猴B病毒相关抗体及B病毒抗体检测的比较研究

本文比较了用ＨＳＶ－１（ＩＥＡ）和Ｂ病毒（ＩＦＡ）的方法检查猴Ｂ病毒相关抗体和Ｂ病毒抗体的结果：ＩＥＡ检查出的Ｂ病毒相关抗体阴性猴,经ＩＦＡ检查,全部为Ｂ病毒抗体阴性。用ＩＦＡ检查了Ｂ病毒相关抗体阴性的恒河猴,在单笼隔离饲养六个月后,有９８．３％的动物Ｂ病毒相关抗体仍为阴性,表明ＩＲＡ的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无Ｂ病毒感染猴群的可行性。     

无花果蛋白酶在阴离子交换树脂上的固定化

无花果蛋白酶通过８％戊二醛活化载体,共价结合到聚苯乙烯阴离子交换树脂ＧＭ２０１上,固定化作用在ｐＨ７．７,酶浓度０．８ｍｇ／ｇ树脂,４℃下进行６ｈ。得到的固定化酶表观Ｋ_ｍ值（酪蛋白,１．１１×１０~（－４）ｍｏｌ／Ｌ）小于溶液酶Ｋ_ｍ值（１．９６×１０~（－４）ｍｏｌ／Ｌ）;固定化酶活性在ｐＨ６～８保持稳定,溶液酶最适ｐＨ为７．２;固定化酶最适温度由溶液酶的５０～６０℃移至３７℃;固定化酶２５℃保持７ｄ,重复水解酪蛋白７次后,保留８３．３％活性。固定化酶对酪蛋白水解度达４７．５％,对大豆球蛋白达１１．６％。     

重组水蛭素HV2的稳定性

重组水蛭素ＨＶ２是凝血酶的特异性抑制剂,是一种非常稳定的蛋白质。温度的升高（１００℃水浴）和ｐＨ（１─１３）的改变不影响其活力,在某些变性剂（８ｍｏｌ／Ｌ尿素、１％ＳＤＳ和６ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍）存在的条件下也非常稳定,０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＤＴＴ在７０℃时使其部分失活,只有ｐＨ和温度同时升高其活力才开始下降,ｐＨ１３、８０℃处理１５ｍｉｎ即完全失活,氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Ｃｙｓ和Ｌｙｓ被破坏。重组水蛭素ＨＶ２含有一个结构紧密的Ｎ端核心区和一个无序的Ｃ端尾部。其Ｎ端的３个Ｌｙｓ－Ｘａａ键均不被胰蛋白酶水解;胃蛋白酶及糜蛋白酶消化后,分离所得片段,氨基酸组成分析发现Ｎ端核心区依然保持很高的抗凝血酶活性,继续消化２４ｈ,核心区不被进一步降解。     

P物质对GABAA和GABAB受体介导的DRG神经元膜反应的调制作用

实验在幼年大鼠ＤＲＧ标本上进行。应用细胞内记录观察了ＳＰ对ＧＡＢＡ反应的调制作用。结果证明：（１）单独滴加ＳＰ（５×１０（－６）－４×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）或浴槽灌流ＳＰ（１０（－６）－５×１０（－６）ｍｏｌ／Ｌ）不引起膜电位的改变或仅有轻微的去极化,但却能使ＧＡＢＡ引起的去极化反应减小５０．８±２０．２％（±ＳＤ）（２０／３０）;（２）单独滴加ＳＰ可使多数受检细胞ＡＰＤ５０延长２８．７±９．１％（±ＳＤ）（１０／１８）;（３）在预加ＳＰ后,能使ｂａｃｌｏｆｅｎ所引起的ＡＰＤ５０缩短效应（２０．６±２．９％,±ＳＤ）完全消除（４／１２）或翻转成ＡＰＤ（５０）延长１９．３±８．９％（±ＳＤ）（８／１２）;（４）预加ＧＡＢＡＢ受体激动剂ｂａｃｌｏｆｅｎ（１０（－４）－１０（－３）ｍｏｌ／Ｌ）３０—９０ｓ后明显地抑制ｍｕｓｃｉｍｏｌ（１０－４－１０－３ｍｏｌ／Ｌ）引起的去极化反应,其抑制效应达５４．４±１８．８％（±ＳＤ）（１７／２０）。由于ＤＲＧ神经元的胞体通常可用来作为研究初级传入终末的模型,因而本文实验结果提示：介导伤害性刺激信息的Ｐ物质在背角的释放,可能作用于初级传入终末,从而产生对抗ＧＡＢＡ介导的突触     

艾氏剂环氧化酶及细胞色素P－450对小菜蛾抗药性发展的影响

本文对室内长期饲养的小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ　ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ　Ｌ．）敏感品系和田间采集的抗性种群体内的艾氏剂平氧化酶及细胞色素Ｐ－４５０进行了比较研究。结果证明,艾氏剂环氧化酶在感性和抗性小菜蛾间存在着量及质的差异。抗性种群的艾氏剂环氧化酶的Ｖｍａｘ和Ｋｍ值分别为感性品系的５．４％和６．５倍。抗性种群的细胞色素Ｐ－４５０的含量是感性品系的１．１—１．３倍。艾氏剂环氧化酶在量上及质上的差异及细胞色素Ｐ－４５０含量的提高是导致小菜蛾抗药性发生与发展的重要机制之一。而且质的差异较之量的差异可能起着更为重要的作用．     

P物质的分子神经生物学研究进展

Ｐ物质的分子神经生物学得到了较广泛的研究,其中包括Ｐ物质的生物合成与调节、活性构象、释放与灭活、对膜通道的影响以及Ｐ物质受体的分子生物学等。另外,还涉及到了Ｐ物质Ｎ端片段的功能及结全位点。这些工作为从分子水平上进上步阐明Ｐ物质在神经系统中纷繁而重要的生理功能奠定了基础。     

假菠萝麻蛋白酶分离纯化及特性研究

从假菠萝麻叶汁中用乙醇分部沉淀法得到一种蛋白酶,对酪蛋白有强烈的水解活性,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００柱层析和ＳＰ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ－５０离子交换柱层析等步骤纯化,可得到六角形结晶。结晶酶液经ＰＡＧＥ圆盘电泳,每条胶柱上只显示一条蛋白带,其活性在ｐＨ４。５－１０、５５℃范围内较稳定,最适ｐＨ８．５最适温度５０℃,Ｋｍ（酪蛋白）值为０．１８５％（Ｗ／Ｖ）。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｓｅｐｈａｄｅｘ     

琥珀酰—CCK7对大鼠胰腺腺泡细胞分泌α淀粉酶和蛋白酶的影响

琥珀酰－ＣＣＫ７为新合成的ＣＣＫ８的一种类似物,当琥珀酰－ＣＣＫ７的浓度为１×１０＾－１１ｍｏｌ／Ｌ－１×１０［－７］ｍｏｌ／Ｌ时,能促使大鼠胰腺离体腺泡细胞分泌α淀粉酶和蛋白酶,其最有效浓度为１×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。在相同摩尔条件下,琥珀酰－ＣＣＫ７的促分泌效应明显大于ＣＣＫ８,且这种效应在３小时内随着作用时间的延长而增加,这为开发高活性ＣＣＫ８的类似物提供了依据。     

霍乱毒素B亚基融合蛋白表达系统的构建

霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）是良好的免疫佐剂和载体蛋白。本研究通过定点突变,在ＣＴＢ基因（ｃｔｘＢ）３＇端终止密码前引入了限制性内切酶ＥｃｏＲＩ,构建了质粒ＰＭＣ０５,ＰＭＣ０５中ＣＴＢ与下游ｌａｃＺ＇基因阅读框架相同,转化大肠杆菌后能够表达ＣＴＢ与β－半乳糖苷酶α肽的融合蛋白;所表达的融合蛋白能与ＧＭ１结合,说明融合蛋白保持ＣＴＢ的基本高级结构和生物学活性;融合蛋白能与抗－ＣＴＢ抗体结合,说明融合蛋