吖啶酯发光法分析测定组织型纤溶酶原激活剂的研究

本文建立了灵敏度高、能定量测活且成本低廉的吖啶酯(AE)发光分析组织型纤维溶酶原激活剂(t-PA)的方法。该法灵敏度达0.125 IU/ml;在t-PA 0.125～8.0IU/ml范围内,t-PA活力单位对数与其发光计数呈良好的线性关系(r=0.997);批内变异系数为8％(n=8);回收率为86～122％。本法用于测定人黑色素瘤细胞mt-PA、CHO细胞表达的rt-PA,获得与纤维蛋白琼脂板测定法(FAPA)相一致的结果;测定健康人静脉闭塞前后血浆中t-PA活性的变化,显示出明显差别,静脉闭塞后血浆中t-PA活性约为静脉闭塞前的2～3倍。该法对肺癌患者血浆t-PA活性测定结果明显高于正常人,因而具有临床诊断价值。     

SOCS超甲基化与肿瘤发生

细胞因子信号转导抑制分子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)是一类在细胞信号转导过程中发挥重要作用的负调控因子,可抑制多种细胞因子的信号转导,从而实现对体内多种免疫反应的调控作用.近年来研究发现,SOCS启动子区域内CpG岛的超甲基化导致的基因转录沉默与多种肿瘤的发生密切相关.SOCS蛋白作为信号转导途径的负调节物,代表着一类肿瘤抑制基因,成为治疗肿瘤的新靶标.     

呼吸道产超广谱β-内酰胺酶分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)呼吸道分离株的主要基因型分布特点.方法用表型确证试验确定临床呼吸道标本中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.应用聚合酶链反应(PCR)方法扩增产ESBLs株的bla(TEM)、bla(SHV)和bla(CTX-M)基因.结果 PCR结果显示bla(TEM)、bla(SHV)和bla(CTX-M)基因的总阳性率分别为40 .7%、45.7%和75.3%,其中大肠埃希菌分别为:64.9%、2.7%和91.9%,肺炎克雷伯菌分别为:20.5%、81.8%和61.4%.67.6%的大肠埃希菌和95.5%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因.结论深圳市人民医院呼吸道分离的产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV.大多数菌株同时携带多个基因.     

超氧自由基与嘧啶碱基及其核苷反应的ESR研究

用自旋捕集技术和ＥＳＲ方法,以ＭＮＰ为捕集剂,研究了紫外线辐照核黄素产生超氧自由基等活性氧与嘧啶碱基及其核苷的反应,确定了尿嘧啶,胞嘧啶和胸腺嘧啶及其核苷所产生的自旋加合物自由基的类别,讨论了自由基的形成机制,揭示了超氧自由基与嘧啶碱基及其核苷的反应是不是直接进行的,而是通过羟基自由基来实现的。     

超富集植物蜈蚣草中砷化学形态的EXAFS研究

采用同步辐射扩展X射线吸收精细结构(SR EXAFS)技术研究了超富集植物蜈蚣草(Pteris vittata L.)中As的化学形态及其在转运过程中的变化.结果表明,蜈蚣草中的As主要以As(Ⅲ)与O配位的形态存在.As(Ⅴ)被植物吸收后,很快转化为As(Ⅲ),其转化过程主要发生在根部.As(Ⅲ)向地上部转运的过程中价态基本不变.在植物的根部和部分叶柄中存在少量与As-GSH相似的As-S结合方式,但是在As含量最高的羽叶中基本上未发现这种结合方式.与需要提取和分离过程的化学方法相比,采用EXAFS方法研究植物中的砷形态不需经过预分离或化学预处理就可以直接测定植物样品中元素的化学形态,因此可以避免样品预处理过程对As形态的干扰,并获得可靠的砷化学形态方面的信息.     

昆虫蜕皮激素受体及其类似物的杀虫机制研究进展

昆虫的蜕皮、变态和繁殖受到蜕皮激素的严格调控。蜕皮激素作用靶标由蜕皮激素受体（ecdysteroid receptor, EcR）和超气门蛋白（ultraspiracle protein, USP）组成,蜕皮激素与EcR/USP作用启动蜕皮级联反应过程。昆虫EcR具有种类或类群的特异性,研究其结构、功能和调控机理在开发环境友好型新药剂和基因调控开关等方面具有重要指导作用。该文介绍了昆虫EcR的结构和功能特点,蜕皮激素及其类似物与EcR/USP的分子作用方式,以及基于EcR/USP的新杀虫剂创制和基因调控开关设计等方面的重要进展。     

植物榈包埋脱水法超低温保存的研究进展

包埋脱水法是植物材料超低温保存的的新技术,从１９９０年至今,已有３０多篇文献报道。本语文介绍了包埋脱水法的研究历史、技术要点和主要优点。     

肠集聚性大肠埃希菌在健康老年人肠道中的分布及其耐药机制研究

目的分析健康老年人肠道中肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)的检出率,并探讨其毒力基因及超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的携带情况。方法取健康老年人的粪便标本分别接种于血平板、SS平板、麦康凯平板进行细菌培养,用全自动微生物鉴定仪和质谱仪鉴定细菌到种;对分离的大肠埃希菌采用双纸片协同法检测其ESBL的表型,用PCR法扩增其EAEC毒力基因astA和aggR;ESBL表型阳性的EAEC菌株用PCR法检测其ESBL基因型。结果在175例研究对象中,共检出160株大肠埃希菌,ESBL携带率为36.30%(58/160);EAEC检出16株(10.00%),其中astA阳性14株(8.75%),aggR阳性2株(1.25%);EAEC菌株的ESBL携带率为56.25%(9/16),其基因型均为CTX-M型,其中以CTX-M-14最多,占66.70%(6/9)。结论本研究获得了健康老年人肠道中EAEC的检出率及其毒力基因和ESBL的携带情况,提示我们EAEC不仅是腹泻患者的病原菌,还可以在健康老年人群中携带,且具有较高的携带率和耐药性,提醒我们加强防范。     

超抗原SEA的GPI锚定修饰和在CHO-dhfr~-细胞膜上的表达

将GPI锚定修饰的免疫分子直接转移到肿瘤细胞膜上,是研究治疗性肿瘤疫苗的一种有潜力的新策略。通过将从衰变加速因子(DAF)来源的GPI修饰性信号序列与SEA嵌合,获得了GPI修饰的SEA分子,构建的真核表达载体pCIGPI-SEA,用脂质体方法转染到CHOdhfr-细胞中,并用氨甲喋呤(MTX)进行筛选,细胞免疫荧光分析证实,SEA能够在细胞膜上表达。上述GPI锚定修饰的SEA,可用于进一步研究治疗性肿瘤疫苗。