胞的作用。免疫细胞聚集数量相对只转染pCH510虽有所减少,但对肿瘤的抑制作用明显增强。结论 本文结果提示,在小鼠体内转染pCH510表达的CH50多肽不仅能够趋化免疫细胞,提高局部抗肿瘤的免疫力,而且与化疗联合作用在肿瘤治疗中具有更大的研究潜力。     

趋化因子MIP-2和MCP-1在结直肠癌中表达及临床病理意义

目的:观察结直肠癌组织中趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白的表达,分析其表达的临床病理意义.方法:收集结直肠癌病例的病理资料和临床资料,应用免疫组织化学SP法检测待测蛋白的表达.结果:MIP-2在癌旁肠组织组和腺癌组的阳性表达率分别为76%,68%,差异无统计学意义.MCP-1在癌旁肠组织组和腺癌组的阳性表达率分别为56%,72%,差异无统计学意义.MIP-2表达与淋巴结转移有关,而与肿块大小、部位、分化程度、浸润肠壁深度无关.MCP-1表达与肿块直径、浸润肠壁深度、淋巴结转移有关,而与部位、分化程度无关.结论:MIP-2和MCP-1在结直肠癌中的表达主要与侵袭和转移相关.     

次组淋巴趋势化因子SLC的克隆及其在原核系统中的表达

以中国人的淋巴细胞组织为材料提总RNA,用RT－PCR的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子（Secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC)的成熟肽基因,序列分析表明,我们克隆的SLC基因与文献报道的仅有一个核苷酸的差异,且并不影响氨基酸的编码。将PLC的cDNA插入含T7启动子的表达载体pET-28a( ）中构建重组质粒pET-SLC,转化大肠杆菌BL21（DE3）筛选表达菌株,表达菌株经1mmol/LIPTG诱导表达3－5h后,超 声破菌,离心后将上清进行SDS－PAGE,可以看到在18KD左右处有明显的表达条带,用Ni^2 亲和层析柱纯化表达物,纯度表达90％以上。     

趋化因子CX_3C——Fractalkine的结构与功能

趋化因子是一类结构和功能相关的多肽超家族 ,分子量为 7～ 1 5ｋＤ ,分子序列中多数有四个半胱氨酸残基 (Ｃｙｓ或Ｃ)。根据Ｎ末端两个保守Ｃｙｓ的排列方式 ,趋化因子被分为Ｃ、ＣＣ、ＣＸＣ和ＣＸ3Ｃ四个亚家族。Ｆｒａｃｔａｌｋｉｎｅ(ＦＫＮ) [1] 是ＣＸ3Ｃ亚家族的唯一成员。过去认为 ,ＦＫＮ具有趋化功能 ,参与白细胞特别是吞噬细胞和淋巴细胞的游走和活化 ,同时表现有粘附作用 ,介导细胞间粘附。近年的研究发现 ,ＦＫＮ还具有其它多种潜在功能 ,如增强细胞粘附、介导免疫损伤等。1 .ＦＫＮ的结构及其受体ＣＸ3ＣＲ1ＦＫＮ编码基因…     

托拉塞米联合川芎嗪注射液治疗慢性心力衰竭的疗效及对患者血清MCP-1、BNP、NGAL水平的影响

目的:探讨托拉塞米联合川芎嗪注射液治疗慢性心力衰竭的临床疗效及对患者血清单核细胞趋化蛋白因子-1(MCP-1)、脑钠肽(BNP)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平的影响。方法:选择2015年3月～2017年3月于我院住院的慢性心力衰竭患者100例,按随机数字表法将其分成治疗组(n=50)与对照组(n=50)。两组患者均给予相同的常规治疗,对照组在此基础上联合托拉塞米治疗,治疗组在对照组基础上加用川芎嗪注射液治疗。在完成2周治疗后,对两组进行疗效评价,比较两组治疗前后心功能、6 min步行距离(6MWT)及生活质量水平、血清MCP-1、BNP、NGAL水平的变化。结果:治疗组经2周治疗后总有效率为86.00%(43/50),与对照组[64.00%(32/50)]相比显著上升(P0.05)。治疗组治疗2周后左室射血分数(LVEF)值较治疗前显著升高(P0.05),而左室舒张/收缩末期容积(LVEDV/LVESV)均显著降低(P0.05);与治疗前对比,对照组治疗后LVEF值亦显著增加(P0.05),LVESV值显著下降(P0.05);且治疗组治疗后上述心功能指标改善效果均显著优于对照组同期(P0.05)。与治疗前相比,两组治疗2周后6MWT值均明显增加(P0.05),明尼苏达心力衰竭生活质量量表(LHFQ)评分及血清MCP-1、BNP、NGAL水平均明显降低(P0.05);且治疗组治疗后以上指标改善效果较对照组同期更显著(P0.05)。结论:托拉塞米联合川芎嗪注射液治疗慢性心力衰竭的临床疗效明显优于单用川芎嗪注射液治疗,其可有效改善患者心功能,提高生活质量,可能与其显著降低患者血清MCP-1、BNP、NGAL水平有关。     

醋酸亮丙瑞林联合地屈孕酮片对子宫内膜异位症的疗效及对血清HE4、VEGF、TIMP、MCP-1的影响

目的:探讨醋酸亮丙瑞林联合地屈孕酮片治疗子宫内膜异位症的临床疗效及对患者血清人附睾分泌蛋白4(HE4)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平的影响。方法:选择我院2014年1月~2017年1月收治的150例子宫内膜异位症患者,按随机数表法分为对照组和研究组,每组75例。对照组予以醋酸亮丙瑞林治疗,研究组在对照组基础上联合地屈孕酮片治疗。比较两组临床疗效,治疗前后血清HE4、VEGF、TIMP、MCP-1、性激素水平、视觉模拟评分(VAS)及SF-36的变化,不良反应的发生情况和随访情况。结果:治疗后,研究组显著总有效率高于对照组(96%vs.85.33%)(P0.05);两组血清HE4、VEGF、TIMP、MCP-1、性激素、VAS水平均较治疗前显著下降,且研究组以上指标均明显低于对照组(P0.05);两组SF-36均较治疗前明显上升,且研究组明显高于对照组(P0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。随访结果显示研究组妊娠率及复发率低于对照组(P0.05)。结论:醋酸亮丙瑞林联合地屈孕酮治疗子宫内膜异位症的疗效明显优于单用醋酸亮丙瑞林治疗,其可减轻临床症状,提高妊娠几率,这可能与其有效降低血清HE4、VEGF、TIMP、MCP-1水平有关。     

辛伐他汀干预鼠颈动脉损伤MCP-1的表达

应用鼠颈动脉结扎模型,采用原位杂交、免疫组化技术观察血管单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)的表达及内膜增生情况,探讨辛伐他汀抗内膜增生机制.结果发现损伤血管内膜增生明显,MCP-1的表达增加;辛伐他汀干预可明显抑制血管MCP-1的表达及新生内膜形成.提示血管内膜增生可能与MCP-1表达上调有关,辛伐他汀抑制内膜增生也许通过MCP-1介导.     

白介素-17在牙龈上皮细胞中调控趋化因子的机制研究

目的：有研究发现白介素-17（IL-17）作为炎症反应的重要标志物在炎症反应中具有重要作用,并且其表达水平的高低与牙周疾病的严重程度有着正相关性,但是目前为止白介素-17对于牙龈上皮细胞的趋化因子生成的影响尚没有研究,所以本课题主要探索在牙龈上皮细胞（human gingival epithelial cells,HGECs）中白介素-17如何通过趋化因子调控炎症反应,并进一步探究其作用机制。方法：酶联免疫吸附剂测定法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）观察细胞中相关趋化因子分泌,同时蛋白印迹法（western blot）观察细胞中核转录因子κB的变化。结果：无IL-17刺激组与IL-17刺激组比较,IL-17刺激组的趋化因子白介素8（CXCL8）分泌量显著性增加而另一趋化因子单核细胞趋化蛋白-1（CCL2）却没有显著变化,并且通过磷酸化IκB的表达量显著性增加提示NF-κB被激活（P〈0.05）;同时IL-17刺激组与IL-17＋NF-κB抑制剂组比较,IL-17＋NF-κB抑制剂组的CXCL8分泌量显著降低,而通过磷酸化IκB的表达量显著减少提示NF-κB的活性被抑制（P〈0.05）。结论：NF-κB对IL-17刺激下的牙龈上皮细胞趋化因子的表达调控具有关键性作用,同时可能也为将来治疗IL-17诱导的牙周炎症性疾病提供了新的靶点。     

CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间存在的顺式作用元件

探讨趋化素样因子超家族成员 1,2基因 (CKLFSF1基因与CKLFSF2基因 )间的短序列对其下游基因表达的调控作用 .运用PCR技术扩增CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间的序列 ,将此片段插入含有萤光素酶 (luciferase)报告基因载体上 .以磷酸钙介导基因转染技术 ,将重组质粒以及阴性和阳性对照组质粒转染到HeLa细胞 ,进行瞬时表达分析 .在pGL3 Basic质粒中的报告基因萤光素酶无表达 ,但将CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列插入到启动子上游或下游后 ,显著抑制其下游基因的表达 ,萤光素酶活性明显降低 .结果提示 ,CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列不具有启动子活性 ,但是该序列对其下游基因表达具有负调控作用