绿豆子叶脱分化过程中RNA聚合酶的制备、特性及其活性的研究

绿豆(Phaseolus vadiatus L.)子叶切段在脱分化形成愈伤组织过程中,制备的染色质具有较高的RNA聚合酶活力;3天愈伤组绢的酶活力高于5天和7天的;3天、5天和7天加激素脱柱依次分分化形成的愈伤组织,其酶活力均比不脱分化的高一倍以上;用DEAE-纤维素酶部,依据层析洗脱性质和层析图谱及对α-鹅膏菌素的敏感程度,证明三个峰是RNA聚合Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。     

64DP与人染色质的结合反应及细胞核内64DP的检测

现有结果表明64 DP(DNA结合蛋白)可能是一种急性期反应蛋白质。正常人每百毫升血清中含有约50mg的64 DP。目前,关于64 DP的生物学功能国内外尚无研究和报道。这方面的研究对阐明肿瘤及其它病理条件下血清64 DP含量增高的机制和意义有可能提供线索。 已知64 DP在体外具有和DNA结合的特性.它在体内的生理作用是否也和DNA有关呢?本实验首先分离纯化了人肝细胞染色质,用同位素标记的64 DP与染色质进行的结合实验及结合抑制实验表明64 DP能特异地与人染色质结合。进一步用~(125)I标记的兔抗64 DP抗体对人染色质作了固相放射免疫测定,结果定性地显示出染色质内可能含有64 DP。用兔抗64 DP抗体作为第一抗体,利用PAP免疫组织化学染色研究了16例正常肝组织切片,发现大多数切片(80％)中部分肝细胞核内有明显64DP显色颗粒。以上诸实验结果均提示细胞核内有64 DP存在,表明64 DP的生物学功能可能与它的DNA结合特性有关。     

小麦愈伤组织及再生植株的染色体变异

对培养在含有不同附加成分的MS培养基上的小麦愈伤组织染色体进行了跟踪研究。结果表明,在整个培养过程中各培养基上愈伤组织都有一定程度的染色体变异。在培养初期,高浓度2,4-D可增加愈伤组织中的染色体变异率,AgNO_3可降低染色体变异率。6-BA对培养初期愈伤组织染色体变异率没有显著影响。但高浓度6-BA可加大长期培养愈伤组织中的超倍体细胞频率。蔗糖浓度对最初9代愈伤组织染色体变异率无显著影响。但之后,低浓度蔗糖培养基上亚倍体细胞频率明显减小。随着培养时间的延长,各培养基上愈伤组织中正常二倍体细胞的频率都有逐渐上升的趋势。在再生植株中,大部分核型正常,只有少数植株具有染色体数目或结构变异。有些核型正常植株也有表型变异。     

在继代培养中玉米花粉愈伤组织无性系的核酸和蛋白质变化

本实验室筛选出具有不同分化能力的单倍体玉米无性系组织,挑选其大小相同、新鲜的、具有分化能力的无性系No.1和完全丧失分化能力的无性系No.250组织,转接到分化和继代两种培养基上,分析其DNA和RNA以及蛋白质含量的差异,以了解组织在分化过程中DNA、RNA和蛋白质动态。试验结果表明,在分化和继代两种培养基上,No.1的DNA、RNA和蛋白质含量都高于No.250;No.1和No.250在分化培养基上DNA和RNA含量增加的速度比在继代培养基上要快;在组织分化过程中,No.1会出现一些新的小分子量蛋白质分子,而No.250中却没有,这些特殊的蛋白质分子可能与组织分化有关。     

由水仙愈伤组织产生再生植株

水仙在大田条件下的繁殖率是很低的。利用组织培养技术快速繁殖水仙已进行许多探索。本文报道从水仙鳞片愈伤组织长期培养物高频率地再生植株。材料和方法供试材料为中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis Roem.)的鳞茎。鳞茎用0.1%升汞溶液表面灭菌20分钟,经无菌水多次冲洗后,将较内层的鳞片基部切成约27mm~3切块(带有鳞茎盘)作外植体。     

怎样制作好实验动物病理的石蜡切片

有关动物实验病理组织切片的制作文献报告甚少,本文小结了我们十多年来制作不同种类的实验动物病理组织切片的经验,对必须选用缓冲中性甲醛固定液和控制各类组织的脱水、透明浸蜡时间以及动物组织切片的过程特殊处理事宜作了说明。     

三七愈伤组织的培养

在MS培养基中加入不同浓度的KT和2,4-D,综合考虑三七愈伤组织生长缓慢兼顾皂甙含量,较合适的KT浓度为0.7ppm,较合适的2,4-D浓度在2—3ppm之间。在培养基中补充各种添加剂,结果以椰子乳和水解乳蛋白较好。综合生长和皂甙含量以20％的椰子乳和0.7％的水解乳蛋白较合适。从21个三七愈伤组织无性繁殖系中筛选山了5个较优的无性系,特别是其中04号无性系更优,无论生长速率还是总皂甙含量都更高。通过以上研究,使三七愈伤组织的生长速率达220毫克/升/天,是原初培养愈伤组织(54.0mg干重/升/天)的4倍。愈伤组织中总皂甙含量高达13％,是原初培养愈伤组织(5.37％)的2.4倍,为原植物的3倍。从而证明了三七培养组织次级代谢的全能性是可调节的,为三七细胞工程的工业生产应用打下了初步基础。     

改进的薄层组织电泳技术对鸡胚及小鼠脏器组织同工酶的分析

本文介绍用改进的组织电泳及快速酶活性显色法对鸡胚脊髓及小鼠脏器组织切片中可溶性和膜结合性同工酶的分析研究。结果表明:本方法能成功地将鸡胚脊髓中的LDH同工酶分成15条亚带,胆碱酯酶分成10余条亚带,琥珀酸脱氢酶分成8条亚带,并将小鼠脏器组织中的LDH同工酶分成34条亚带,非特异性酯酶分成50余条亚带。为对不同物种同工酶的亚基组成、组合类型与酶谱变化的分析、动物组织种属的鉴定与临床标本的鉴别诊断提供了依据和实验手段。     

丹参愈伤组织细胞固定化及其转化产物的特征

本文用海藻胶包埋丹参愈伤组织细胞,在Ls+Kto．1+NAAl培养液中常温振荡培养一个月左右,培养液抽提物经TLC和HPLC检测,表明该系统可连续分泌丹参的主要成分——丹参酮I A和隐丹参酮。此外对丹参愈伤组织细胞悬浮培养、海藻胶包埋条件,周定化细胞的稳定性以及分泌产物的特征等方面进行了比较。