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61.
62.
酿酒酵母与球形红假单胞菌原生质体跨界融合研究 总被引:1,自引:0,他引:1
测定了球形红假单胞菌原核细胞与酿酒酵母真核细胞的原生质体形成、再生及融合最佳组合条件。以溶菌酶EDTA反应系统处理球形红假单胞菌P9479,最适脱壁条件为:溶菌酶浓度0.5mg/ml,EDTA浓度为0.2%,蔗糖浓度20%,酶作用时间为40min;此条件下原生质体形率为78.9%,再生率为11.2%。用蜗牛酶巯基乙醇反应系统处理酿酒酵母Y9407,最适脱壁条件为:蜗牛酶浓度1.0%,巯基乙醇浓度0.1%,蔗糖浓度20%,酶作用时间为30min;此条件下酵母原生质体形成率为99.8%,再生率为9.7%。用聚乙二醇诱导P9479与Y9407的原生质体发生融合,当聚乙二醇的浓度为30%,Ca2+浓度为50mmol/L,pH为6.5,时间为10min时,有最高的融合率为7.6×10-6。 相似文献
63.
酵母属间原生质体融合改进菌株木糖发酵性能 总被引:2,自引:0,他引:2
通过单倍体分离和紫外诱变,获得了14株树干毕赤酵母(Pichiastipitis)7124和酿酒酵母(Sacharomycescerevisiae)1300的营养缺陷型突变株。用聚乙二醇(PEG)和电诱导融合及致死融合等方法,实现了树干毕赤酵母和酿酒酵母的属间原生质体融合。融合子能发酵木糖产生酒精,其厌氧发酵木糖和木糖葡萄糖混合液的能力明显优于亲株,耐酒精的性能也比亲株树干毕赤酵母7124有所提高。融合子经DNA含量、细胞体积测定和稳定性能实验证明为稳定融合子。 相似文献
64.
65.
构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。HA分子有糖化的79kD和非糖化的田kD两种形式;F分子以60kD的前体F0、43kD的F1和18kD的F2三种形式存在。表达产物的血凝效价为1:8,血溶活性OD540的测定结果是O37。该重组病毒免疫新西兰白兔及C57小鼠,可以产生抗麻诊病毒HA和F蛋白的特异性ELISA(1:644~1600)、血凝抑制(1:256~512)、血溶抑制(1:80~160)和NT(1:640)抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应,明显低于只表达IL2的重组痘苗病毒疫苗株RVJ123,表现为兔皮肤红肿范围小,持续时间短,皮肤无坏死;裸鼠毒力的结果,表现出RVJMLHAFKIL2病毒只存留于接种局部,而且滴度大大降低,未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。 相似文献
66.
用单克隆抗体作芜菁花叶病毒不同分离物外壳蛋白抗原结构的比较研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用芜菁花叶病毒辽宁分离物(TuMV-LN),山东分离物(TuMV-SD)和榨菜分离物(TuMV-ZC)作抗原,分别免疫BALB/c小鼠,经脾细胞与SP2/O-Ag14骨髓细胞融合,共获得7个单克隆抗体分泌细胞株,为研究3个分离物的抗原差异,用胰蛋白酶消化TuMV的外壳蛋白(CP)。分别形成4、2和1条降解带,经SDS-15%PAGE后,转移至硝酸纤维薄膜上,用3个分离物的抗血清和7种单隆抗体分别做 相似文献
67.
人抗E.Coli J5噬菌体抗体制备的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以E.Coli J5株对合人Ig基因的噬菌体抗体库进行淘筛富集,免疫印迹筛选,以及ELISA检测,结果获得4株能与E.Coli J5株结合的阳性克隆,且阳性克隆结合抗原的活性可分别被E.Coli J5株、E.Coli Rc-LPS和抗E.Coli J5株核心糖脂域MAb抑制.PCR检测表明,4株阳性克隆均分别带有约660bp大小的重链和轻链基因片段.SDS-PAGE与蛋白质印迹的结果显示,经IPTG诱导的阳性克隆能表达分子量约为50000大小的蛋白,提示该4株阳性克隆能够表达具有一定抗原结合活性的人源Fab片段. 相似文献
68.
69.
人类免疫缺陷病毒1/2型抗体检测酶联免疫试剂盒的研制 总被引:2,自引:0,他引:2
采用二聚体合成肽(HIV-1gp41、gp120、p24和HIV-2gp36)包被酶标板条制备成固相抗原,与鼠抗人IgG单克隆抗体酶标记物、底物TMB及阴阳性参考血清配套制备成HIV抗体EIA试剂盒,专供检测人血清或血浆HIV1/2抗体之用。以荷兰、韩国及万泰试剂作为对照,用该试剂盒对检定所的Panel标准及献血员15550例(其中HCV抗体阳性128例,HBsAg阳性46例)进行检测,四种试剂对检定所Panel标准的13份阳性血清均呈阳性反应,28份阴性血清均为阴性;献血员15550例,四种试剂对其中1份血清均呈阳性反应,经Westernblot试验证实为阴性,四种试剂的阴性检出率均为99.99%。连续制备三批试剂经中国药品生物制品检定所检定,所检项目全部合格;同时委托检定所进行临床考核,47份阳性血清全部呈阳性反应,150份阴性血清全部为阴性。说明该试剂盒具有很好的敏感性和特异性。 相似文献
70.