具有中医“热毒血瘀证”表征的大鼠血液成分和流变学变化

目的研究具有中医“热毒血瘀证”证候的大鼠血液成分和流变学变化,以阐释“热毒血瘀证”的生物学基础。方法大鼠腹腔注射内毒素即脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）,连续8周,从中西医学不同视角,观察注射期间和注射后不同时间点大鼠症状表现,包括采集舌像、检测白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-,αTNF-α）、血小板聚集、红细胞聚集和变形、血液粘度、血脂和凝血因子。结果注射毒素后大鼠活动减少,大便臭秽;尾部逐渐变得紫暗,舌质由红润变得暗、干涩、舌下静脉变长;给药第1周大鼠血液有凝血时间延长和血脂波动,随后有血液流变学异常和血细胞功能改变表现;4周至8周血小板聚集、血浆粘度和血脂升高。结论腹腔注射内毒素后,大鼠出现符合中医热毒血瘀证证候的舌像和体征,其生物学表现是一个动态过程首先是炎症反应并波及血液内成分变化和凝血变化,然后会引起微循环障碍和血流变的异常。这在一定程度反映中医“热毒血瘀证”的现代生物医学表现特征。     

慢性盆腔炎常见证型宫颈分泌物菌群分析

目的研究不同证型慢性盆腔炎患者生殖道菌群的变化。方法2002年6月至2003年5月广州中医药大学妇科住院慢性盆腔炎患者,湿热证组29例和气滞血瘀证组20例的宫颈分泌物进行菌群密集度、菌群多样性、优势菌的检测,并与24例正常人组对照。结果慢性盆腔炎湿热证和气滞血瘀证两者的衣原体感染率、细菌多样性、菌群密集度分级高于正常人组。优势菌群,以革兰阳性球菌为主,占75%,其中表皮葡萄球菌最多,占45%,其次为粪肠球菌,占16%;革兰氏性杆菌以大肠埃希菌为主,占13%,其次为棒状杆菌,占11%。湿热证和气滞血瘀证两者差异无显着性。结论慢性盆腔炎湿热证与气滞血瘀证均与菌群失调有关。     

治疗颈性眩晕的细胞生物力学效应的研究

通过培养人血管内皮细胞株(CRL-1730)来建立颈性眩晕血瘀证患者血清诱导的细胞损伤模型,对细胞进行形态学鉴定后,实施体外压力刺激,建立对细胞的力学加载模型,同时用丹参酮ⅡA对细胞模型干预进行对比研究,检测细胞外液NO、ET,游离钙浓度、内皮损伤标志物(血栓调节蛋白)含量变化。实验表明:与颈性眩晕血瘀对照组相比,该组压力组与加药组细胞形态变化不甚明显,且细胞活性、细胞内钙离子浓度、NO、ET含量比值及内皮损伤标志物含量差异具有统计学意义(p0.01);颈性眩晕血瘀低压组与颈性眩晕血瘀高压组相比,低压力刺激干预在减少细胞损伤标志物的含量方面效果更佳,证实对血管内皮细胞的损伤起一定的保护作用,效果甚至优于药物组。     

Cry1Ah蛋白标准物质候选物的制备与纯化（英文）

随着转基因技术的迅猛发展,转基因产品的安全性受到了广泛关注。转基因检测用有证标准物质在确保转基因产品定性、定量检测结果的可比性和可追溯性方面发挥着重要作用。但转基因蛋白质标准物质的开发相对缓慢,其中一个难点是制备高纯度的转基因蛋白质候选物。苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis cry1Ah1基因因其对亚洲玉米螟等鳞翅目害虫有很好的杀虫活性,已用于转基因抗虫作物的研制,并获得具有较好抗虫性状的转基因株系。为了研发Cry1Ah蛋白有证标准物质,亟需建立其制备及纯化体系。文中优化了利用Bt表达系统制备Cry1Ah蛋白的体系,利用离子交换色谱法和排阻色谱法逐级纯化的方法,获得了高纯度的Cry1Ah蛋白(排阻色谱纯度:99.6%)。生物活性测定结果表明,纯化的Cry1Ah蛋白与原毒素对小菜蛾Plutella xylostella的杀虫活性没有显著差异。最后使用Edman降解法和质谱法确定了Cry1Ah蛋白活化后的氨基酸序列。综上所述,获得的Cry1Ah纯蛋白可用于蛋白质标准物质的研制。     

中医证候结构表征研究及其前景展望

当前中医理论基础研究,有证候判定规范、证候疗效评价、证候物质基础、方剂配伍规律等的4个主要领域,但其共同的关键科学问题是中医证候结构表征,主要目的都是为了提高辨证论治的准确性和临床疗效。针对中医证候的结构表征研究,以脾气虚证候的发生规律为切入点,通过理论推证结果与临床数据分析结论相互印证,来揭示证候的结构特征,建立起了中医证候的拓扑结构数学模型,挖掘出了中医理论体系的数学科学基础,在证候基础研究上体现出中医理论的自身规律与临床诊疗特色,具有广阔的应用前景。     

麻杏石甘汤合千金苇茎汤加减联合西药治疗COPD急性加重期痰热壅肺证临床研究

目的:探讨麻杏石甘汤合千金苇茎汤加减联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期痰热壅肺证患者的临床疗效及对肺功能和血清炎性因子的影响。方法:选取2018年1月至2018年12月在我院就诊的COPD急性加重期痰热壅肺证患者80例,将入选的全部患者随机分为两组,每组40例。观察组在西医常规治疗基础上联合麻杏石甘汤合千金苇茎汤加减口服汤剂治疗7天,对照组给予西医常规治疗7天。记录两组患者治疗前以及治疗后的肺功能指标、血清炎性因子和改良英国医学研究会呼吸困难指数(m MRC)评分,比较两组患者的临床疗效。结果:两组患者治疗后的第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)和用力肺活量(FVC)较治疗前有所改善,但是观察组与对照组相比较,未见明显差异(P0.05);两组治疗后血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平较治疗前明显改善,观察组血清TNF-α水平更低(P0.05);观察组治疗后的m MRC评分明显低于对照组(P0.05);总有效率方面,观察组和对照组分别为80.00%、72.50%,两组相比较未见明显差异(P0.05);显效率方面,观察组优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:麻杏石甘汤合千金苇茎汤加减联合西药治疗COPD急性加重期痰热壅肺证患者,能够明显改善呼吸困难、咳嗽咳痰等症状,降低血清TNF-α水平,从而提高显效率。     

属性层次模型在中医证候诊断中的应用

目的:研究一种综合考虑专家主观经验和机器学习客观规则的中医证候诊断模型。方法:基于属性层次分析模型,提出了一种可以应用于中医证候识别的方法,并编程实现了智能系统。系统融合中、西医多个特征构建决策属性,集成中医专家主观经验和机器学习客观规则联合辨证,实现了离散属性测度、相对属性权和合成属性权的计算方法。结果:构建了中医证候诊断系统,针对肝硬化样本病例学习辨证规则,并识别新样本的证候。结论:通过中医肝硬化数据进行系统的实例验证研究,表明该系统所得辨证结果与临床诊断吻合较好。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠行为、肾上腺指数及血清Cort 的影响

目的:观察王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠的行为学、肾上腺指数及血清皮质醇(Cort)的调控作用。方法:将45只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、王氏连朴饮(高、中、低剂量)组。利用复合因素复制脾胃湿热证动物模型。通过旷场实验观察大鼠行为学改变,称量法计算肾上腺指数,采用放射免疫法检测大鼠血清Cort的水平。结果:造模成功后大鼠行为发生改变,王氏连朴饮各剂量组对大鼠行为均有恢复作用,但各剂量组间无显著性差异;大鼠肾上腺指数增高,血清Cort升高(P<0.05),王氏连朴饮各剂量组对其均有降低作用,以中剂量组效果最好且有显著性差异(P<0.05)。结论:王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠行为、肾上腺指数和血清Cort有干预作用,这可能是王氏连朴饮清热祛湿的机制之一。     

硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶在中医肝阳化风证的表达及其意义

目的:比较硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶(Thioredoxin-dependent peroxide reductase,又称PRX3)在中医肝阳化风证中的表达及意义.方法:按照西医诊断标准及中医辨证标准收集脑出血、脑梗塞、颈椎病、帕金森病四种肝阳化风证患者40例(每病10例)及健康人10例,采用RT-PCR方法检测外周血淋巴细胞硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶的基因表达情况.结果:较对照组相比.四病肝阳化风证组PRX3表达显著下降(P＜0.05),而四病肝阳化风证组间表达无差异.结论:肝阳化风证硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶表达下调与提示与氧化应激有关和异病同证具有相同物质基础,可能成为肝阳化风证的特异性指标.     

Expression and identification of inclusion forming-related domain of NS80 nonstructural protein of grass carp reovirus

Grass carp reovirus (GCRV), a double stranded RNA virus that infects aquatic animals, often with disastrous effects, belongs to the genus Aquareovirus and family Reoviridea. Similar to other reoviruses, genome replication of GCRV in infected cells occurs in cytoplasmic inclusion bodies, also called viral factories. Sequences analysis revealed the nonstructural protein NS80, encoded by GCRV segment 4, has a high similarity with uNS in MRV(Mammalian orthoreoviruses), which may be associated with viral factory formation. To understand the function of the uNS80 protein in virus replication, the initial expression and identification of the immunogenicity of the GCRV NS80 protein inclusion forming-related region (335.742) was investigated in this study. It is shown that the over-expressed fusion protein was produced by inducing with IPTG at 28oC. In addition, serum specific rabbit antibody was obtained by using super purified recombinant NS80(335.742) protein as antigen. Moreover, the expressed protein was able to bind to anti-his-tag monoclonal antibody (mouse) and NS80(335-742) specific rabbit antibody. Further western blot analysis indicates that the antiserum could detect NS80 or NS80C protein expression in GCRV infected cells. This data provides a foundation for further investigation of the role of NS80 in viral inclusion formation and virion assembly.