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p57与同源框基因HOXA10在子宫内膜基质细胞体外蜕膜化过程中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
本文旨在从mRNA和蛋白水平研究子宫内膜基质细胞(endometrial stromalcell,ESC)体外蜕膜化过程中p57和同源框基因HOXA10(homeobox A10 gene)的表达变化以及HOXA10的亚细胞定位,从而推测其在蜕膜化过程中的作用。本实验联合使用0.5mmol/L8-溴-cAMP和1×10?6mol/LMPA(medroxyprogesterone acetate)作用1、2、4d(D1、D2、D4)诱导ESC发生蜕膜化,相应时间点提取mRNA和蛋白质行半定量RT-PCR和免疫印迹,同时以2%低血清培养ESC1、4d作为对照(C1、C4)。用间接免疫荧光和基因转染的方法,观察蜕膜化过程中HOXA10的亚细胞定位。结果显示:(1)蜕膜化过程中HOXA10的表达进行性下降,D2开始与对照组(C4)比较具有显著性差异(P<0.05)。(2)相反,蜕膜化过程中p57的表达进行性上升,D2开始与对照组C4比较也有显著性差异(P<0.05)。(3)低血清培养ESC1、4d后,p57和HOXA10的表达没有显著性差异(P>0.05)。(4)蜕膜化过程中HOXA10始终定位于胞核,不发生胞浆胞核穿梭。以上观察结果表明:(1)p57的高表达是ESC脱离细胞周期走向分化的因素之一。(2)HOXA10的低表达可能是p57上调的原因之一。(3)孕激素受体(progesterone receptor,PR)途径参与了促进ESC脱离细胞周期而走向分化的过程。 相似文献
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该研究优化冻存后脐血NK细胞的培养条件,构建了靶向CD19的CAR-NK细胞,并探究了CD19-CAR-NK对CD19+ B细胞淋巴瘤的杀伤作用。首先将冻存的脐血单个核细胞复苏并静置18 h,通过CD56磁珠纯化NK细胞,使其在CBMC中的比例从13.8%提高至96.6%。然后比较使用不同细胞因子及其组合对NK细胞增殖、分化、凋亡及功能的影响,发现IL-2和IL-15均能活化NK细胞,但IL-2培养时NK细胞增殖优于IL-15(P<0.05),IL-2+15下CD56dim NK亚群占比[(74.33±5.03)%]最多,凋亡[(4.6±0.14)%]最少,累计增殖(62.67±3.21)倍,显著优于其他细胞因子组合(P<0.05)。该研究使用PDK1抑制剂BX795提高CAR-19慢病毒载体对NK细胞的转导效率,发现6 μmol/L BX795可将病毒转导效率提高3.6倍,且在此浓度下病毒转导效率[(36.4±1.91)%]最大。最后在体外验证CD19-CAR-NK对CD19+肿瘤细胞的杀伤能力,发现CD19-CAR-NK可增强... 相似文献
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钙调素拮抗剂与胞内钙离子浓度对离体培养的人蜕膜细胞活力的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
应用妊娠 6~ 8周的人工流产蜕膜组织为材料进行离体人工蜕膜细胞培养 ,观察两种化学结构完全不同的特异性钙调素拮抗剂——三氟拉嗪、蝙蝠葛碱衍生物 ,以及 Ca2 + 螯合剂—— EGTA和 Ca2 +载体—— A2 3187对蜕膜细胞活力的影响。结果表明 :三氟拉嗪、蝙蝠葛碱衍生物与 EGTA对蜕膜细胞活力的抑制作用与药物的浓度及其作用时间密切相关 ,随着浓度加大及作用时间延长而增强。≥ 1 5 μmol/L的三氟拉嗪或≥ 2 5 μmol/L的蝙蝠葛碱衍生物 ,或2 mmol/L的 EGTA均可明显抑制蜕膜细胞活力。三氟拉嗪和蝙蝠葛碱衍生物作用 96小时后分别使细胞活力降至对照组的 8.7%和 1 2 .0 % ,EGTA作用 72小时后降至对照组的 2 8.6%。6μmol/L的 A2 3187可一定程度地刺激细胞活力上升 ,但这种刺激效应随作用时间的延长而逐渐减弱。EGTA可增强三氟拉嗪对细胞活力的抑制作用。由此推测 ,Ca2 + -钙调素系统可能直接参与子宫蜕膜的发育和维持 ,并在其中发挥重要作用。这可能也是钙调素拮抗剂抗早孕的主要机理之一。 相似文献
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用不同剂量蓖麻籽乙醚提取物处理原代培养大鼠蜕膜细胞和黄体细胞,观察细胞形态变化,同时用MTT法检测细胞活力,探讨蓖麻籽提取物抗雌鼠生育活性成分的作用靶标,从而建立其有效成分的体外筛选方法。结果表明:400μg/mL蓖麻籽提取物处理液对体外培养大鼠蜕膜细胞生长有明显的抑制作用(P〈0.05);提取物对蜕膜细胞的半抑制浓度(IC50)为568.6±5.3μg/mL,r=0.9790;其抑制作用具有较好的量-效关系。而提取物对黄体细胞活力的抑制作用不显著。结论:用大鼠离体培养蜕膜细胞的活力测定方法,作为蓖麻籽乙醚提取物抗雌鼠有效成分分离、提纯的活性跟踪指标是可行的。 相似文献
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目的探讨人自然杀伤(NK)细胞在CD137抗体作用下通过抗体依赖性细胞毒性作用(ADCC)介导对乳腺癌细胞的杀伤作用。方法NK细胞表型和细胞因子检测实验分组:阴性对照组(未用人CD137抗体处理的NK细胞)、CD137抗体处理组(10μg/mL人CD137抗体处理4 h的NK细胞);NK细胞毒性检测实验分组:根据体系中是否添加NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗分为8组。流式细胞术检测两组NK细胞表面CD16分子的表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测两组NK细胞培养上清液中干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,乳酸脱氢酶(LDH)法检测8组反应体系中表皮生长因子受体(EGFR)高表达乳腺癌细胞系MDA-MB-231和EGFR低表达乳腺癌细胞系MDA-MB-453的杀伤比例,并采用t检验或析因分析进行统计学分析。结果与阴性对照组比较,CD137抗体处理组CD16+NK细胞比例(79.57﹪±0.92﹪比90.43﹪±0.67﹪)、细胞因子IFN-γ浓度[(388.90±7.02)pg/mL比(523.90±1.90)pg/mL]和TNF-α浓度[(20.59±4.09)pg/mL比(47.22±2.14)pg/mL]均升高,差异有统计学意义(P<0.05);MDA-MB-231细胞杀伤的三因素析因分析结果显示:NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗3个因素分别对MDA-MB-231细胞的杀伤都有作用(F=5227.276、201.473、1792.242,P均<0.001),3个因素两两之间的交互作用对MDA-MB-231细胞的杀伤也都有作用(F=183.903、1517.187、33.483,P均<0.001),3个因素的二级交互作用差异有统计学意义(F=41.505,P<0.001)。结论人CD137抗体可增强NK细胞分泌细胞毒性因子IFN-γ和TNF-α的能力,同时可上调NK细胞表面CD16分子的表达,从而使得NK细胞可能通过西妥昔单抗介导的ADCC作用增强对表皮生长因子受体(EGFR)高表达乳腺癌细胞的杀伤作用。 相似文献
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发酵灵芝菌粉抑制小鼠肿瘤及对正常小鼠免疫功能影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了发酵灵芝菌粉对接种S-180瘤细胞后的实验小鼠肿瘤的抑制作用、发酵灵芝菌粉对正常的实验小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力以及脾脏自然杀伤细胞活性的影响,结果表明发酵灵芝菌粉对小鼠移植性肿瘤的生长有明显的抑制作用,但对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力以及脾脏自然杀伤细胞的活性无明显的免疫促进作用。 相似文献
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目的:探讨Fe_3O_4-PEG-CD56/Avastin@Ce6靶向探针与NK92细胞的结合能力并进行细胞体外MRI成像。方法:制备Fe_3O_4-PEG-CD56/Avastin@Ce6纳米探针,对合成的材料进行表征。应用凋亡试剂盒测定不同浓度的材料对NK92的细胞毒性,通过流式细胞术分析纳米材料与NK92细胞的结合能力和应用MRI对细胞进行体外成像并分析其T2信号强度的改变。结果:合成的纳米探针具有较好的生物相容性,且对NK92细胞的影响较小,不同浓度下细胞凋亡水平基本一致,与NK92细胞结合的材料随浓度的增加而逐渐增加。MRI检查提示不同浓度探针孵育的NK92细胞T2加权像(T2WI)的信号均降低。结论:Fe_3O_4-PEG-CD56/Avastin@Ce6探针对NK92细胞具有靶向性,3.0 T MR扫描仪可对其进行体外监测。 相似文献