利用Tn51063转座诱变法分离苜蓿中华根瘤菌042BMnoeB基因的研究

采用三亲本杂交方法将带有Tn51063（含luxAB）的质粒pRL1063a导入苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)042BM,进行转座子插入诱变,在含有氯霉素、卡那霉素的TY平板上筛选接合子。通过结瘤试验,从1000个突变株中,筛选到3个结瘤突变株042BMR5、042BMR11和 042BRM29。它们都表现出发光酶活性,表明转座子正向插入到基因组中的某个启动子下游。Southern杂交结果证实,转座子均为单一位点插入。对042BMR5突变株基因组进行反向PCR,扩增位于Tn51063两端的侧翼序列。测序结果表明,转座子插入到苜蓿中华根瘤菌的共生质粒pSymA noeB基因内。根据基因组中noeB上游和下游序列扩增出042BM noeB,其与苜蓿中华根瘤菌1021 noeB的同源性为98％,而与NoeB蛋白的氨基酸序列相似性为95％。疏水性分析发现,NoeB是一个跨膜蛋白,在N末端有4个跨膜区,其中包含3个初级螺旋和1个次级螺旋。     

发光酶基因lux AB标记硅酸盐细菌NBT菌株的研究

外源基因标记技术为研究土壤引入细菌的生态行为提供了有效的检测手段,通过选择不同的碳源和降低碳氮比筛选获得0．25％麦芽糖作为碳源的菌体制备培养基,对硅酸盐细菌BT菌株进行紫外诱变和抗生素抗性驯化获得—株抗利福平200μg·ml^-1的NBT-R200菌株,含发光酶基因luxAB的质粒pTR102：：luxAB在辅助质粒pRK2013的帮助下转入该菌株中,从而赋予NBT菌株以发光活性和利福平、卡那霉素、四环素三种抗生素抗性．以对数生长期的菌体制备受体细胞,发现对数生长前期的细胞转移频率最高,可达6．70×10^-5,杂交比例以1：1：1适宜．标记菌株RL85的释钾能力没有丧失且有提高,发光特性稳定,连续转接20次后仍具有发光活性和3种抗生素抗性,适用于根际微生态学研究。     

牡丹花水提液对氧自由基的清除作用

牡丹花水提液加入O 2和·OH的产生及检测系统中,能显著降低介导的氮兰四唑(NBT)的光化学还原和·OH作用下的水杨酸羟基化作用.这提示牡丹花水提液具有显著的清除氧自由基的活性,红色牡丹花水提液清除氧自由基的效能高于浅色花.     

ESBLbla SHV-12基因片段的克隆和序列分析

分析黑龙江省分离的肺炎克雷伯菌产超广谱 β 内酰胺酶基因片段的序列 ,确定该基因所产ESBLs的亚型。用双纸片法初筛检测产ESBLs菌株 ,聚合酶链反应扩增ESBLs编码基因片段 ,并将其克隆至pUC19载体中 ,双脱氧链终止法测定核苷酸序列以确定亚型。测序结果证实所获得的ESBLs基因片段含10 4 7个核苷酸 ,其基因型为SHV型 ,与SHV 12型ESBLs编码基因相同。上述结果表明 ,黑龙江省内分离的产超广谱 β 内酰胺酶肺炎克雷伯菌含有SHV 12编码基因。     

蕲蛇酶超早期溶栓治疗急性脑梗死的临床疗效

急性脑梗死多由于供应脑部血液的颅内或颅外动脉闭塞而未获得有效的侧枝循环 ,使该血管供血的脑组织发生梗塞性坏死。笔者应用蕲蛇酶对急性脑梗死超早期 86例患者进行溶栓治疗 ,获得满意的疗效 ,现报道如下。1　临床资料1 .1　入选标准　 ( 1 ) 86例急性脑梗死患者均为我院 1 998年 2月～ 2 0 0 1年 1月住院病人 ,均符合1 995年全国第四次脑血管病学术会议通过的诊断标准 ;( 2 )发病 6～ 8h内并经颅脑 CT扫描排除出血性脑卒中者 ;( 3)首次发病或过去发病但未留下神经功能缺损者 ;( 4 )按 1 995年全国第四届脑血管病学术会议制定的脑卒中患…     

肺癌的超声像、超声引导下穿刺活检及纤支镜检、酶组织化学,超微结构的研究

为了探讨超声对肺癌诊断的可行性价值,研究对象包括20例患者,20例可疑病例,均采用超声像,超声引导下穿刺活检和纤支镜检,常规病理检查,酶组织化学检查和电镜观察,结果超声诊断肺癌可以确认肺部肿块的存在,并可以观察肿瘤的大小,形态及内部结构,B超引导下活检可应用于周围型肺部肿块以及患者不宜行纤支镜检或镜检失败的某些中心型肺部肿块,肺癌组织酶组织化学活性反应为（NOS、LDH,CCO,ACP）的活性增高,SDH的活性降低,呈“四高、一是低”的特点,其超微结构示肺组织结构破坏,肺癌组织细胞结构不清,提示：超声像有助于发现肺部肿块,B超引导下活检是安全,快速,简便可行的有效手段,酶组织化学检查及电镜观察对肺癌的鉴别诊断有意义。     

一组正常眼球径活体测量

目的活体测量成年男性正视眼的前后径与横径.方法采用CT方法,对成年男性45人73只正视眼的前后径与横径的内外径进行了活体测量,并对其中23人33眼的眼轴同时进行A超测量.结果CT测量,前后径外径为24.86±1.09 mm,内径为22.31±1.22 mm,横径外径为24.98±1.25 mm,内径为22.58±1.23 mm,前后径与横径的外径与外径,内径与内径相比,均无显著性差异(均P＞0.05).A超测量眼轴为23.02±0.75 mm.成年男性正视眼基本呈圆形.CT与A超测量方法不同,结果各异.结论活体CT测量眼球径可靠、可行.尤其对横径测量,在眼球形态学的意义上,提供了一个有价值的探索途径.     

山羊精子超弱化学发光的研究

最近几年来 ,由于光子计数的发展 ,在弱光通量测定方面有了新的突破 ,动植物有机体在正常的生理状态下 (暗反应 ) ,它们的细胞、细胞器以及动物的肝脏、血液均有光子释放 ,同时由于光通量极弱 ,所以通常称为“超弱化学发光” ,它可以反映有机体基质代谢的综合活动 ,提供活体细胞物理化学反应或更复杂反应的信息 ,是生物体的化学发光 ,即有机物氧化过程中产生的激态分子 ,变到较低状态时 ,以光子形式释放能量。本文研究表明 ,奶山羊的精子存在有超弱化学发光现象 ,精子的超弱化学发光与活力呈强正相关 ,相关系数为 0 .932 5(Ｐ <0 .0 5) ,与…     

湖北黄石典型水域超微型真核浮游生物多样性研究

为探讨湖北省黄石市典型水域中超微型真核浮游生物多样性, 采用18S rDNA 扩增片段限制性酶切技术, 结合优势类群测序及相关统计学分析, 对2015年夏季湖北黄石境内营养程度不同的典型水域(长江, 磁湖, 青山湖, 青港湖)中超微型真核浮游生物的群落组成及遗传多样性进行了研究。结果表明, 4个水域的超微型真核浮游生物多样性有明显差异, 多样性随水域营养化程度的增高而降低。优势克隆的测序结果显示, 优势类群藻类包括隐藻、绿藻、甲藻, 真菌包括隐真菌和壶菌, 此外还有纤毛虫及未分类的浮游生物, 隐藻在4个水域中都占优势。不同水域的优势类群差别较大。优势类群的种类随水域营养化程度的增加而减少。群落的多样性与总磷呈极显著的负相关。