反义c-myc重组腺病毒载体的构建及其对大鼠胸腺淋巴细胞的增殖抑制作用

目的:观察反义c-myc重组腺病毒载体对大鼠胸腺淋巴细胞的增殖抑制作用.方法:构建大鼠反义及正义c-myc细菌质粒,并将所得细菌质粒与E1缺失腺病毒质粒导入293细胞系,经共转染得到正义及反义重组腺病毒载体.MTS法检测重组腺病毒载体对大鼠淋巴细胞增殖的抑制作用,RT-PCR检测重组腺病毒载体对c-myc mR-NA表达的影响.结果:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠淋巴细胞增殖,降低淋巴细胞c-myc mRNA的表达.结论:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠淋巴细胞增殖.     

The role of apoptosis in the development and function of T lymphocytes

Apoptosis plays an essential role in T cell biology. Thymocytes expressing nonfunctional or autoreactive TCRs are eliminated by apoptosis during development. Apoptosis also leads to the deletion of expanded effector T cells during immune responses. The dysregulation of apoptosis in the immune system results in autoimmunity, tumorogenesis and immunodeficiency. Two major pathways lead to apoptosis： the intrinsic cell death pathway controlled by Bcl-2 family members and the extrinsic cell death pathway controlled by death receptor signaling. These two pathways work together to regulate T lymphocyte development and function.     

Generation and characterization of C305, a murine neutralizing scFv antibody that can inhibit BLyS binding to its receptor BCMA

B-lymphocyte stimulator (BLyS) is a member of the tumor necrosis factor (TNF) family and a key regulator of B cell response. Neutralizing single-chain fragment variable (scFv) antibody against BLyS binding to its receptor BCMA has the potential to play a prominent role in autoimmune disease therapy. A phage display scFv library constructed on pill protein of MI 3 filamentous phage was screened using BLyS.After five rounds of panning, their binding activity was characterized by phage-ELISA. Nucleotide sequencing revealed that at least two different scFv gene fragments (C305 and D416) were obtained. The two different scFv gene fragments were expressed to obtain the soluble scFv antibodies, then the soluble scFv antibodies were characterized by means of competitive ELISA and in vitro neutralization assay. The results indicated that C305 is the neutralizing scFv antibody that can inhibit BLyS binding to its receptor BCMA.     

229例血培养阳性结果分析

目的研究血液感染的微生物种类分布及病因。方法5 m l血标本在优快双相血培养瓶内于恒温(35±1)℃培养箱孵育,分离阳性标本菌落,采用“第2代15 e系统”进行细菌鉴定,并做药敏试验。结果2 310例血培养标本共分离出229株细菌,其中革兰阴性菌198株占86.46%,革兰阳性菌27株占11.79%,真菌4株占1.74%,阳性率从高到低为甲副伤寒菌、大肠埃希菌、洋葱假单胞菌、产碱杆菌属、金黄色葡萄球菌,分别是55.89%、6.55%、5.24%、3.93%、2.62%。沙门菌占65.06%,分离自感染内科及门、急诊科,大肠埃希菌主要见于感染内科及内分泌科,常见菌阳性标本在孵育<24、24~48、48~76、≥76 h的阳性率依次为5.29%、46.47%、85.88%、99.40%。结论血液感染病原菌在沿海地区以沙门菌属尤其以甲副伤寒菌为主,其次为非发酵菌和葡萄球菌。快速血培养技术仍是血液感染病原学诊断的必要手段。     

培菲康对肝硬化患者内毒素、血氨水平以及数字连接试验的影响

目的观察培菲康对肝硬化伴肝性脑病患者的内毒素、血氨水平以及联字试验的影响。方法肝硬化患者服用培菲康每次2粒,1日3次,疗程为4周。采用血氨测定仪、鲎试剂法及数字连接试验分别测定血氨水平、血浆内毒素水平及数字连接所需时间。结果与培菲康治疗前相比,肝硬化患者血浆内毒素水平显著降低(0.13±0.04 vs 0.27±0.17,EU/m l,P<0.01);血氨水平显著降低(1.36±1.21 vs 2.14±1.82,ng/L,P<0.001);数字连接试验所需时间显著缩短(58±32 vs 101±30,s,P<0.001)。结论微生态制剂(培菲康)可有效防治肝硬化患者肝性脑病及内毒素血症。     

体内致敏的树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的基础研究

目的证实树突状细胞（dendritic cells,DC）可在体内通过吞噬凋亡肿瘤细胞获取抗原物质,探讨其在肿瘤免疫治疗中的意义.方法以615小鼠的前胃癌细胞株造模,在体外用rmGM-CSF和rmIL-4从荷瘤小鼠骨髓细胞分化、诱导未成熟树突状细胞.分为4组：小剂量化疗组、树突状细胞组、小剂量化疗＋树突状细胞组和对照组,以BAX试剂盒检测肿瘤细胞凋亡.在瘤体内注射树突状细胞,观察给药侧瘤体及对侧瘤体体积,生存期,和特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）对肿瘤细胞的特异性杀伤作用.结果小剂量化疗能诱导肿瘤细胞凋亡.小剂量化疗后瘤内应用树突状细胞,给药侧瘤体及对侧瘤体体积明显缩小（P＜0.05）,小鼠的生存率提高,体内凋亡肿瘤细胞致敏的DC诱导的CTL对MFC有显著的杀伤作用,在效靶比为40：1、20：1、10：1和5：1时72 h的杀伤率分别为87.64%、70.32%、34.63%和13.87%.并能特异性杀伤小鼠前胃癌细胞MFC（P＜0.01）.结论体外诱导分化的未成熟DC,能于体内捕获小剂量化疗诱导的凋亡肿瘤细胞所携带的肿瘤抗原,诱导机体特异性抗肿瘤免疫反应.     

两种动物血巧克力平板分离流感嗜血杆菌效果评价

目的比较羊血、马血巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率和生长情况。方法将送检的痰标本及流感嗜血杆菌标准菌株ATCC10211分别接种于羊血、马血巧克力平板上,置烛缸中,36气培养24h,比较流感嗜血杆菌检出率及其生长情况。结果（1）2种巧克力平板痰培养流感嗜血杆菌的检出率分别为8％、34．5％。（2）标准菌株ATCC10211在马血巧克力平板上生长良好,菌落直径0．5-1．0mm,而在羊血巧克力平板上生长差,菌落大小如“沙粒”,肉眼难见。结论痰培养流感嗜血杆菌使用马血巧克力平板效果优于羊血巧克力平板。     

淋巴细胞的凋亡和调控

免疫系统中,细胞凋亡调节着体内免疫细胞群的合适比例,制约免疫应答的过程及强度,决定免疫耐受和免疫记忆的产生。本文将综述细胞凋亡在淋巴细胞发育中的作用,淋巴细胞凋亡的途径及调控因素。     

二硝基氟苯修饰的黑色素瘤细胞激活树突状细胞诱导特异性T细胞反应

目的:探索半抗原二硝基氟苯(DNP)修饰的恶性黑色素瘤细胞(恶黑)激活树突状细胞(DC)后,在体外诱导特异性T细胞反应的抗肿瘤效应。方法:采用DNP修饰恶黑细胞M3(H-2d),然后在体外激活BALB/c小鼠(H-2d)外周血来源的DC,用于激发自体的T细胞,观察对T细胞的增殖和特异性T细胞的杀伤功能。结果:经DNP修饰的M3细胞激活的DC,其诱发的T细胞增殖能力和对M3细胞的特异性杀伤效应均明显高于未修饰的M3细胞组和DC组。结论:DNP修饰M3所激活的DC可以诱导更强的恶黑特异性T细胞效应。     

急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药性的双向电泳分析

目的:研究急性早幼粒细胞白血病(APL)对全反式维甲酸(ATRA)治疗敏感和耐药患者的外周血淋巴细胞在蛋白质组水平上的差异。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)对敏感和耐药患者的外周血淋巴细胞进行蛋白质组差异分析。结果:ATRA敏感和耐药患者外周血淋巴细胞的2-DE平均蛋白质点分别为(746±57)和(617±41),敏感与耐药患者的2-DE相比,有16个蛋白点表达明显上调,22个明显下调。另有4个蛋白点(Mr/pI:24.6kD/8.05,32.3kD/5.17,22.3kD/6.51,25.1kD/7.09)在敏感患者中特异表达,5个蛋白点(Mr/pI:21.9kD/5.45,23.4kD/6.27,22.9kD/6.65,23.9kD/7.39,24.7kD/7.65)在耐药患者中特异表达。结论:结果提示这些差异表达的蛋白质可能与APL对ATRA耐药的机制有关,该研究有助于揭示APL对ATRA耐药机理和发现新的临床分子标志物。