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121.
将编码人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pEX31A中,在大肠杆菌中表达出MS2/MCP-1融合蛋0白,该表达产物约占菌体总蛋白的15%左右,Westernblot检测表明,表达产物可与MCP-1抗体特异反应。采用琼脂糖平板法进行活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性,说明N端融合一段细菌蛋白对MCP-1有无趋化活性可能没有影响。 相似文献
122.
将油桐尺蠖(Buzurasuppressaria)核多角体病毒晚期基因──多角体蛋白基因启动子及5′端编码区,以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶(CAT)基因上游,使其分别终止在不同翻译终止位点,其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性,最高达200mg/L LB培养基以上,表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达。对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。 相似文献
123.
本实验构建了在大肠杆菌中能表达玉米叶绿体CF1完整β亚基、缺失N端23个氨基酸残基的β亚基以及完整ε亚基的表达质粒。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westernblot实验表明,在分别含这些表达质粒的细菌中β、ε亚基蛋白的合成量在诱导3h后即达到饱和,其含量各占细菌体总蛋白的10%左右。这些表达产物在细菌体中形成不溶性的包含体。可通过对菌体蛋白的分级分高,将表达产物溶于5mol/L的尿素溶液中。 相似文献
124.
精子介导鱼类基因转移和聚合酶链反应检测技术 总被引:18,自引:0,他引:18
金鱼精子与美洲大绵wei的抗冻蛋白基因一起保温30分钟后,再与卵子受精,共获得145尾成鱼和若干胚胎。从胚胎和成鱼中提取DNA经聚合酶链反应(PCR法)扩增和Southern blot分子杂交表明,外源的抗冻蛋白基因进入了部分受体鱼的染色体组内。测定了45尾一年龄实验鱼中,有12尾显示出明确的杂交带,阳性率为26%。 相似文献
125.
利用鸡马立克氏病病毒(MDV)1型特异单克隆抗体H19致敏Sepharose 4B—cNBr,从感染重组病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒pp38基因重组产物,获得良好效果。提纯的蛋白质在SDS—PAGE中表现出一条分子量约为38kDa的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质条带也能被单克隆抗体H19识别。利用该提纯的重组pp38免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病毒的昆虫细胞Sf9反应,也能和Ⅰ型MDV型感染的鸡胚成纤维细胞反应。 相似文献
126.
麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
将麦迪霉素产生菌基因文库中与放线紫红索酮基还原酶基因actⅢ有同源性的4·0kb DNA片段克隆到质粒载体pWHM3中,构成重组质粒pCB4。将质粒pCB4转入酮基还原酶基因缺陷菌株——加利利链霉菌ATCC3167l中,得到转化子。转化子发酵产物经TLC和HPLC分析证明是阿克拉菌酮,与加利利链霉菌原株ATCC31133的产物相同,说明麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因互补了加利利链霉菌ATCC31671中缺陷的酮基还原酶基因,使其恢复了产生阿克拉菌酮的能力。4.Okb DNA片段插入方向相反的重组质粒pCBR4在加利利链霉菌ATCC31671中发酵产物经TLC分析证明也是阿克拉菌酮,这说明4.0kbDNA片段中麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因具有自身的启动子。对4.0kb DNA片段进行了限制酶酶切分析,建立了其酶切图谱。以actⅢ基因为探针,经分子杂交以及亚克隆和DNA转化实验,将麦迪霉索产生菌酮基还原酶基因定位于BssH Ⅱ—BamH Ⅰ 1.3kb DNA片段上。对1.3kb DNA片段核苷酸序列分析结果表明:此1.3kbDNA片段中含有一个独立的ORF,起始密码ATG,终止密码TAG,含783bp;在起始密码上游有GGAGG5个核苷酸SD序列;此ORF编码260个氨基酸,与actⅢ基因编码的261个氨基酸相似性为77.4%,相同性为66.7%,对麦迪霉素产生苗酮基还原酶基因的可能作用进行了讨论。 相似文献
127.
劳为德 《生物化学与生物物理进展》1994,21(1):13-17
能组织成超级结构的各种序列组块,因其具有特定一级序列、或者具有某种卷曲的螺旋构象和某种非β螺旋结构,可以作为有特异功能的结构域、被特异的结合蛋白质识别和结合,因而可称为密码结构域,密码结构域作为特异的分子相互作用和过程的遗传指令,参与细胞周期的各种事件乃至发育和分化过程中基因有区别的表达. 相似文献
128.
影响大肠杆菌中外源基因表达的因素 总被引:41,自引:1,他引:40
大肠杆菌已经被广泛地应用于表达各种外源基因,但是,不同的外源基因在表达效率上却有很大的差异,文章综述了影响大肠杆菌中外源基因表达的因素,这将有助于认识大肠杆菌中外源基因表达的规律,以便采取有效的方法提高外源基因在大肠杆菌中的表达效率. 相似文献
129.
大鼠心脏血压超负荷诱导左心室HSP70基因表达 总被引:15,自引:1,他引:14
本工作应用热休克蛋白70(HSP70)核酸分子杂交方法,测定了大鼠腹主动脉缩窄后左心室HSP70mRNA的水平。结果表明:大鼠腹主动脉缩窄后4h,动脉血压已明显升高,并持续在高水平上;大鼠左心室重/体重比在第三天开始增加,然后持续升高,第4周时比对照组增加59%;左心室HSP70mRNA在腹主动脉缩窄后4h已明显升高,1d,2d,1w均维持在高水平,1w后逐渐消失。实验结果提示:大鼠心肌负荷增加早期,左心室HSP70mRNA表达明显增加。 相似文献
130.
不同生育期水稻株高基因对GA3的敏感性及对内源激素含量的调节 总被引:14,自引:1,他引:13
水稻株高基因对GA3的敏感性在生育期间不一致,其中eui和sd1为全生育期敏感型;D53为苗期和分蘖期敏感型;Sd1和sds(t)为全生育期钝感型。矮秆基因型的GAs和IAA含量均低于高秆基因型,对GA3的敏感性与内源GAs含量的高低无关。苗期和分蘖期ZRs含量在高秆型中较高,而抽穗期则为矮秆型中较高。苗期ABA含量与对GA3敏感性一致,而与植株高度无关,分蘖期和抽穗期的ABA含量在矮秆型中较高。 相似文献