植物种质离体保存技术研究进展

本文综述了国内外植物种质离体保存技术最新研究进展。科学家们已发展了一系列行之有效的离体保存技术体系,进一步建立长期、安全、适用的离体保存技术体系及探索保存过程中遗传变异情况是今后的重要研究方向。     

保藏活细胞的新技术——“过冷”

生物技术面临着大量储存活细菌和酵母等的重大问题,活细胞保藏技术的进步对于生物技术业尤显重要。过去十年间,科学家们在寻找保藏活细胞的新方法方面取得了可喜的成绩,“过冷”技术即是引人注目的新技术之一。剑桥大学生物物理学家F.Franks博士,在研究活细胞中水的冷冻行为的基础上,发展了这种保藏活细胞的“过冷”技术。     

猪卵母细胞体外成熟与冷冻附睾精子的体外受精

由屠宰母猪卵巢分离得到505枚卵母细胞,经成熟培养,其中468枚卵丘细胞扩张,成熟率为92.7％。采用冷冻的附睾精子授精,受精率为41.9％(57/136),其中单精受精率36.8％(50/136),多精受精率5.1％(7/136)。授精卵体外培养24和48小时后的卵裂率分别为5.3％(15/258)和12.9％(30/232)。把35枚早卵裂期胚胎和250枚未见卵裂的1-细胞期受精卵移入4头受体母猪的输卵管内,其中2头妊娠,分别于1990年4月10日和29日正常分娩,共生产仔猪21头。     

两种冷冻保护剂对小鼠2-细胞胚冷冻效果的比较

乙二醇（ETG）和1,2-丙二醇（PROH）具有高细胞渗透性和低毒性特点,常被用于人及多种哺乳动物早期胚胎冷冻保存。为了比较ETG和PROH对小鼠2-细胞胚的冷冻保护效果,本试验分别采用这两种冷冻保护剂,对小鼠2-细胞胚进行冷冻保存,并采用冻后体外培养和囊胚移植进行冷冻效果检测。结果表明,PROH组胚胎解冻后胚胎存活率与ETG组无显著差异,但PROH组4-细胞胚发育率和囊胚发育率显著高于ETG组（82．7％vs．64．6％,61．2％vs．29．1％,P〈0．01）。囊胚移植结果表明,2-细胞胚胎冻存后能够发育为正常的后代,PROH组和ETG组的囊胚移植后妊娠产仔率无统计学差异（P〉0．05）,但均显著低于对照组（P〈0．05）。为了分析两组胚胎冻存后损伤情况,埘解冻后的胚胎细胞微丝进行检测,结果显示ETG组微丝受损的胚胎数高于PROH组。本研究结果证明采用PROH作为冷冻保护剂冷冻保存小鼠2-细胞胚的冻存效果优于ETG[动物学报54（6）：1098—1105,2008]。     

不同消融方式对心房颤动患者凝血参数、心肌损伤以及生活质量的影响

摘要 目的：探讨不同消融方式对心房颤动患者凝血参数、心肌损伤以及生活质量的影响。方法：回顾性分析2018年1月至2019年7月在我院心血管内二科住院拟行消融手术的心房颤动患者200例的临床资料,根据消融方式分为射频消融（RFCA）组（n=99）和冷冻消融（CBA）组（n=101）,比较两组患者围术期指标、凝血参数、心肌损伤以及生活质量,记录两组术后并发症发生情况。结果：CBA组手术时间、消融时间短于RFCA组,冷冻最低温度低于RFCA组（P<0.05）。两组术后 24 h活化部分凝血活酶时间（APTT）降低,但CBA组高于RFCA组（P<0.05）,两组术后 24 h血管性假血友病因子（vWF）、D-二聚体（D-D）升高,但CBA组低于RFCA组（P<0.05）。两组术后 24 h肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白 I （TnI）较术前升高,且CBA组高于RFCA组（P<0.05）。两组术后3个月情感职能、躯体疼痛、生理机能、精神健康、活力、生理职能、健康状况、社会功能维度评分较术前升高,且CBA组高于RFCA组（P<0.05）。两组并发症发生率对比未见统计学差异（P>0.05）。结论：与RFCA相比,CBA治疗心房颤动,可缩短手术时间、消融时间,减轻对凝血功能的影响,提高患者生活质量,且不增加并发症发生率,但CBA对机体心肌损伤影响更大,临床应视患者具体情况选择合适的手术方法进行治疗。     

激光辐射奶牛冷冻精液对精子诱变效应的研究

为了探索激光辐射精子的诱变效应,本试验采用ＴＳＴ（Ｔｒｉｐｌｅ Ｓｔａｉｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ,即精子三重染色法）、ＳＰＡ（Ｓｐｅｒｍ Ｐｅｎｅｔｒａｉｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ,即精子穿透分析法和ＣＡＳ（Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ Ａｎｅｕｐｌｏｉｄｙ ｉｎ Ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ,即精子单倍染色体制备技术）,三项有关精子的现代分析技术,对激光辐射精子的受精学、遗传学效应进行了研究。结果表明：Ｈｅ－Ｎｅ激     

电子支气管镜下氩气刀联合冷冻疗法治疗晚期肺癌的临床疗效及对患者癌性疼痛和免疫功能的影响

目的:评价电子支气管镜下氩气刀联合冷冻疗法治疗晚期肺癌的疗效及对患者癌性疼痛和免疫功能的影响。方法:选择我院2016年7月～2018年7月收治的94例晚期肺癌患者,按随机数字表法分为对照组(51例)和4研究组(43例)。对照组采用常规化疗,研究组在对照组基础上联合电子支气管镜下氩气刀和冷冻疗法。治疗后,比较两组的临床疗效,治疗前后疼痛程度、疼痛介质、免疫功能、生活质量的变化和不良反应的发生情况。结果:治疗后,研究组疾病控制率显著高于对照组(P0.05),两组疼痛Ⅰ级率、CD4~+、CD4~+/CD8~+及生活质量评分均较治疗前显著上升(P0.05),而疼痛介质及CD8~+均较治疗前明显下降(P0.05),研究组疼痛Ⅰ级率、CD4~+、CD4+/CD8~+及生活质量评分明显高于对照组,而疼痛介质及CD8~+均显著低于对照组(P0.05)。两组总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:电子支气管镜下氩气刀联合冷冻疗法用于治疗晚期肺癌的疗效明显优于常规化疗,其可显著减轻癌性疼痛,改善患者免疫功能斌提高患者的生活质量。     

影响冷冻切片质量因素的分析

冷冻切片 (frozensection)是在低温恒冷条件下 ,使组织迅速冷冻达到一定硬度后制作成切片 ,冷冻切片的组织不需经过任何处理 ,组织中的糖、脂、蛋白质、酶、抗原、抗体等化学成分不受影响而得以保存。它除常用于手术中的快速病理诊断 ,还用于某些组织化学染色 ,酶的显示、抗原、抗体的检测 ,免疫荧光等方面。冷冻切片是一种组织切片快速制作方法 ,存在着多种干扰因素 ,影响冷冻切片质量主要有以下四个方面。1组织冷冻与冰晶形成冰晶的形成是组织在冷冻固化过程中 ,由于冷冻缓慢 ,时间过长 ,细胞胞浆和组织间隙内未结合水逐渐析出所形成 ,融…     

欧洲赤松树脂道上皮细胞树脂分泌方式研究(英)

利用高压冷冻和冷冻替代技术对欧洲赤松（PinussylvestrisCarr．）茎皮层成熟树脂道上皮细胞的超微结构进行研究,揭示出一种全新的树脂分泌方式。其分泌过程为：一些含有水解酶的高尔基小泡,转移至质膜周围并释放水解酶,从而将质膜溶解形成分泌通道,树脂由此迅速转移至质膜外,然后,通过高尔基小泡相互融合形成新膜片段的方式来修补破损的质膜。     

肠道病毒B家族埃可病毒16（E16）型的病毒样颗粒的结构解析

肠道病毒B家族是引发人类病毒性脑炎和脑膜炎的重要病原体之一. 然而目前市场上尚缺乏针对此类病毒的特异性疫苗. 病毒样颗粒具有保留病毒真实结构特点、不含病毒核酸、不具备病毒复制与感染能力的特征，为开发有效、稳定且安全的新型疫苗提供了理想方案，特别是针对无囊膜的肠道病毒. 本研究中，我们基于昆虫细胞表达系统，经密度梯度离心等方法获得了埃可病毒16（E16）型的病毒样颗粒（virus-like particle; VLP）. 借助冷冻电镜单颗粒技术，我们成功将该病毒VLP解析到原子分辨率（2.8 ?），结构分析显示：与同源病毒E30的结构相类似，E16-VLP具备肠道病毒所特有的能够引起机体产生特异性中和免疫反应的重要结构特征，具有较大的疫苗开发价值. 我们所建立的方法在抗肠道病毒B家族通用疫苗的设计与开发上具有巨大潜力.