基于流式细胞术和K-mer分析的银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)植物基因组大小测定

金缕梅科(Hamamelidaceae)银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)仅包含银缕梅(Parrotia subaequalis(H.T.Chang)R.M.Hao&H.T.Wei)和波斯铁木(Parrotia persica(DC.)C.A.Mey.)两种落叶阔叶乔木,其中银缕梅是我国华东地区特有的Ⅰ级濒危珍稀保护植物,属东亚第三纪孑遗成分;其姊妹种波斯铁木则间断分布于伊朗北部,属北极第三纪孑遗植物类群。本研究首次利用流式细胞术和K-mer分析方法对银缕梅属两姊妹种的基因组大小进行了测定,建立和优化了以萝卜(Raphanus sativus L.‘Saxa’)为内标、WPB(Woody plant buffer)为细胞核解离液的两种植物单倍体基因组的DNA含量(DNA C值)流式测定的适宜体系,旨在为金缕梅科银缕梅属植物的全基因组测序、基因组学研究、种质资源开发和利用以及物种保育等提供前期基础数据参考;同时也可为金缕梅科其他属、种的基因组大小测定提供借鉴。主要研究结果如下:(1)通过流式测定银缕梅基因组大小约为971.45±13.91 Mb,波斯铁木基因组大小约为890.52±24.69 Mb;(2)K-mer分析估测银缕梅基因组大小为951.70 Mb,杂合率为1.740%,重复序列比例为77.50%;波斯铁木基因组大小为858.50 Mb,杂合率为0.695%,重复序列占74.30%;(3)银缕梅属于高杂合和高重复基因组,波斯铁木则属于微杂合和高重复基因组。本研究的结果为银缕梅属植物后续基于DNA三代高通量测序技术的全基因组测序、组装及去冗余处理等工作提供了重要的数据参考。     

染色体分选技术在植物学研究中的应用

介绍了染色体分选技术的基本原理和样品处理的基本流程,对根尖分生区采用同步化处理,制备染色体悬浮液,最后通过流式细胞仪的分析与收集获得纯度高、数量多的目标染色体。综述了染色体分选技术在植物学研究中的主要应用,包括物理图谱的构建、DNA分子标记的开发、以及复杂多倍体植物的基因组测序等。通过染色体分选技术的不断完善与发展,应用于染色体分选的探针标记不断开发,以及分选后的染色体DNA纯化和扩增技术的优化,将为多倍体植物如甘蔗等基因组学研究提供更有效的帮助。     

超声引导下硬膜外阻滞在老年髋关节置换手术中的应用

目的:探讨超声引导下硬膜外阻滞在老年髋关节置换手术中的应用方法与效果。方法:2017年6月至2020年5月选择在本院进行髋关节置换手术的老年患者112例,根据随机数字表法把患者分为研究组与对照组,各56例。研究组给予超声引导下硬膜外阻滞,对照组给予传统的静脉持续镇痛。两组都给予全麻诱导与维持,记录镇痛效果与患者术后康复情况。结果:两组的性别、年龄、麻醉时间、手术时间与术中出血量等对比差异无统计学意义(P>0.05),研究组的术后住院时间显著短于对照组(P<0.05)。两组术后1 d、3 d、7 d的疼痛视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale/Score,VAS)评分都低于术前1 d,观察组也都显著低于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。研究组术后1 d、3 d、7 d的髋关节活动度都显著高于对照组(P<0.05)。研究组术后1 d、3 d、7 d的血清P物质(Substance P,SP)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)含量都高于术前1 d,观察组低于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:超声引导下硬膜外阻滞在老年髋关节置换手术中的应用能抑制血清SP、PGE2的释放,能缓解患者术后疼痛,促进髋关节功能的恢复,缩短患者的康复时间。     

跨膜型肿瘤坏死因子α稳定表达细胞株的构建

目的：在体内,相对分子质量为26×103的跨膜型肿瘤坏死因子α（mTNF-α）可被TNF转化酶（TACE）酶解成相对分子质量为17×103的游离型TNF-α（sTNF-α）。为评价新研发的TNF-α全人源单克隆抗体与mTNF-α的结合能力,以及该单抗的ADCC作用,须构建只能稳定表达mTNF-α而不受TACE影响的Sp2/0细胞株。方法：PCR扩增缺失了TACE酶切位点的人TNF-α野生型基因序列,构建pcDNA3.1（＋）-dTNF-α重组质粒并测序鉴定;重组质粒转染Sp2/0细胞,构建只能稳定表达mTNF-α的细胞株,用流式细胞仪检测其表达情况。结果：pcDNA3.1（＋）-dTNF-α重组质粒测序结果与设计缺失基因的碱基序列完全一致,重组质粒构建成功;转染的阳性细胞株经流式细胞仪检测有表达,其中Clone11、15、16的表达量最高。结论：跨膜型TNF-α稳定表达细胞株构建成功,可用于TNF-α全人源单克隆抗体体外药效的评价。     

超声乳化白内障吸除、人工晶状体植入联合小梁切除术治疗白内障合并青光眼的临床疗效及安全性评价

目的：探讨超声乳化白内障吸除、人工晶状体植入联合小梁切除术治疗白内障合并青光眼的临床疗效及安全性。方法：将100例白内障合并青光眼患者按照抽签法随机地均分为对照组与观察组,对照组给予单纯超声乳化人工晶状体植入术,观察组在此基础上给予联合小梁切除术进行治疗。比较两组治疗前后相关指标以及术后并发症发生率等。结果：（1）对照组治疗前后IOP、ACD及AL均无统计学差异,观察组治疗前后IOP与CAD差异具有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）,但该组治疗前后AL无统计学差异;（2）两组术前与术后1周、1个月及3个月平均视野缺损值、平均模式标准差相比,差异均具有统计学意义,且观察组术后与对照组术后相比,差异均具有统计学意义;（3）对照组并发症发生率为20．00％,明显大于观察组（10．00％）。结论：超声乳化白内障吸除、人工晶状体植入联合小梁切除术治疗白内障合并青光眼,疗效显著,不良反应发生率低,值得加以推广并应用。     

序贯式止血法用于腹腔镜卵巢囊肿剥除术的临床研究

目的：探讨腹腔镜卵巢囊肿剥除术中采用序贯式止血法对卵巢功能的影响。方法：将100例行腹腔镜卵巢囊肿剥除术患者按照抽签法随机地均分为对照组与观察组,对照组给予传统双极电凝治疗,观察组采取序贯式止血法,靠近卵巢门的髓质出血镜下缝合,远离卵巢门行皮质渗血电凝处理。比较两组患者手术前后雌二醇（Estradiol,E2）、促卵泡激素（Follicle-stimulating hormonc,FSH）、促黄体生成素（Luteotropic hormone,LH）及围绝经期综合征发生情况。结果：对照组术前与术后3个月及术后6个月E2、FSH及LH差异均具有统计学意义,观察组手术前后激素水平差异无统计学意义,且观察组术后与对照组术后上述指标差异均具有统计学意义;对照组患者术后月经紊乱、植物神经功能紊乱的发生率分别为14．00％与12．00％,观察组为2．00％及0％,两组差异具有显著的统计学意义。结论：序贯式止血法应用于腹腔镜卵巢囊肿剥除术中影响卵巢功能,效果显著,值得在临床上加以推广并应用。     

联合用药靶控静脉麻醉在纤维支气管镜检查术中的麻醉效果分析

目的：分析纤维支气管镜检查术中丙泊酚联合右美托咪啶靶控静脉麻醉的效果,为临床麻醉提供参考。方法：选取73例行纤维支气管镜检查术的患者作为研究对象,按麻醉方式不同分为观察组38例（采用右美托咪啶联合丙泊酚麻醉）和对照组35例（单用丙泊酚麻醉）。观察分析各时点心率、呼吸次数、平均动脉压、血氧饱和度、镇静效果评分、苏醒时间以及不良反应发生率等指标。结果：Ramsay评分：对照组6分的例数为22例（62．9％）,观察组为32（84．2％）,差异有统计学意义;丙泊酚总用量：观察组为（334．5±54．6）mg,对照组为（463．2±60．5）mg,差异有统计学意义,医生满意度：观察组为92．1％,对照组为74.3％,差异有统计学意义。结论：丙泊酚联合右美托咪啶靶控静脉麻醉安全有效,效果显著,适合纤维支气管镜检查术。     

彩色多普勒超声测量椎动脉血流量对后循环缺血的诊断价值

目的：探讨彩色多普勒超声技术测量椎动脉血流量对后循环缺血（PCI）的诊断价值。方法：选取2012年1月至2013年1月在本院神经内科住院并接受治疗的PCI患者58例作为观察组,另选取同期住院并确诊为非后循环缺血症的患者50例作为对照组。所有患者均接受颈部血管超声检查,测量椎动脉内径及血流量,观察组患者需行头颅CTA检查,比较两组患者的椎动脉内径、血流量及颈动脉硬化斑块发生率等。结果：观察组患者的椎动脉内径及血流量明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组颈动脉硬化斑块的发生率为77．5％（44例）,对照组颈动脉硬化斑块的发生率为42％（21例）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。无狭窄、轻度狭窄、重度狭窄及闭塞的椎动脉血流量的变化（此处所指的血流量是指小于200mL/min那部分患者）有明显差异（P〈0．05）。结论：与头颅CTA对比检查,彩色多普勒具有直接、准确、方便及可重复性等优点,可有效的诊断后循环缺血症状。     

不同剂量地佐辛用于腹腔镜妇科手术超前镇痛的效果观察

目的：观察不同剂量地佐辛用于腹腔镜妇科手术超前镇痛的效果。方法：将90例ASAI．II级、年龄18~60岁拟行腹腔镜妇科手术的患者随机分成3组,每组30例,A组给予地佐辛0．1mg／kg开皮前15rain静脉注射;B组给予地佐辛0．15mg／kg开皮前15min静脉注射;C组给予地佐辛0．2mg／kg开皮前15min静脉注射,采用VAS评分评估术后镇痛效果并观察术后辅助镇痛药物的使用和不良反应的发生情况。结果：B、c组术后2、4、6、8h的VAS评分明显低于A组（P〈0．05）;C组术后2、4h的Ramsay评分明显高于A、B组（P〈0.05）;A组术后辅助镇痛药的使用率明显高于B组和C组（P／0．05）;3组不良反应的发生率比较均无统计学差异（P〉0．05）。结论：开皮前15rain静注地佐辛0．15mg／kg用于腹腔镜妇科手术镇痛效果好,且不增加不良反应的发生率。     

地佐辛在神经外科术后镇痛的应用体会

目的：探讨地佐辛用于神经外科患者术后镇痛的效果和安全性。方法：将64例ASAⅠ～Ⅱ级行神经外科手术患者随机分为两组,术后均以静脉自控镇痛（PCIA）,其中A组（34例）用地佐辛,B组（30例）用舒芬太尼,观察两组镇痛、镇静效果及不良反应。结果：术后4 h、8 h、12 h、24 h视觉模拟评分（VAS）和不良反应发生率A组明显低于B组（P〈0.05）,Ramsay评分明显高于B组（P〈0.05）。结论：地佐辛用于神经外科患者术后镇痛确切,不良反应少。