降解全氟辛酸真菌的分离与鉴定

目的 通过富集培养分离降解全氟辛酸（PFOA）的真菌,进行分类鉴定和降解特性分析。方法 采集全氟化合物污染的土壤,利用以PFOA为唯一碳源的无机盐培养基进行驯化和富集培养,分离降解PFOA的真菌;通过形态观察和基于ITS基因序列的系统发育分析对分离菌株进行鉴定;采用LC-MS检测其降解PFOA的能力。结果 分离获得2株降解PFOA的真菌AF1和AF2,初步鉴定分别为棘孢木霉（Trichoderma asperellum）和棘卷枝毛霉（Mucor circinelloides）;胞外酶活性分析均具有漆酶活性。真菌AF1和AF2在以PFOA为唯一碳源的无机盐培养基中培养72 h后,最大降解率分别为24.24%和28.12%。结论 自然环境中蕴藏着降解PFOA的真菌资源。     

粪菌移植在体外循环术后肠道菌群失调患者中的应用

目的 研究粪菌移植在体外循环术后肠道菌群失调患者中的应用,探讨其有效性及安全性。方法 回顾性分析2015年1月—2017年12月兰大一院心外科重症监护室行粪菌移植治疗肠道菌群失调的患者20例,对比治疗前及治疗后患者降钙素原、肠道菌群失调程度、Hart腹泻计分的变化,统计痊愈率并随访1个月关注不良反应的发生。结果 与治疗前相比,粪菌移植治疗后所有患者降钙素原明显下降[（2.79±2.93）vs（0.83±0.86）ng/mL],Hart腹泻计分明显减少[（20.40±2.62）vs（4.15±2.70）],差异均具有统计学意义（Ps＜0.05）。治疗后患者肠道菌群失调程度明显改善（P＜0.05）。患者痊愈率达95%。治疗期间及随访1个月无不良反应发生。结论 粪菌移植可以明显改善体外循环术后患者肠道菌群失调情况及临床症状,降低患者炎症反应,且无不良事件发生,有利于患者术后康复,安全性好。     

不同发酵茶中优势真菌的分离鉴定及产消化酶活性比较

目的 分离鉴定云南普洱茶、广州小青柑、广西六堡茶和湖南熙茯茶中的主要真菌,并探讨其产消化酶活性。方法 采用平板涂布法分离不同发酵茶中的真菌,通过其ITS序列进行分子鉴定;利用平板透明圈法测定不同真菌的产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶活性。结果 从4种发酵茶中共分离出8种真菌,其中,在云南普洱茶中分离出2种真菌,分别为篮状菌（Talaromyces. sp.）和T. variabilis;广州小青柑中分离出3种真菌,分别为阿曲霉（Aspergillus amstelodami）、烟曲霉（A. fumigatus）和绳状篮状菌（T. funiculosus）;广西六堡茶中分离出2种真菌,分别为黑曲霉（A. niger）和冠突曲霉（A. cristatus）;湖南熙茯茶中仅分离出谢瓦曲霉（A.chevalieri）。其中Talaromyces. sp.、T. variabilis、A. niger、A.amstelodami、A. fumigatus、T. funiculosus有产纤维素酶活性,Talaromyces. sp.、T. variabilis、A. cristatus、A. fumigatus、T. funiculosus有产淀粉酶活性,Talaromyces. sp.、T. variabilis、A. niger、A. fumigatus、T. funiculosus有产蛋白酶活性,A. niger有产脂肪酶活性。在8种真菌中,T. variabilis、烟曲霉和绳状篮状菌可同时产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶;黑曲霉能同时产纤维素酶、蛋白酶和脂肪酶;冠突曲霉仅有产淀粉酶活性;阿曲霉仅有产纤维素酶活性。通过比较不同真菌的产酶活性表明,烟曲霉的产蛋白酶活性能力最强;Talaromyces sp.的产纤维酶活性能力最强;Talaromyces. sp.和绳状篮状菌的产淀粉酶活性最强。结论 发酵茶的真菌以曲霉菌属Aspergillus、散囊菌属Eurotium和篮状菌属Talaromyces为主,多数真菌具有产消化酶活性,这些酶可能在茶叶发酵过程中起重要作用,并影响发酵茶叶的品质。     

儿童迁延性腹泻患者肠道菌群和肠黏膜屏障功能的变化以及双歧杆菌三联活菌散的干预作用

目的 探讨儿童迁延性腹泻患者肠道菌群和肠黏膜屏障功能的变化以及双歧杆菌三联活菌散的干预作用。方法 选取儿科就诊迁延性腹泻患儿40例为观察组,予以双歧杆菌三联活菌散1.0 g/次,3次/d,溶解于温水中口服,连用8周,检测观察组患儿治疗前后肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标的变化。另选择同期在我院体检的正常儿童30例为对照组。结果 观察组患儿治疗前双歧杆菌、乳杆菌的数量及B/E比值明显少于对照组,而大肠埃希菌数量明显多于对照组（P<0.05）。治疗8周后,观察组患儿双歧杆菌、乳杆菌的数量及B/E比值较治疗前明显上升,大肠埃希菌数量较治疗前明显下降（P<0.05）;观察组患儿治疗前血清D-乳酸、PCT和DAO水平明显高于对照组（P<0.05）。治疗8周后,血清D-乳酸、PCT和DAO水平较治疗前明显下降（P<0.05）。结论 儿童迁延性腹泻患者存在肠道菌群紊乱,引起肠黏膜屏障功能受损,肠黏膜的通透性异常。双歧杆菌三联活菌散治疗儿童迁延性腹泻患者可纠正肠道菌群紊乱,保护肠黏膜屏障功能,降低其通透性,达到治疗腹泻的目的。     

粪便标本小肠结肠炎耶尔森菌筛检方法的比较

目的 比较分离培养法、反转录‒聚合酶链反应法对腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检测情况。方法 在2016年6月至2017年6月临床收治的腹泻患者中选取368例,均使用分离培养法、反转录‒聚合酶链反应法对其粪便中的小肠结肠炎耶尔森菌展开检验,对比分析两种方法的检验结果。结果 反转录‒聚合酶链反应法阳性率为77.17%,比分离培养法的51.09%高,差异有统计学意义（P＜0.05）;反转录‒聚合酶链反应法致病菌株检出率为83.10%,高于分离培养法的59.57%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 对腹泻患者粪便标本中的小肠结肠炎耶尔森菌检测时,相较于分离培养法,反转录‒聚合酶链反应法阳性检出率更高,可使小肠结肠炎耶尔森菌性腹泻诊断准确率提升。     

发酵菌糠饲料的开发

目的 充分利用资源,降低养殖成本。方法 利用菌糠为主要原料,添加适量麸皮和豆粕,以2%的接种量加入植物乳杆菌ST-III、干酪乳杆菌LC2W,15 d密闭发酵。结果 获得具有良好风味和质构、粗蛋白含量（以干物质计）可达到16%、pH为4.3的发酵饲料。动物实验结果表明,其72 h瘤胃降解率可达42%,经25 d饲喂后[1.5 kg/（头·天）],后备牛（9~10月龄）的25 d平均日增重可以达到0.95 kg。结论 发酵菌糠饲料性能优于市售同类产品,具有一定的应用前景。     

2014—2016年大连地区血流感染肺炎克雷伯菌的耐药性特征分析

目的 分析肺炎克雷伯菌所致血流感染患者的科室分布及其病原菌耐药性特征,为指导临床合理应用抗菌药物,有效控制感染提供依据。方法 选择2014—2016年大连医科大学附属第一医院送检血液标本中分离得到的289株肺炎克雷伯菌,对其进行细菌鉴定、药敏试验及ESBL确认试验,分析肺炎克雷伯菌所致血流感染的科室分布特征及其病原菌耐药性变迁。结果 患者血液中肺炎克雷伯菌检出率以急诊科（24.91%）和ICU为最高（23.88%）。3年中肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素和阿米卡星耐药率较低,均在20.00%左右。产ESBL肺炎克雷伯菌共135株,占46.71%,对常用抗生素的耐药率均显著高于非产ESBL菌株（P<0.01）。碳青霉烯类抗生素耐药菌株对常用抗生素耐药率均高于敏感菌株（P<0.01）,对四环素、复方新诺明和阿米卡星耐药率相对较低,分别为66.10%、66.10%、71.19%。结论 我院2014—2016年患者血液中肺炎克雷伯菌检出率以急诊科和ICU为最高。该菌对碳青霉烯类抗生素及阿米卡星的耐药率较低,碳青霉烯类抗生素耐药菌株对四环素、复方新诺明和阿米卡星尚有一定敏感性。     

曲美布汀联合双歧杆菌三联活菌胶囊对功能性消化不良重叠IBS-D患者肠道的影响

目的 探讨曲美布汀联合双歧杆菌三联活菌胶囊对功能性消化不良（FD）重叠腹泻型肠易激综合征（IBS-D）患者肠道微生态的影响。方法 选取90例FD重叠IBS-D患者,随机分为观察组和对照组各45例。两组患者均予以曲美布汀片100 mg/次,3次/d,口服;观察组在对照组基础上加用双歧杆菌三联活菌胶囊630 mg/次,2次/d,餐后约30 min温水服用,两组患者均连用8周。观察两组患者治疗前后肠道菌群的变化,并比较其临床效果及不良反应。结果 治疗8周后,观察组患者粪便中双歧杆菌和乳杆菌数量增加,而肠杆菌、肠球菌和酵母菌数量下降（P0.05）。治疗8周后,观察组患者总有效率高于对照组（χ2=4.05,P0.05）。结论 曲美布汀联合双歧杆菌三联活菌胶囊治疗FD重叠IBS-D患者疗效较肯定,安全性较高,其作用机制可能是通过调节肠道菌群,重建肠道微生态平衡,从而改善其消化不良及腹泻症状。     

分子分型技术用于流脑疫情的同源性分析

目的 应用多位点序列分型（Multilocus sequence typing,MLST）技术和脉冲场凝胶电泳（pulsed-field gel electrophoresis,PFGE）技术对大连市2014年4月同一工地两起流脑疫情得到的脑膜炎奈瑟氏菌株进行分子分型图谱分析,了解各菌株之间的亲缘关系。方法 对病例的脑脊液标本进行脑膜炎奈瑟菌PCR分群,对另一病例和所有密切接触者分离菌株进行多位点序列分型（MLST）试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）鉴定实验。结果 疑似病例标本PCR结果为脑膜炎奈瑟氏菌A群阳性,另一病例和所有密切接触者分离到的菌株PFGE图谱基本相同,表明来自同一克隆系。多位点序列分析结果为ST7。结论 两起疫情分离到的菌株型别之间具有高度的同源性,该病原菌类型为ST7的A群脑膜炎奈瑟氏菌。     

双歧杆菌三联活菌散对儿童轮状病毒性肠炎患者肠道菌群及肠黏膜通透性的影响

目的 观察双歧杆菌三联活菌散对儿童轮状病毒性肠炎（RVE）患者肠道菌群和肠黏膜通透性的影响。方法 选择2016年1月至2017年8月于丽水市中心医院儿科门诊治疗的RVE患儿94例,随机分为观察组和对照组各47例。两组患儿均予饮食调整、补液及纠正电解质紊乱和酸碱失衡等治疗。观察组患儿加用双歧杆菌三联活菌散1.0 g/次,3次/d,温水冲服。观察两组患儿治疗前后肠道菌群（双歧杆菌、乳杆菌和大肠埃希菌）数量和肠黏膜通透性指标[内毒素（ETX）和D-乳酸]的变化,并比较其临床疗效。结果 治疗72 h后,观察组患儿双歧杆菌和乳杆菌数量明显上升,大肠埃希菌数量明显下降（P0.05）。治疗后观察组患儿双歧杆菌、乳杆菌数量较对照组更高,大肠埃希菌数量较对照组更低（P<0.05）。两组患儿治疗后血清ETX和D-乳酸水平均明显下降（P<0.05）,且观察组下降幅度更大（P<0.05）;同时观察组患儿总有效率高于对照组（χ2=4.11,P<0.05）。结论 双歧杆菌三联活菌散治疗儿童RVE的疗效确切,其作用机制可能与其能增加双歧杆菌和乳杆菌等有益菌的数量,减少大肠埃希菌等致病菌的数量,改善患儿肠道微生态状况;并与其能降低肠黏膜通透性和减少肠液的分泌渗出相关。