羰基化蛋白质组学研究规律运动调控大鼠脑纹状体细胞凋亡的作用与适应性机制

为研究探讨规律运动对老年大鼠纹状体蛋白质氧化应激与细胞凋亡的影响,通过差异羰基化蛋白质组学特征分析,筛选靶标蛋白质并阐明其作用机制.将24只健康雄性23月龄老年大鼠随机分为静息组(Con-SED)和规律运动组(Aero-EXE).采用运动强度相当于最大摄氧量(VO2max)60％～65％逐渐递增到70％ ～75％的10...     

右美托咪定上调HIF-1α抑制NLRP3炎性体的激活减轻糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要 目的：探讨右美托咪定（DEX）对糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能分子机制。方法：将60只8周龄的SPF级C57BL小鼠高脂喂养6周,第7周通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）45 mg/kg/天,1次/天,连续5天,建立2型糖尿病模型,建模后采用随机数字表法分为假手术组（sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）抑制剂2ME2组（2ME2组）、DEX组、DEX+2ME2组（DM组）,每组12只。假手术组仅切开皮肤后缝合,其余四组开胸结扎冠状动脉左前降支,缺血60 min后松开结扎线结,再灌注120 min建立缺血再灌注损伤模型。于再灌注120 min时抽取小鼠腹主动脉血,ELISA检测血清肌钙蛋白I（cTnI）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度,随后处死小鼠,分离左心室,HE染色观察心肌组织形态结构,Western blot检测HIF-1α、nod样受体蛋白3（NLRP3）的表达量,再灌注24 h时超声心动图评估心功能。结果：与sham组相比,I/R组、2ME2组、DEX组、DM组cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显升高,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,心肌组织NLRP3表达量显著增加,每搏量（SV）、射血分数（EF）%、短轴缩短率（FS）%明显下降（P＜0.05）;与I/R组相比,DEX组、DM组HIF-1α表达量明显增加,NLRP3表达明显降低,cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显下降,心肌组织结构明显改善,炎性细胞浸润明显减少,SV,EF、FS明显升高（P＜0.05）;与DEX组相比,DM组HIF-1α表达量明显降低,NLRP3表达量明显增加,cTnI、IL-1β、TNF-α浓度明显增加,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,SV,EF、FS明显降低（P＜0.05）。结论：DEX可能通过上调心肌组织HIF-1α的表达,抑制NLRP3炎性体的激活,减轻心脏炎症反应,改善糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤。     

呼气末二氧化碳分压、C-反应蛋白/白蛋白比值及综合脱机指数对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败的预测价值

摘要 目的：探讨呼气末二氧化碳分压（PetCO₂）、C-反应蛋白/白蛋白比值（CRP/Alb）及综合脱机指数（IWI）对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败的预测价值。方法：选择2020年1月至2022年6月在安徽中医药大学附属六安医院进行机械通气的重型颅脑损伤患者96例作为研究对象,按照撤机结局分为撤机失败组（n=31）和撤机成功组（n=65）。比较两组撤机前PetCO₂、CRP/Alb、IWI及临床参数。应用多因素Logistic回归分析重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败的危险因素。应用受试者工作特征（ROC）曲线评价PetCO₂、CRP/Alb、IWI对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败的预测价值。结果：撤机失败组PetCO₂、CRP/Alb、急性生理功能和慢性健康状况评分系统II（APACHE II）评分显著高于撤机成功组,机械通气时间长于撤机成功组,IWI、格拉斯哥昏迷评分（GCS）显著低于撤机成功组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,PetCO₂≥37.01 mmHg、CRP/Alb≥0.97、IWI≤78.23、GCS≤5.90分、APACHE II评分≥26.17分、机械通气时间≥4.49 d是重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败的危险因素（P<0.05）。ROC曲线分析结果显示PetCO₂、CRP/Alb、IWI、GCS、APACHE II对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败均有较高的敏感度、特异度, PetCO₂、CRP/Alb、IWI三项联合检测对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败预测的曲线下面积（AUC）高于PetCO₂、CRP/Alb、IWI、GCS、APACHE II单独检测。结论：PetCO₂、CRP/Alb及IWI联合评估对重型颅脑损伤机械通气患者撤机失败具有较高的预测价值。     

TMED10对骨关节炎中TGF-β/Smads信号通路的影响

摘要 目的：探究跨膜P24转运蛋白10（TMED10）对骨关节炎中转化生长因子-β（TGF-β）/Smads信号通路的影响。方法：将大鼠软骨细胞分为Control组、IL-1β组、NC-sh+IL-1β组、TMED10-sh+IL-1β组、NC-OE+IL-1β组和TMED10-OE+IL-1β组。Control组和IL-1β组细胞不进行转染处理,NC-sh+IL-1β组、TMED10-sh+IL-1β组、NC-OE+IL-1β组和TMED10-OE+IL-1β组细胞分别转染NC-sh、TMED10-sh、NC-OE和TMED10-OE。转染后,除Control组之外,其他组软骨细胞均用白介素-1β（IL-1β）（10 ng/mL）处理24 h模拟OA软骨细胞的病理微环境。通过MTT法检测细胞增殖,通过TUNEL法检测细胞凋亡。采用前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除法建立OA大鼠模型,将OA大鼠分为OA组、OA+NC-sh组和OA+TMED10-sh组（n=12）,Sham组（n=12）大鼠进行假手术操作。Sham组和OA组大鼠关节腔内注射40 μL生理盐水,OA+NC-sh组和OA+TMED10-sh组大鼠关节腔内分别注射40 μL的NC-sh和TMED10-sh（滴度为1×10⁹ TU/mL）,每周注射1次,共4周。采用番红O/固绿染色法评价膝关节软骨形态,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡。采用RT-qPCR检测软骨细胞和大鼠关节软骨中TMED10的mRNA水平,采用Western blot检测软骨细胞和大鼠关节软骨中TMED10、TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Collagen II和MMP-13的蛋白表达水平。结果：与Control组比较,IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA和TMED10、MMP-13蛋白水平均升高（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均降低（P<0.05）。与IL-1β组和NC-sh+IL-1β组比较,TMED10-sh+IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平和TMED10、MMP-13的蛋白水平均降低（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均升高（P<0.05）。与IL-1β组和NC-OE+IL-1β组比较,TMED10-OE+IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平和TMED10、MMP-13的蛋白水平均升高（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均降低（P<0.05）。与Sham组比较,OA组大鼠的OARSI评分、TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平以及TMED10和MMP-13的蛋白水平均升高（P<0.05）,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II蛋白水平均降低（P<0.05）。与OA组和OA+NC-sh组比较,OA+TMED10-sh组大鼠的OARSI评分、TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平以及TMED10和MMP-13的蛋白水平均降低（P<0.05）,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II蛋白水平均升高（P<0.05）。结论：本研究表明TMED10可能通过抑制TGF-β/Smads信号通路导致软骨细胞丢失和软骨退变,TMED10/TGF-β/Smads信号通路可能是治疗OA的新靶标。     

血管生成素样蛋白4和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能研究

摘要 目的：分析血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6(KL-6)与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能。方法：选择我院自2020年1月至2022年12月收治的120例急性呼吸窘迫综合征患者作为研究对象（观察组）,根据氧合指数（PaO₂/FiO₂）分为轻度组、中度组和重度组;另选120例非急性呼吸窘迫综合征患者作为对照组。检测所有患者血清ANGPTL4和KL-6的表达水平,分析血清ANGPTL4和KL-6与APACHE Ⅱ评分、PaO₂/FiO₂的关系,使用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价血清ANGPTL4联合KL-6对急性呼吸窘迫综合征预后的评估效能。结果：对比对照组,观察组血清ANGPTL4、KL-6的表达水平均明显升高（P＜0.05）;血清ANGPTL4、KL-6的表达水平在轻度组、中度组和重度组中差异有统计学意义,且急性呼吸窘迫综合征越严重,升高越明显（P＜0.05）;经Pearson相关性分析,急性呼吸窘迫综合征患者血清ANGPTL4、KL-6的表达水平与PaO₂/FiO₂呈负相关,与APACHE Ⅱ评分呈正相关（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清ANGPTL4联合KL-6预测急性呼吸窘迫综合征患者入院28d内死亡的敏感度为90.14%、特异度为65.74%,AUC为0.900。结论：血清ANGPTL4、KL-6表达水平升高与急性呼吸窘迫综合征严重程度增大密切相关,两者联合在患者预后评估中具有一定价值,可作为判断病情及预后的辅助指标。     

Wnt通路中蓬松蛋白DNA甲基化对骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化影响

摘要 目的：探讨蓬松蛋白（DVL）DNA甲基化对骨质疏松（OP）患者骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化及Wnt通路的影响。方法：分离、培养OP患者的BMSCs,成骨诱导培养BMSCs 0、7、14、21天,观察BMSCs细胞形态变化,检测碱性磷酸酶（ALP）染色及活性,检测茜素红染色及钙结节形成,荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）及免疫印迹检测远端缺失同源盒5（Dlx5）、核心结合蛋白因子2（Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（OSX）、Ⅰ型胶原蛋白（Colla Ⅰ）表达。检测DVL1、Wnt、糖原合成酶激酶3（GSK3）、β连环蛋白（β-catenin）表达及DVL DNA甲基化水平。在成骨诱导培养基中加入甲基转移酶抑制剂5-Aza,将BMSCs分为对照组（Control组）、甲基转移酶抑制剂组（5-Aza组）、甲基转移酶抑制剂+si-NC组（5-Aza+si-NC组）、甲基转移酶抑制剂+si-Wnt组（5-Aza+si-Wnt组）,依次进行ALP活性测定,茜素红染色及钙结节形成测定。RT-PCR检测Dlx5、Runx2、OSX、Colla 1水平,免疫印迹检测Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ、DVL1、Wnt、GSK3、β-catenin的蛋白表达量,并检测DVL DNA甲基化水平。结果：成骨诱导后BMSCs具有强的ALP活性和矿化结节生成能力,且随着培养时间的增长,BMSCs细胞ALP活性和矿化结节生成能力增强,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA水平和Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达升高,DVL DNA甲基化水平降低（P＜0.05）。5-Aza组较Control组ALP染色加深,活性增强,钙结节形成增多（P＜0.05）,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA及蛋白表达、Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达升高,DVL DNA甲基化水平降低（P＜0.05）。5-Aza+si-Wnt组较5-Aza+si-NC组ALP染色变浅,活性降低,钙结节形成减少（P＜0.05）,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA及蛋白表达、Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达降低,DVL DNA甲基化水平升高（P＜0.05）。结论：DVL DNA甲基化可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制OP患者BMSCs成骨分化。     

血清FKN、APC与老年社区获得性肺炎患者病情和预后不良的关系

摘要 目的：探讨血清分形趋化因子（FKN）、活化蛋白C（APC）与老年社区获得性肺炎（CAP）患者病情和预后不良的关系。方法：选取2020年1月～2023年1月潍坊市人民医院收治的314例老年CAP患者为CAP组,根据病情程度分为低危组104例、中危组123例、高危组87例,根据入院30d生存状况分为死亡组65例和存活组249例,另选取同期100名体检健康老年人为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清FKN、APC水平。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清FKN、APC水平对老年CAP患者预后不良的预测价值。通过多因素Logistic回归分析老年CAP患者预后不良的影响因素。结果：与对照组比较,CAP组血清FKN水平升高,APC水平降低（P＜0.05）。低危组、中危组、高危组老年CAP患者血清FKN水平依次升高,APC水平依次降低（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,病情高危、机械通气和C反应蛋白（CRP）、FKN升高为老年CAP患者预后不良的独立危险因素,APC升高为其独立保护因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,FKN、APC水平单独和联合预测老年CAP患者预后不良的曲线下面积分别为0.783、0.789、0.870,二者联合对老年CAP患者预后不良的预测价值大于各指标单独预测。结论：血清FKN水平升高和APC水平降低参与着老年CAP患者病情进展,血清FKN联合APC能较好地预测老年CAP患者预后不良。     

龈沟液炎性因子及TSP-1在拔牙正畸患者中的表达情况及发生牙周疾病的影响因素分析

摘要 目的：探讨龈沟液炎性因子及TSP-1在拔牙正畸患者中的表达情况及发生牙周疾病的影响因素。方法：选取我院2020年8月到2023年8月收治的80例拔牙正畸治疗患者进行回顾性分析,分别取所有患者正畸前、正畸后1个月、3个月及正畸结束时的龈沟液样本检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、血小板反应蛋白-1（TSP-1）表达水平。随后依照患者正畸治疗过程中是否患有牙周疾病将其分为牙周疾病组（n=36）及非牙周疾病组（n=44）,对比两组患者正畸前及正畸结束时的TNF-α、IL-1β、IL-6、TSP-1表达水平,对比两组患者一般情况,采用logistics回归模型分析拔牙正畸患者牙周疾病的影响因素。结果：80例拔牙正畸患者中正畸后1个月、3个月 TNF-α、IL-1α、IL-6、TSP-1水平升高,正畸后3个月到正畸结束时TNF-α、IL-1β、IL-6、TSP-1水平趋于平稳,但正畸后1个月、3个月及结束时明显高于正畸前（P＜0.05）;牙周疾病组与非牙周疾病组患者正畸前、正畸后TNF-α、IL-1β、IL-6、TSP-1表达水平对比差异显著,牙周疾病组明显高于非牙周疾病组（P＜0.05）;牙周疾病组及非牙周疾病组患者性别、年龄、BMI对比无明显差异（P＞0.05）,牙周疾病组及非牙周疾病组患者正畸治疗时间、拔牙数量、正畸方式、口腔清洁度对比差异显著（P＜0.05）;logistic回归分析结果表明：TNF-α、IL-1β、IL-6、TSP-1、正畸方式、口腔清洁度为拔牙正畸患者牙周疾病的独立危险因素（P＜0.05）。结论：拔牙正畸患者随着正畸时间延长龈沟液炎性因子及TSP-1水平明显升高,且TNF-α、IL-1β、IL-6、TSP-1、正畸方式、口腔清洁度为拔牙正畸患者牙周疾病的独立危险因素。     

知识果味派

机敏小智者:马超一(焦作)砸来的问题:听说泥鳅喜欢钻进泥里,难道它们的食物就是脏兮兮的泥巴?泥鳅喜欢吃泥吗?泥鳅之所以名叫泥鳅,并非因为它爱吃泥,而是因为它喜欢在泥巴里钻来钻去。泥鳅喜欢在有水的稻田、池塘里生活,属于温水性鱼类,适合在10～30摄氏度的水温中生活。由于泥鳅既怕冷、又怕热,所以,当水温高于30摄氏度时,它们就会潜入凉爽的泥巴中度夏;而当水温下降到10摄氏度以下     

蛋白水解酶复合体抑制剂lactacystin对小鼠卵母细胞减数分裂和初次卵裂的作用

为探讨泛素-蛋白水解酶复合体通路(UPP)在小鼠卵母细胞减数分裂和卵裂中的作用, 使用蛋白水解酶复合体特异性抑制剂lactacystin作用于减数分裂不同时期的卵母细胞和受精卵, 结果发现, lactacystin对GVBD的发生无明显影响, 但可明显抑制随后的减数分裂进程, 使极体排放受阻, 引起超排卵母细胞的孤雌激活率下降, 并抑制第一次卵裂. β-tubulin免疫荧光染色显示lactacystin抑制减数分裂微管的组装和纺锤体的形成; 对已进入中期的卵母细胞使用lactacystin, 则对中期纺锤体形态无影响. lactacystin还可使受精卵阻滞于间期或第一次有丝分裂中期. 免疫荧光染色还显示蛋白水解酶复合体催化亚单位PA700在GV期定位在GV及其周围区域, 在中期定位于纺锤体区域. 以上结果表明UPP对小鼠卵母细胞减数分裂和早期卵裂是必需的, 且对减数分裂的作用是多方面的, 在前期与纺锤体的正常形成有关, 而在中期则为染色体的分离和进入后期所必需.