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为提高从大连渤海海域海泥中筛选到的菌株Basidioascus sp. LG-31产低温葡萄糖氧化酶活性性,对菌株Basidioascus sp.LG-31进行了单因素发酵条件优化,结果表明,菌株Basidioascus sp.LG-31产低温葡萄糖氧化酶活性显著提高。单因素优化结果:蔗糖4%(质量分数)、酵母粉0.3%(质量分数)、NaNO3 0.4%(质量分数)、无机盐(KH2PO4 0.02%(质量分数)、KCl 0.10%(质量分数)、MgSO4·7H2O 0.10%(质量分数))、初始pH值7.0、装液量125 mL/250 mL、接种量2%(体积分数)、转速200 r/min、温度20℃。最高酶活性达435.37 U/mL,相对于优化前的最高酶活性15.28 U/mL,提高了28.49倍。为下一步酶学性质研究及低温葡萄糖氧化酶在工业中的应用提供参考。 相似文献
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以葡萄糖氧化酶(GOx)为研究对象,系统地研究了钙离子对交联酶聚集体(CLEA)粒子尺寸和微观结构的调控作用以及酶催化性能和实用性的影响。研究结果表明,GOx酶沉淀过程中引入钙离子可显著降低CLEA粒子尺寸并导致粒子内纳米孔道结构逐步消失。在0.1 mmol/L钙离子浓度下,GOx酶的CLEA仍保有清晰的纳米孔道结构。以葡萄糖为底物的GOx酶CLEA催化结果显示,该CLEA粒子的酶活性为对照CLEA粒子的2.69倍。即便1.0 mmol/L钙离子浓度下制备的CLEA粒子的GOx酶活性仍高出对照CLEA粒子约42%。此外,0.1 mmol/L钙离子浓度下制备的CLEA不仅具有更高的底物转化速率和很好的操作稳定性,而且CLEA中GOx酶的最大反应速度显著提高。这些实验结果明确了钙离子对CLEA粒子尺寸和微观结构的调控作用,为制备具有高效生物催化活性的CLEA粒子奠定了基础。 相似文献
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葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,简称GOD)可氧化葡萄糖生产葡萄糖酸及其衍生物,在新型无抗饲料添加剂的开发中具有良好的应用潜力,但其生产加工过程中尚存在热稳定差的瓶颈问题。本研究采用融合双亲短肽技术提高葡萄糖氧化酶的热稳定性,分别选取8种不同氨基酸长度、不同Linker连接的双亲短肽(Self-assembling peptides,SAPs)融合至黑曲霉来源的葡萄糖氧化酶的N端,构建了8种融合型酶SAP1-GS-GOD、SAP1-PT-GOD、SAP2-PT-GOD、SAP3-PT-GOD、SAP4-PT-GOD、SAP5-PT-GOD、SAP6-PT-GOD、SAP7-PT-GOD,并在毕赤酵母GS115中异源表达。获得的连接PT Linker的融合酶在60℃下孵育60 min后的相对酶活均高于初始酶。其中,融合酶SAP5-PT-GOD在60℃下孵育30 min的相对酶活为67%,是相同处理条件下初始酶相对酶活的10.9倍。同时,融合酶SAP1-PT-GOD、SAP2-PT-GOD、SAP3-PT-GOD、SAP5-PT-GOD的K_(cat)/K_m值较初始酶均有进一步的提高。研究表明,在葡萄糖氧化酶的N端融合以PT为Linker的目标双亲短肽能有效提高葡萄糖氧化酶的热稳定性,通过对融合酶分子内作用力进行分析,酶分子内氢键的增加对融合酶热稳定性的提高效果最为显著。上述研究获得的热稳定性提高的融合葡萄糖氧化酶及其效果机制分析对提高酶在加工和应用过程中的活性具有重要的研究意义和应用价值。 相似文献
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试验旨在研究葡萄糖氧化酶解除黄曲霉毒素M_1毒性的应用效果。选择含有7.2μg/kg(A组)和19.5μg/kg(B组)黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的玉米饲料,分别添加5‰固体和液体葡萄糖氧化酶制剂,连续饲喂奶牛10 d,同时和延后测定鲜牛奶和尿中黄曲霉毒素M_1(AFM_1)量。测定数据表明,与AFB_1组相比,固体酶A组产牛奶中AFM_1未检出,B组中AFM_1含量平均减少了76.47%;液体酶A组产牛奶中AFM_1未检出,B组中AFM_1平均减少了82.35%。尿中AFM_1量减少了75%、70.5%和75%、73.1%;与对照组相比,牛奶产量、牛奶中蛋白质及脂肪含量没有变化。 相似文献
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测定葡萄糖的酶场效应管传感器 总被引:1,自引:0,他引:1
将葡萄糖氧化酶(GOD)、恋用聚丙烯酰胺包埋法固定化在氢离子敏感场效应管(H+-ISFET)栅极绝缘层表面,利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的特异性就制成了对萄萄糖进行定量测定的酶一葡萄糖传感器。该传感器的测定范围为5×10-6—2×1O-4g/ml,响应时间为25s(动力学方法),重复性误差小于4%,一个月内未发现传感器输出电压降低。 相似文献
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合成了新的光交联载体PVA—sbQ—GA,通过物理包理和化学键合相结合的办法固定了葡萄糖氧化酶。对SbQ和GA在载体中量及光照时间进行了优化试验,酶膜活力回收达40%。与氧电极结合制成葡萄糖传感器,对其性能进行了测定。 相似文献
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微生物研究所发酵工程部是一个为研究扩试、中间放大试验,使研究阶段成果投入工业规模生产提供可行性研究,完成工艺工程技术参数的中间试验基地,是科学研究和工业规模生产的中间接口.同时它也是一个具有较强的开发和适度生产规模的生产试验场.多年来,发酵工程部为科研服务显示了相当的优势和良好的服务质量.近几年完成的中间试验有黄单胞菌多糖发酵和后提取制备工艺;临床诊断用胆固醇氧化酶发酵及提取工艺;葡萄糖氧化酶发酵及提取工艺;胆固醇酯酶的发酵及提取制备工艺;葡萄糖酸钠的微生物发酵生产工艺;新多氧霉素的发酵及提取工艺;十五碳二元酸的发酵及提取工艺;医用灵芝及香菇的发酵工艺等.中试结果大大超过了实验水平,如十五碳二元酸产酸率已达到世界领先水平. 相似文献
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