两个相关基因表达量和SNP与玉米雄穗大小相关

玉米雄穗通常较发达,散粉量大于授粉需要,过量消耗能量会影响光合产物向果穗的分配,过于发达的雄穗还会影响群体透光性、降低光合效率。生产实践和育种研究证明,由于雄穗大小与玉米籽粒产量负相关,因此成为品种选育的间接选择指标。该研究根据前人的报道,从11个雄穗大小不同的玉米自交系中扩增角蛋白相关蛋白基因KAP5-4和受体样蛋白激酶基因CLV1的基因组序列,多重比较后用以分析其开放阅读框、保守结构和单核苷酸多态性,用荧光实时定量PCR检测其在雄穗原基中的差异表达,并与雄穗分枝数和雄穗干重两个度量雄穗小的指标进行了相关分析。结果表明:KAP5-4基因的相对表达量与雄穗分枝数(r=0.77,P0.01)和雄穗干重正相关(r=0.83,P0.01)。11个自交系的CLV1基因开放框在2 104 bp存在单核苷酸多态性,其中5个自交系的2 014~2 016 bp核苷酸组成密码子GAC,编码受体样蛋白第702位酸性的天冬氨酸,另6个自交系的2 014~2 016 bp核苷酸组成密码子AAC,编码受体样蛋白第702位极性天冬氨酰胺。在前5个自交系中,CLV1基因的相对表达量与雄穗分枝数(r=-0.92,P0.01)和雄穗干重(r=-0.91,P0.05)负相关;而在后6个自交系中,仅与雄穗干重负相关(r=-0.91,P0.05)。综上所述,KAP5-4和CLV1基因的表达和单核苷酸多态性与玉米雄穗大小关系密切,可开发功能性的DNA标记用于玉米育种的分子标记辅助选择。     

多层螺旋CT联合血清糖类抗原19-9、细胞角蛋白19片段抗原、Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值研究

摘要 目的：研究多层螺旋CT（MSCT）联合血清糖类抗原19-9（CA19-9）、细胞角蛋白19片段抗原（CYFRA21-1）、Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值。方法：选择2018年1月～2021年12月江苏省肿瘤医院收治的102例疑似食管癌患者。根据手术病理结果分为恶性组58例以及良性组44例,对所有受试者均进行MSCT扫描,比较两组各项MSCT影像学特征。检测并比较两组血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1表达水平。通过Logistic回归建立多指标联合应用的风险预测模型,应用受试者工作特征（ROC）曲线分析MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的效能。结果：恶性组MSCT特征表现为形态不规则、边界模糊病例数占比均高于良性组（均P＜0.05）。关联性检验P＜0.05,提示MSCT诊断方法和金标准病理方法显著关联;优势性检验P＞0.05,提示MSCT诊断方法和金标准病理方法优势差异不显著,即MSCT诊断方法是一种较有价值的食管癌诊断方法。恶性组血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1表达水平均高于良性组（均P＜0.05）。经ROC曲线分析发现：MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1诊断食管癌的曲线下面积（0.863）、灵敏度（0.879）、特异度（0.841）以及约登指数（0.720）均高于MSCT、血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1诊断。结论：MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值较高,值得推广应用。     

角蛋白启动子在人乳头瘤病毒的转基因小鼠中的研究进展

人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus,HPV）感染与多种疾病相关,但引起这些疾病的机制还不是很清楚。因此,人们想通过构建动物模型来深入了解HPV引起的各种疾病的机制。HPV具有严格的嗜人类组织的特性,这就要求在构建转基因动物模型中利用不同外源启动子,使HPV癌蛋白定向表达在特定的组织细胞中。本文主要介绍人角蛋白启动子在HPV的转基因小鼠中的一些研究进展。     

血清细胞角蛋白19、神经元特异性烯醇化酶及鳞状上皮细胞癌抗原在小细胞肺癌诊断及病情评估中的作用研究

摘要 目的：分析血清细胞角蛋白19（CK19）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）及鳞状上皮细胞癌抗原（SCCA）在小细胞肺癌诊断及病情评估中的作用。方法：选择我院自2020年1月至2022年7月收治的85例小细胞肺癌患者作为观察组,另选同期的85例肺部良性疾病患者作为对照组。检测两组血清CK19、NSE、SCCA表达水平,比较两组血清CK19、NSE、SCCA表达水平及其阳性率,使用ROC曲线下面积（AUC）分析上述指标对小细胞肺癌的诊断效能,观察小细胞肺癌不同分期患者血清CK19、NSE、SCCA表达水平的差异性,分析观察组治疗前后血清CK19、NSE、SCCA表达水平的变化情况。结果：观察组血清CK19、NSE、SCCA表达水平均较对照组高（P＜0.05）;观察组血清CK19、NSE和SCCA的阳性率均较对照组高（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清CK19、NSE联合SCCA诊断小细胞肺癌的敏感度为91.23 %,特异度为84.67 %,AUC为0.910;在85例小细胞肺癌患者中,临床分期为局限期33例、广泛期52例;广泛期患者血清CK19、NSE、SCCA表达水平均高于局限期患者（P＜0.05）。结论：血清CK19、NSE联合SCCA诊断小细胞肺癌的效能较好,三者均与患者病情严重程度有关,有利于此病的早期诊断和病情评估,值得进一步研究应用。     

动物的毛与人发角蛋白组分的比较研究

本文用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对10科18种50份动物毛与人发进行了角蛋白组分分析。结果证实,动物的毛与人发角蛋白组分的主要差异在<18.500低分子量区域;不同种属的动物毛角蛋白组分也存在明显差异;大熊猫毛的角蛋白组分与小熊猫和黑熊的相比有显著不同。不同种属动物毛角蛋白组分的差异对动物分类学研究能提供有参考价值的实验依据。     

Characterization of transgene integration pattern in F4 hGH-transgenic common carp （Cyprinus carpio L.）

The integration pattern and adjacent host sequences of the inserted pMThGH-transgene in the F4 hGH-transgenic common carp were extensively studied. Here we show that each F4 transgenic fish contained about 200 copies of the pMThGH-transgene and the transgenes were integrated into the host genome generally with concatemers in a head-totail arrangement at 4-5 insertion sites. By using a method of plasmid rescue, four hundred copies of transgenes from two individuals of F4 transgenic fish, A and B, were recovered and clarified into 6 classes. All classes of recovered transgenes contained either complete or partial pMThGH sequences. The class I, which comprised 83% and 84.5% respectively of the recovered transgene copies from fish A and B, had maintained the original configuration, indicating that most transgenes were faithfully inherited during the four generations of reproduction. The other five classes were different from the original configuration in both molecular weight and restriction map, indicating that a few transgenes had undergone mutation, rearrangement or deletion during integration and germline transmission. In the five types of aberrant transgenes, three flanking sequences of the host genome were analyzed. These sequences were common carp β-actin gene, common carp DNA sequences homologous to mouse phosphoglycerate kinase-1 and human epidermal keratin 14, respectively.     

三种大鼠肝损伤模型中细胞角蛋白异常表达及其机制──免疫组化及免疫电镜研究

本研究应用ＡＢＣ免疫组化技术显示,奶油黄、液氮致局部冻伤及ＣＣｌ＿４所致的三种肝损伤中也有细胞角蛋白（ＣＫ）异常表达肝细胞。（１）在局部肝冻伤及奶油黄性肝损伤中表明不伴脂肪变性的肝细胞坏死不能直接引起肝细胞ＣＫ表达的改变;（２）在奶油黄性肝损伤中显示了卵圆细胞对肝细胞ＣＫ异常表达的诱导作用,表明层粘连蛋白（ＬＮ）可能是这种作用的媒介;（３）在ＣＣｌ＿４致慢性肝损伤中表明肝细胞ＣＫ异常表达和ＬＮ异常沉积无论在位相上还是在时相上都一致,提出肝小叶结构破坏可能也是通过ＬＮ异常沉积而影响肝细胞的ＣＫ表达;（４）应用电镜及免疫电镜技术表明ＣＣｌ＿４性肝损伤中肝细胞中间丝细胞骨架结构的改变伴随着ＣＫ１９阳性抗原决定簇的出现;（５）设计了一种局部肝冻伤模型,利用这种模型表明,ＣＫ１９阳性肝细胞在肝小叶结构完整性遭到破坏且伴纤维组织增生时出现,随小叶结构的恢复而消失。这是对关于肝细胞ＣＫ异常表达是肝小叶结构修复过程中局部肝细胞的修复性反应这一假说的有力支持。讨论了这种改变的意义。     

血清CEA、CA211水平与晚期非小细胞肺癌靶向治疗患者疗效、预后的关系及其诊断价值分析

目的:探讨血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CA211)水平与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)靶向治疗患者疗效、预后的关系,并分析其对治疗有效性的诊断价值。方法:选取2013年6月到2017年8月期间在广西医科大学附属肿瘤医院接受治疗的晚期NSCLC患者90例,所有患者均采用盐酸厄洛替尼片进行治疗。记录所有患者治疗后的临床疗效,根据治疗效果将患者分为有效组和无效组,比较不同治疗效果患者的血清CEA、CA211水平,分析血清CEA、CA211水平与患者无进展生存期(PFS)的关系,并分析患者血清CEA、CA211单独检测和联合检测对治疗有效性的诊断价值。结果:靶向治疗后,90例晚期NSCLC患者的总有效率为44.44%。治疗后,有效组的血清CEA、CA211水平明显低于治疗前,无效组的血清CEA、CA211水平明显高于治疗前(P0.05),有效组的血清CEA、CA211水平明显低于无效组(P0.05)。CEA15 ng/mL的患者PFS明显短于CEA15 ng/mL的患者(P0.05),CA211≥5 ng/mL的患者PFS明显短于CA2115 ng/mL的患者(P0.05),血清CEA、CA211联合检测的敏感度高于CEA、CA211单独检测(P0.05)。结论:CEA和CA211水平与晚期NSCLC靶向治疗患者疗效、预后有关,且血清CEA、CA211联合检测可提高靶向治疗效果评价的敏感度。     

小鼠超高硫角蛋白基因启动子的克隆及其表达活性分析

目的筛选在小鼠毛囊中具有高表达活性的内源启动子,为建立小鼠被毛特异表达外源蛋白的转基因技术奠定基础。方法以小鼠基因组为模板,克隆得到超高硫角蛋白基因启动子超高硫角蛋白(UHS),将其分别与pβgal-Basic和pAcGFP1-N1载体连接,构建了重组真核表达载体。采用阳离子脂质体法转染胎鼠组织块,分析其表达活性。结果转染后48 h,在蓝光激发条件下可以检测到绿色荧光蛋白(GFP)在小鼠毛囊区高表达,转染96 h后,表达减弱;此外,转染后48 h,βgal染色结果显示在皮肤块的毛囊区存在蓝色点状区域。结论 UHS启动子在小鼠毛囊中具有表达特异性。