植物病毒检测芯片的杂交条件优化

利用芯片点样仪将5种侵染马铃薯的病毒/类病毒(苜蓿花叶病毒、黄瓜花叶病毒、黄瓜花叶病毒-卫星病毒、马铃薯病毒Y、马铃薯块茎纺锤状类病毒)的保守区寡核苷酸(Oligonucleotide,oligo)探针和PCR探针点样于玻片,并以植物18S rRNA作为内参照制成基因芯片。研究探针浓度、杂交时间、杂交温度以及点样液对芯片杂交的影响,并验证优化后病毒检测芯片的特异性。结果表明,寡核苷酸探针浓度介于5-20 ?mol/L之间对杂交信号强度影响不大,PCR探针浓度与杂交信号强度间呈线性关系;在45℃杂交4 h时,芯片的杂交信号最强,且该条件下进行杂交对两种探针芯片的影响趋势一致;点样液中以DMSO的杂交效果最好。经过整体条件优化后的两种探针芯片在杂交检测上具有较高的特异性,适于检测植物病毒。     

人巨细胞病毒检测技术研究进展

人巨细胞病毒（HCMV）严重危害人类生殖健康和优生优育。仅据临床表现不能对其进行确诊,生物技术的发展为早期、快速和准确检测,对及时治疗极为重要,文章从病毒形态学、免疫学以及分子生物学角度总结综述了HCMV检测技术的发展、应用及各自特点。     

Highly sensitive fluorescent-labeled probes and glass slide hybridization for the detection of plant RNA viruses and a viroid

In this study, a modified method of the conventional RNA dot-blot hybridization was established, by replacing ~(32)p labels with CY5 labels and replacing nylon membranes with positive-charged glass slides, for detecting plant RNA viruses and a viroid. The modified RNA dot-blot hybridization method was named glass slide hybridization. The optimum efficiency of RNA binding onto the surfaces of activated glass slide was achieved using aminosilane-coated glass slide as a solid matrix and 5×saline sodium citrate (SSC) as a spotting solution. Using a CY5-labeled DNA probe prepared through PCR amplification, the optimized glass slide hybridization could detect as little as 1.71 pg of tobacco mosaic virus (TMV) RNA. The sensitivity of the modified method was four times that of dot-blot hybridization on nylon membrane with a ~(32)P-labeled probe. The absence of false positive within the genus Potyvirus [potato virus A, potato virus Y (PVY) and zucchini yellow mosaic virus] showed that this method was highly specific. Furthermore, potato spindle tuber viroid (PSTVd) was also detected specifically. A test of 40 field potato samples showed that this method was equivalent to the conventional dot-blot hybridization for detecting PVY and PSTVd. To our knowledge, this is the first report of using dot-blot hybridization on glass slides with fluorescent-labeled probes for detecting plant RNA viruses and a viroid.     

乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达

目的:克隆编码人Ⅰ类乙醇脱氢酶基因,并探讨Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中的作用。方法:从胎儿肝,肾提取的总RNA;经RT-PCR扩增得到cDNA并克隆至pGEM-T载体。cDNA序列用Kpn I和Pst I酶切鉴定,并检测其在大肠杆菌中表达活性。通过吸光法检测酶的活性。结果:成功克隆了人Ⅰ类乙醇脱氢酶并在大肠杆菌中获得稳定表达。经检测其酶活性分别为0．81～1．31U/mg、0．09～0．15U/mg和0．76～1．11U/mg。结论:cDNA克隆成功,并发现其与肝脏中分离的酶具有相似的活性。     

宫颈电环切除术治疗76例子宫颈上皮内瘤样病变的分析

目的:探讨子宫颈电环切除术(LEEP)治疗子宫颈上皮内瘤样病变(CIN)的价值。方法:回顾性分析2004年10月至2006年9月收治的76例CIN患者行LEEP术治疗情况。结果:本研究的CIN 76例中CIN-Ⅰ37例,CIN-Ⅱ7例、CIN-Ⅲ2例,cIN-Ⅰ-Ⅱ21例,CIN-Ⅱ-Ⅲ9例。76例CIN患者行LEEP术治疗后最长的随访2年,最短的三个月。术后三个月新柏氏膜式液基层细胞学检测(Thin-prep Cytolosy Test,TCT)正常者76例(100%),人乳头瘤状病毒(HPV)转阴者75例(98.68%),阴道镜检查正常者74例(97.37%)。本组治愈率为98.68%,复发率为0例。结论:LEEP术治疗CIN具有以下优点:①安全、快捷又出血量少;②手术时间短,可在门诊进行手术;③可达到传统电刀达不到的非常精细的手术效果;④不易产生传统电刀切割时组织被拉长、碳化现象,可以得到不影响病理检查的完好的组织标本,对临近组织损伤小,治疗的同时能进行诊断;⑤疼痛少,不易留下瘢痕,感染少;⑥对宫颈损伤小,可以保留生育功能,更适合年轻患者。⑦避免了二次手术和过度治疗。但术后长期的规范随访,早期发现CIN复发及宫颈癌至关重要。     

遗传性蛋白C缺乏症的研究进展

蛋白C(Protein C)是一种维生素K依赖性糖蛋白,它在凝血酶或凝血酶-血栓调节蛋白复合物的作用下转变为活化蛋白C,即APC(activated protein C),APC有灭活Va、VIIIa及增加纤溶的活性,因此具有抗凝作用。蛋白S是蛋白C系统的重要组成部分,蛋白C/S缺乏是由编码蛋白C/S的基因突变或多态性引起的常染色体遗传性疾病,易产生深静脉血栓,特点是首次发生血栓的年龄小,血栓发生次数多,且静脉血栓形成易造成肺栓塞,所以当临床上遇到有上述特点的静脉血栓患者时,应进行血浆蛋白C系统检测,近年来随着分子生物技术的发展,对遗传性蛋白C/S基因的基因突变和基因多态性研究进入了一个新的阶段。治疗上无临床症状的PC缺乏症者无需治疗,在术前或分娩前的抗栓治疗中,可输注PC浓缩剂、新鲜血浆、凝血酶原复合物或肝素,血栓形成时需做溶栓治疗。     

中药固体制剂溶出度研究与展望

随着中药质量控制水平的提高,许多化学药品的控制方法和控制理念在中药质量控制中得到广泛的应用,固体制剂溶出度试验就是化学药品控制中的一种重要方法。溶出度试验不仅是中药固体制剂质量控制的核心内容,更是中药制剂控制的一种全新理念。本文主要分析了我国当前阶段中药固体制剂溶出度的研究现状以及如何建立基于生物效价检测的中药固体制剂质控模式,旨在帮助提高我国的中药固体制剂溶出度的试验水平和质控质量。     

超敏C反应蛋白及D-二聚体联合检测深静脉血栓的价值

目的:探讨超敏C反应蛋白及D-二聚体联合检测法在深静脉血栓诊断中的临床应用。方法:选取我院检验科收治的深静脉血栓患者120例作为实验对象,所有患者均采取深静脉造影进行确诊。采用随机对照表分为实验1组与实验2组与实验3组,每组40例患者。另选取门诊健康体检患者41例为对照组,所有患者均空腹状态下于入院第一天清晨抽取静脉血5 m L,对实验1组进行CRP检测,对实验2组行D-二聚体检测检测,实验3组行CRP检测联合D-二聚体检测。比较4组患者的血超敏C反应蛋白与D-二聚体水平,以及联合检测的阳性率。结果:1实验组患者CRP水平以及D-二聚体水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);实验1组与实验3组CRP水平比较,没有统计学差异(P0.05);实验2组与实验3组D-二聚体水平比较,无统计学差异(P0.05);2与实验3组比较,实验1组、实验2组阳性检出率较低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:超敏C反应蛋白及D-二聚体水平对深静脉血栓具有较好的敏感性,联合检测能够对本病的诊断及预后具有指导意义,值得临床推广。     

血液检测中白细胞下降的病因及对飞行学员的影响

白细胞是血液中体具有保护和防御作用的有核血细胞。根据其免疫功能不同分为吞噬细胞和免疫细胞。吞噬细胞具有非特异性的免疫功能,能够吞噬各种异物,包括粒细胞和单核细胞两种。免疫细胞具有特异性的免疫功能,参与体液性和细胞性免疫,即淋巴细胞[1]。虽然白细胞的形态结构和生理功能多样化,但是彼此在机体的防护、免疫和创伤愈治过程中起协同作用,而不是相互孤立。     

产业动向

<正>中关村将大力扶持生物医药创业近日,北京市出台《关于加快推进中关村生物医药医疗器械及相关产业发展的若干意见》,提出未来5年中关村医疗创业规划,将扶持生物医药、医疗器械,互联网医疗等产业发展目标,预期产业总收入超过1万亿元。中关村生物医药产业将主要涉及八大重点方向,包括生物制药、新型药物制剂、中医药现代化、高端医疗器