乏氧诱导因子-1α基因沉默对肺癌细胞乏氧应答相关基因表达的影响

乏氧诱导因子-1α (HIF-1α)是肿瘤细胞适应乏氧微环境的关键调控因子,具有作为治疗靶基因的潜力,以克服乏氧诱导的治疗抗拒等效应.下调其表达可能影响肿瘤细胞内一系列乏氧应答相关基因的表达.本研究采用已构建的HIF-1α RNAi慢病毒载体转导肺腺癌A549细胞,经杀稻瘟素（blasticidin）筛选建立HIF-1α基因稳定沉默的A549细胞株.应用cDNA微阵列技术检测并比较HIF-1α基因沉默A549细胞株和其亲本细胞株在常氧和乏氧状态下的基因表达谱改变. 应用定量RT PCR方法验证部分cDNA芯片差异表达基因的表达改变.HIF-1α基因稳定沉默细胞株A549/HIF-1α,在常氧和乏氧条件下HIF-1αmRNA水平分别较A549细胞下降89.2％和88.1％,HIF-1α蛋白水平分别下降97.2％和88.4％. 在乏氧条件下,cDNA微阵列检测的1 280个基因中,52个基因表达上调,15个基因表达下调. HIF-1α基因沉默显著影响其中27个基因的乏氧诱导效应.定量RT-PCR验证其中ENO2、BCL-2、CXCR4和MMP11的表达水平,与cDNA芯片结果相符合.结果提示,HIF-1α基因沉默能够在一定程度上阻断肺癌细胞的乏氧应答,在克服乏氧导致的肺癌治疗抗拒方面具有潜力.     

百里香的组织培养

1植物名称百里香(Thymus serpyllum var.mongolicus Ronn.)。2材料类别顶芽和腋芽。3培养条件(1)芽诱导培养基:MS基本培养基;(2)增殖培养基:MS 6-BA 1.5 mg·L~(-1)(单位下同) IBA 0.1 0.6%琼脂 3%蔗糖;(3)生根培养基:1/2MS IBA 0.5 0.7%琼脂 2%蔗糖。以上所有培养基均为pH 5.8～6.0,培养温度(24±2)℃,光     

蝴蝶豆的组织培养

1植物名称蝴蝶豆(Centrosema pubescens Benth.),别名距瓣豆。2材料类别下胚轴。3培养条件(1)种子萌发培养基为MS;(2)诱导增殖培养基:MS 6-BA1.0mg·L-1(单位下同) ZT1.0 IAA0.1;(3)分化培养基:MS 6-BA1.0 NAA     

神秘果幼胚离体培养再生植株

1植物名称神秘果[Synsepalum dulcificum(Sch.) Daniell]。2材料类别幼胚。3培养条件幼胚萌发培养基:(1)MS。不定芽诱导培养基:(2)MS BA 6.0 mg·L~(-1)(单位下同) NAA 0.2 50 mL·L~(-1)椰子乳(CM)。增殖培养基:(3)     

翻白草的组织培养和植株再生

1植物名称翻白草(Potentilla discolor Bunge)。2材料类别叶片。3培养条件(1)愈伤组织诱导培养基:MS 6-BA 1 mg·L~(-1)(单位下同) 2,4-D 0.5、1、2、3、4;(2)诱导芽分化培养基:MS 6-BA 1 NAA 0.5、1、2、3、4;(3)诱导生根培养基:1/2MS IBA 0.5、1、2、3、4。培养基均加30 g·L~(-1)蔗糖、     

云南越桔的组织培养

1植物名称云南越桔[Vaccinium duclouxii (Lévl.) Hand.-Mazz.]。2材料类别腋芽。3培养条件基本培养基为改良的WPM培养基:以水合硝酸钙[Ca(NO_3)_2·4H_2O]684mg·L~(-1)(单位下     

南沙参的组织培养与快速繁殖

1植物名称南沙参[Adenophora tetraphylla (Thunb.) Fisch.],别名轮叶沙参。2材料类别种子。3培养条件基本培养基为MS。(1)种子萌发培养基:MS 6-BA0.5mg·L-1(单位下同) NAA0.1;     

一种改进的烟草悬浮细胞继代方法

在植物细胞悬浮培养过程中,对影响细胞系均一性和质量的细胞团块形成的克服方式一般有2种。一是分级过滤继代,即用不同目数的细胞筛除去大的细胞团块和细胞碎片,将小细胞团和单细胞转移到新培养基中作继代培养。此方法操作     

加拿大一枝黄花的组织培养及植株再生

1植物名称加拿大一枝黄花(Solidago canadensis Linn.)。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件(1)诱导愈伤组织培养基:MS 2,4-D0.5mg·L-1(单位下同);(2)芽分化培养基:MS 6-BA1.0;(3)生根培养基:MS。     

飘香藤的组织培养与快速繁殖

1植物名称飘香藤(Dipladenia sanderi Hemsl.)。2材料类别顶芽。3培养条件不定芽启动、丛生芽增殖培养基:(1)MS 6-BA 6.0 mg·L~(-1)(单位下同) NAA 0.2;(2) MS 6-BA 2.0 NAA 0.2;(3)MS 6-BA 0.5 NAA