圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因一sanL的结构与功能

利用染色体步移策略,以尼可霉素生物合成相关的基因片段为探针,从圈卷产色链霉菌中克隆到了一个大约10kb的DNA片段.序列分析表明此片段中除含有sanK外,在sanK的上游还有一个完整开放阅读框——sanL.sanL与sanK的转录方向相同,具有1281个核苷酸,起始密码子为345位的ATG,终止密码子为1623位的TGA.利用Blastx程序进行的分析揭示,此基因可能编码一个赖氨酸-2-氨基转移酶.基因功能研究表明,该基因是圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成所必需的.     

赖氨酸发酵过程溶氧控制研究

L-赖氨酸是当前国内外全价配合饲料的主要添加剂,具有提高饲料利用率,促进动物生长和改进肉质的功效。近年来,随着养殖业、饲料业等行业的迅猛发展,国内市场对赖氨酸的需求量大大增加。当前,赖氨酸的生产主要以发酵法为主,本文重点对目前赖氨酸发酵过程中溶氧的控制进行分析,综述了工业改善溶氧的措施。     

不同生长底物对培养背根神经节细胞的影响(简报)

发育期细胞和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)之间的相互作用调节着细胞的功能,包括细胞的迁移、细胞骨架的构建、细胞的增值和分化。神经元“移居”体外后,失去了在体内所依托的组织学关系,必须黏附于一个固相表面才能生存,所以神经元只有在包被基质的培养器皿上才能存活,对于分离的神经元来说,能否尽快粘附到生长基质上是影响神经元体外存活的因素之一。许多研究证明     

高赖氨酸蛋白基因在大肠埃希菌中的表达

从四棱豆中克隆高赖氨酸蛋白基因wblys,通过PCR扩增wblys片段,转入原核表达载体pGEX-4T-1,构建pGEX-4T-1/wblys大肠埃希菌工程菌,表达重组蛋白,IPTG诱导后,发现细菌全蛋白在44 ku(含GST标签)处多出1条明显条带。HPLC检测赖氨酸含量。诱导后菌体总赖氨酸含量比正常菌体提高15.84 mg/g。在大肠埃希菌中高效表达植物源高赖氨酸蛋白基因,为该基因在益生菌中表达提供研究工作基础。     

有益芽胞杆菌受体菌研究

采用酸性茚三酮法测定了30株有益芽胞杆菌的赖氨酸产量,然后在不同的溶菌酶浓度下,对赖氨酸产量超过0.07g/L的21株菌进行原生质体转化质粒pUB110,测定原生质体形成率、原生质体再生率及转化频率,结果6103,6104,6120,6129四株菌的转化频率较高。然后,采用经典遗传学方法选育AEC抗性突变株,使赖氨酸积累提高。其中,B. licheniformis 6104诱变菌株610401能积累赖氨酸2.91 g/L,比出发菌株提高了17倍左右,转化率也提高了一个数量级。通过质粒的再转化试验及传代稳定性试验,进一步证实B.licheniformis 6104及其突变菌株610401是较好的受体菌,尤其是用于赖氨酸合成酶基因的表达。     

多聚左旋赖氨酸包被玻片的可视化检测方法

分子量15万—30万的多聚左旋赖氨酸(Poly-L-Lysine,PLL)常被用于盖玻片的包被,以促进培养细胞贴壁或切片组织黏附。然而,用市场上劣质的PLL将使组织或细胞不能牢固黏附在包被玻片上,进而导致实验失败。因而,建立实用直观的PLL质量检测方法,对于PLL包被玻片的质量控制至关重要。然而,目前世界上未见相关方法报道。因此,作者本着实用原则建立了一种实验室可视化检测盖玻片表面PLL的方法,这种方法利用化学反应将异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)添加到PLL的侧链氨基(-NH2)上,再利用荧光成像检测附着在玻片表面的FITC-PLL,同时荧光照片也可以通过Fiji软件进行分析,获得定量的检测结果。利用此方法,研究发现利用不同浓度的PLL包被盖玻片后,PLL偶联的FITC荧光强度和PLL浓度成正相关。通过检测市面上的两种商品化PLL,与对照相比,两种商品化PLL附着密度极低,推断利用这两种不合格的PLL包被玻片,将导致切片样本从玻片上脱落。此方法适用于实验室自制或商品化PLL黏附盖玻片质量的可视化检测,也为附着在玻璃或塑料表面的带有-NH2基团物质的定量检测方法的建立提供参考。     

arg—13可能参与鸟氨酸在粗糙脉孢霉线粒体的过膜转运

arg-13 is a leaky mutation involved in arginine metabolism. A tight selection is developed using similar amount of lysine and ornithine replacing other nitrogen source in minimal medium. This selection strongly inhibits the growth of arg-13 under stringent sorbose/glucose condition but allows arg-13 to grow under spot test conditions. As ornithine is build up through mitochondrial ornithine biosynthesis and transport from cytoplasm to mitochondria, arg-13 is combined in genetic crosses with arg-4 which blocks mitochondrial ornithine synthesis. Under spot test conditions, double mutant arg-4, arg-13 is able to use ornithine as sole nitrogen source and arginine biosynthesis precursor, but subject to strong lysine and canavanine inhibition. While the usage of ornithine in arg-4 single mutant with intact ornithine transport function is only slightly inhibited by lysine. All available data suggest arg-13 plays a major role in mitochondrial ornithine transport. The strain carrying the mutation at the arg-13 locus allows inefficient mitochondrial ornithine trafficking, possibly mediated by another distinct basic amino acid carrier.     

用721分光仪测定大豆赖氨酸的方法

本文介绍了改用721分光仪测定大豆赖氨酸含量的方法。将其试验结果与835型氨基酸分析仪结果相对照,经T检验差异不显著,相关性结果达0.99。两种仪器分析结果基本一致。说明改用721分光仪测定大豆赖氨酸含量是可行的。     

揭开细菌乙酰化的秘密

赖氨酸乙酰化在哺乳动物细胞生理学过程中起关键作用,但其对于原核细胞翻译后修饰的重要性及其作用范围。基本上还是扑朔迷离。为了帮助克服这一障碍,本文首次报道了大肠杆菌赖氨酸乙酰化全在分析的结果,本文鉴定了91种蛋白的138个乙酰化位点,