昆虫抗菌肽研究和应用现状

昆虫在受到刺激或感染之后,在其血淋巴中会产生一种抗菌类物质,称抗菌肽。抗菌肽具有分子小、稳定性好、广谱抗菌、无毒副作用等特点,在农业、医药、食品等领域有广泛的应用前景。简要综述了昆虫抗菌肽的基础研究和应用现状。     

三叶木通花粉前纤维蛋白基因的克隆与表达

以三叶木通花蕾为材料,采用RT-PCR、3-′RACE方法克隆了三叶木通花粉前纤维蛋白基因,命名为Atf-Pro(GenBank登录号GQ478584)。结果表明:AtfPro的cDNA全长735 bp、阅读框393 bp、编码131个氨基酸,有1个342 bp的3′端非翻译区。预测分子量约为14.081 kD,等电点4.74。氨基酸和核苷酸序列的同源性分析发现,AtfPro基因属于植物花粉profilin基因家族的新成员。RT-PCR定性分析表明,AtfPro基因在三叶木通花蕾、花药、雌花花瓣和柱头组织中均有表达,但在幼叶、茎尖、根尖组织中低水平表达或不表达,生殖器官中的表达时期从花序分化发育开始到开花散粉结束。     

诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达

2007年7月至11月,中国开产前后的商品海兰褐蛋鸡群大面积暴发血管瘤,造成巨大经济损失。将病料接种DF1细胞,通过PCR和间接免疫荧光(IFA)确定此次暴发的血管瘤为J亚群白血病病毒(ALV-J)感染引起。从患病鸡群中分离到5株ALV-J(前4株已经报道),将第5株病毒命名为WS0705。为研究该毒株抗原性的特点,用PCR方法扩增出gp85基因,并克隆进pMD18-T载体进行测序。氨基酸系统进化树分析显示WS0705与英国ALV-J原型毒株HPRS-103同源性最高。从已构建的质粒pMD18-T-WS0705gp85中酶切回收gp85基因,构建重组转移载体pFastBacH Tb-WS0705gp85。利用Bac-to-Bac表达系统获得了重组杆状病毒rBac-WS0705gp85。间接免疫荧光和Western blot检测WS0705gp85基因的表达产物。间接免疫荧光显示,构建的重组杆状病毒感染的Sf9细胞呈现明显的强阳性反应;Western blot分析,重组病毒感染的Sf9细胞蛋白显示出约35kD的阳性条带。结果表明,WS0705gp85基因在Sf9细胞中得到良好的表达,并且其编码产物完全可以被外源性ALV-J的特异性单抗JE9识别,进一步证明本次暴发血管瘤的病原为ALV-J,并为进一步开发ALV-J相关诊断产品奠定了基础。     

乌司他丁联合血必净治疗重症脓毒症的研究

目的：评估乌司他丁联合血必净注射液治疗重症脓毒症的临床疗效。方法：将符合入选标准的脓毒症患者40例,按照随机分组原则分为观察组和对照组,每组20例。所有患者给予常规抗感染治疗（根据培养结果给予敏感抗生素）和必要的对症支持治疗。观察组患者加用血必净注射液50ml静脉滴注,1次／12h,乌司他丁60万u静脉滴注,1次／12h,连用7d。记录治疗前后所有患者的体温、脉搏、呼吸、血白细胞（W33C）、降钙素原（PCT）、c反应蛋白（CRP）、急性生理学与慢性健康状况评分（APACHEII）、7天病死率。结果：疗程结束时观察组脉搏、呼吸、WBC、PCT、CRP、APACHEII评分、7天病死率均较治疗前明显下降,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：血必净注射液联合乌司他丁对重症脓毒症有明确疗效,改善临床症状,降低病死率。     

射血分数正常性心力衰竭的预后研究--- 附三年随访结果分析

目的:评价射血分数(EF)正常性心力衰竭患者的流行病学特点及其3年预后,并与EF降低性心力衰竭患者进行比较.方法:选择2005-1至2006-12二所三甲医院心内科收治的461例慢性心衰患者,根据入院时左室EF分为EF正常组(EF＞=50%)和EF降低组(EF＜50%),进行为期3年的电话随访;终点事件包括全因死亡、心衰加重再住院.结果:慢性心衰患者中EF正常234例(50.7%),与EF下降患者比较,这类患者中较为高龄、多为女性;病因多为瓣膜病、高血压病及房颤;随访结果显示二组患者的终点事件发生率并无明显差异(P=0.578),Cox回归分析对其它因素校正后发现,房颤(RR=1.301,95%CI:0.995-1.701,P＜0.05)、年龄(RR=1.012,95%CI:1.003-1.022,P＜0.05)是影响慢性心衰患者3年预后的主要因素.结论:在慢性心衰中,EF正常的患者预后与EF下降者相似,对这类病人同样应加强监测及治疗.     

骨钙素减轻糖尿病大鼠血- 视网膜屏障的损伤

目的:研究骨钙素(Osteocalcin)对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血-视网膜屏障的影响。方法:取健康SD大鼠24只,随机分为正常对照组、糖尿病1月(DM1)组、糖尿病骨钙素干预(DM1+OCGY)组。尾静脉注射STZ建立DM模型,成模后DM1+OCGY组腹腔注射骨钙素(2.57 mg.kg-.1d-1),DM1组腹腔注射等量生理盐水,1个月后处死动物。用伊文思蓝方法检测大鼠血-视网膜屏障的改变。结果:造模1月后大鼠视网膜血管渗透性显著增加,共聚焦显微镜显示红色荧光斑点主要分布在视网膜血管周围,给予骨钙素后,红色荧光斑点明显减少,进一步定量显示1M糖尿病大鼠视网膜伊文思蓝含量为57.4±8.7μg.g-1,骨钙素能够改变这种变化,DM1+OCGY组伊文思蓝含量为26.1±3.8μg.g-1。结论:骨钙素能抑制糖尿病视网膜病的血管渗漏,对糖尿病引起的血-视网膜屏障破坏有保护作用。     

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血液系统或可自行防御外来纳米物质 中科院纳米安全性重点实验室的研究人员在研究碳纳米管与赢液系统相互作用过程与其毒理学效臆机制时发现,当碳纳米管进入含有人血液货白的溶液中时,血L液中的主要蛋白（如纤维蛋白原、免疫球蛋白等）会在碳纳米管的表面进行竞争性吸附,形成不同外彤的所谓“王冠”形状的蛋白——碳管复合物。     

229例血培养阳性结果分析

目的研究血液感染的微生物种类分布及病因。方法5 m l血标本在优快双相血培养瓶内于恒温(35±1)℃培养箱孵育,分离阳性标本菌落,采用“第2代15 e系统”进行细菌鉴定,并做药敏试验。结果2 310例血培养标本共分离出229株细菌,其中革兰阴性菌198株占86.46%,革兰阳性菌27株占11.79%,真菌4株占1.74%,阳性率从高到低为甲副伤寒菌、大肠埃希菌、洋葱假单胞菌、产碱杆菌属、金黄色葡萄球菌,分别是55.89%、6.55%、5.24%、3.93%、2.62%。沙门菌占65.06%,分离自感染内科及门、急诊科,大肠埃希菌主要见于感染内科及内分泌科,常见菌阳性标本在孵育<24、24~48、48~76、≥76 h的阳性率依次为5.29%、46.47%、85.88%、99.40%。结论血液感染病原菌在沿海地区以沙门菌属尤其以甲副伤寒菌为主,其次为非发酵菌和葡萄球菌。快速血培养技术仍是血液感染病原学诊断的必要手段。     

培菲康对肝硬化患者内毒素、血氨水平以及数字连接试验的影响

目的观察培菲康对肝硬化伴肝性脑病患者的内毒素、血氨水平以及联字试验的影响。方法肝硬化患者服用培菲康每次2粒,1日3次,疗程为4周。采用血氨测定仪、鲎试剂法及数字连接试验分别测定血氨水平、血浆内毒素水平及数字连接所需时间。结果与培菲康治疗前相比,肝硬化患者血浆内毒素水平显著降低(0.13±0.04 vs 0.27±0.17,EU/m l,P<0.01);血氨水平显著降低(1.36±1.21 vs 2.14±1.82,ng/L,P<0.001);数字连接试验所需时间显著缩短(58±32 vs 101±30,s,P<0.001)。结论微生态制剂(培菲康)可有效防治肝硬化患者肝性脑病及内毒素血症。     

两种动物血巧克力平板分离流感嗜血杆菌效果评价

目的比较羊血、马血巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率和生长情况。方法将送检的痰标本及流感嗜血杆菌标准菌株ATCC10211分别接种于羊血、马血巧克力平板上,置烛缸中,36气培养24h,比较流感嗜血杆菌检出率及其生长情况。结果（1）2种巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率分别为8％、34．5％。（2）标准菌株ATCC10211在马血巧克力平板上生长良好,菌落直径0．5-1．0mm,而在羊血巧克力平板上生长差,菌落大小如“沙粒”,肉眼难见。结论痰培养流感嗜血杆菌使用马血巧克力平板效果优于羊血巧克力平板。