CaPKR-like在鲫鱼与草鱼组织中的表达特性分析

摘要：PKR是由干扰素诱导的最重要的抗病毒蛋白之一,能抑制细胞和病毒蛋白的合成。鲫鱼PKR基因(CaPKR-like)是鱼类第一个,也是非哺乳类脊椎动物第一个报道的PKR全长cDNA序列。本研究制备了CaPKR-like N-端包含Za结构域的多克隆抗体,采用Western blots检验PKR-like在鲫鱼和草鱼组织中的表达特性。Western blots显示在未诱导的鲫鱼和草鱼中该基因表达水平非常低,但是经Poly I:C免疫一周后,在鲫鱼和草鱼等8种组织中有较强的PKR-like蛋白产生。结果暗示：CaPKR-like与哺乳类PKR有相同的组织表达特性。。     

草鱼全同胞鱼苗不同个体甲基化位点的差异

本研究通过甲基化敏感扩增多态性(Methylation sensitive amplification polymorphism)对一对草鱼亲本的20个子代甲基化位点进行了研究。从20对引物组合中扩增出311个位点,其中甲基化位点236个,占总扩增位点的75.9%,表明草鱼水花期基因组甲基化水平已经很高,说明它们大部分组织分化基本完成;其中甲基化多态位点65个,占甲基化位点的27.5%,说明这些子代草鱼甲基化位点已经有相当的差异。对其他两对亲本的后代用六个引物组合扩增的结果表明,同一亲本的子代在甲基化模式上有差异可能是普遍现象。本研究结果说明,即使来自同一对草鱼亲本的不同子代个体在基因表达上也有较大的差异,因此很多性状在草鱼后代的分离和一些基因表达的改变有一定的关系。     

球形小壳化石在贵州金沙寒武系牛蹄塘组的首次发现

贵州金沙岩孔剖面的寒武系牛蹄塘组为跨阶地层,以镍钼矿层为分界面,其上部属于筇竹寺阶,下部为梅树村阶。近期,作者利用15%左右的醋酸浸泡金沙岩孔剖面牛蹄塘组底部(梅树村阶)的岩样,发现了以球形化石为主的单胞、多胞球形类小壳动物化石,包括Olivooides pearformis和其余两类未确定的球形化石。此次球形化石的发现不仅丰富了牛蹄塘生物群的生物面貌,而且为解译早期后生动物的起源和演化、胚胎生物学提供了化石资料。     

基于基塘系统的珠江三角洲多尺度水敏设计研究

珠江三角洲是位于中国东南部以河流为主导的洪泛平原。由于堤防建设、河流渠化和城市化带来纳水空间的减少,珠江三角洲地区的河流、雨水和海洋所引起的洪水风险增加。为了防范洪水风险,需要采取更具适应性的城市化战略,在考虑多尺度研究视角的同时,重视珠江三角洲传统水利方法（即生态农业）,例如利用传统水管理方法的基塘系统。确定基于该地区传统水陆混合农业实践的多尺度水敏设计的景观设计原则。顺德地区地处珠江三角洲西江和北江之间洪水易发的低地,这种传统水陆混合农业系统已经有着悠久的历史并促使其形成了与水共生的传统。通过学习传统的水陆混合农业实践,发现新的设计原则,从而减轻洪水风险,同时促进可持续的城市化。这种新的方法将不仅服务于顺德区,而且包括整个珠江三角洲,以增加对于洪水的适应性。     

草鱼×赤眼鳟F1与其亲本遗传性状的比较研究

采用生物统计方法,对草鱼、赤眼鳟及其杂种一代（草♀×赤♂、草♂×赤♀）的１０ 个数量性状进行统计分析,结果显示草♂×赤♀杂种的性状表现了明显的趋父性遗传,而草♀×赤♂杂种则表现了明显的趋母性遗传．用杂种指数衡量,在所测量的７ 个性状中,有５ 个偏向草鱼,只有体长／体高和脊椎骨数２ 个性状偏向赤眼鳟．这表明草鱼与赤眼鳟的杂交后代（Ｆ１）数量性状遗传受草鱼遗传因子的影响较大．     

利用噬菌体展示技术淘选草鱼呼肠孤病毒的单链抗体

草鱼呼肠孤病毒（GCRV）是引起我国大面积草鱼幼鱼出血病暴发的主要病原,其外衣壳蛋白VP5和VP7在病毒入侵宿主细胞过程中起着至关重要的作用。研究以原核表达的VP7、全长VP5、VP5的N端片段及C端片段为靶蛋白,利用已构建的噬菌体展示单链抗体文库进行淘选。经过3轮淘选后,共获得7个针对VP7、VP5、VP5N和VP5C的单链抗体。经过验证,识别原核表达的VP7的两个单链抗体能够成功识别天然GCRV病毒。此结果对于进一步研究GCRV与宿主细胞的相互作用机理奠定了基础。       

草鱼肠道纤维素降解细菌的分离与鉴定

为更好地弄清草鱼（Ctenopharyngodon idella）肠道纤维素降解细菌的种类,采用羧甲基纤维素（CMC）作为唯一碳源的选择性培养基,分别从草鱼肠道内容物和肠道黏膜中分离到了40株产纤维素酶细菌。16S rRNA基因序列的分析结果显示,大多数产纤维素酶细菌为气单胞菌属（Aeromonas）的种类,其次为肠杆菌属（Enterobacter）的细菌以及未经分离纯培养的细菌（Uncultured bacterium）。进一步研究细菌产纤维素酶能力发现,纤维素酶活性显著性高于其他菌株的分别是A. veronii MC2、A. veronii BC6、肠杆菌科（Enterobacteriaceae）中一种未经分离纯培养的细菌BM3（Uncultured bacterium BM3）和A. jandaei HC9。草鱼肠道中简答气单胞菌（A. jandaei）、类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）、阴沟肠杆菌（E. cloacae）以及产气肠杆菌（E. aerogenes）是被作为产纤维素酶细菌的首次报道。       

饲料中棉粕替代鱼粉蛋白对草鱼的生长、血液生理指标和鱼体组成的影响

以初始体重（100.00.29） g的草鱼为研究对象,通过8周的生长实验,研究饲料中棉粕替代鱼粉蛋白对草鱼的生长、饲料利用,血液生理指标和鱼体生化组成的影响。实验设置7种等氮等能饲料,对照组（C）以鱼粉为唯一蛋白源,其余6组分别以棉粕替代饲料中鱼粉蛋白的20% （R20）、40% （R40）、60% （R60）、80% （R80）、90% （R90）、100% （R100）。研究结果表明:随着饲料中棉粕含量的升高,草鱼特定生长率呈下降的趋势,当替代比例达到60%,显著低于对照组（P0.05）;饲料效率、蛋白质贮积率和能量贮积率随着饲料中棉粕含量升高而显著降低（P0.05）。通过折线法分析,在实验条件下,棉粕可以替代鱼粉蛋白的43.3%而不影响草鱼的生长。各组草鱼之间血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶和甘油三酯含量无显著差异（P0.05）;总胆固醇、高密脂蛋白胆固醇和低密胆固醇呈现下降趋势,当替代水平达到40%显著低于对照组（P0.05）。棉粕替代鱼粉蛋白显著影响鱼体的水分含量（P0.05）,当替代比例达到80%,鱼体的水分含量显著高于对照组（P0.05）;各组之间鱼体的蛋白质和灰分含量无显著性差异（P0.05）。R20组的鱼体脂肪和能量含量显著高于对照组（P0.05）,R100组的鱼体脂肪和能量含量显著低于对照组（P0.05）,其他各组之间和对照组无显著性差异（P0.05）。       

玉屏风散对鱼类非特异性免疫和免疫相关基因表达的影响

为探究传统中药玉屏风散在水产养殖上的生物学功效,在基础饲料中分别添加2.5%、5%和10%的玉屏风散和1%的芪参散配成实验饲料,饲喂实验鱼2周,然后分别观察两种中药对罗非鱼(体重约220 g)的生长、非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响以及对草鱼(体重约20 g)免疫保护率的影响。结果显示:各中药组均提高了罗非鱼增重率, 10%玉屏风散组效果最显著;各实验组中罗非鱼肝、肾、脾体指数和各血液学指标与对照组无显著差异;各中药组罗非鱼谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)含量均不高于空白对照组; 2.5%、10%玉屏风散组和1%芪参散组碱性磷酸酶(AKP)含量均高于对照组(P0.05);各药物组罗非鱼溶菌酶活性均高于对照组,且2.5%玉屏风散组与对照组差异显著(P0.05);玉屏风散各剂量组罗非鱼呼吸暴发活性均高于对照组(P0.05);罗非鱼肝脏中热休克蛋白70(HSP70)在各实验组中表达量均上调,肾脏中HSP70在2.5%和5%玉屏风散组表达量上调,脾脏中HSP70在各实验组中表达量均下调;肝脏中转化生长因子受体TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组表达量上调,肾脏中TGFRⅢ在2.5%玉屏风散组和1%芪参散组表达量上调,脾脏中TGFRⅢ在各实验组中表达量均上调;玉屏风散各剂量组能够提高草鱼对嗜水气单胞菌的抵抗能力,表现为死亡率降低和进入血液的细菌减少,其中5%玉屏风散组效果最佳。实验表明,玉屏风散能够有效促进罗非鱼生长,对其非特异性免疫指标以及免疫相关基因表达均有不同程度的促进作用,并能够有效地提高草鱼的免疫保护率。       

草鱼肠道对L-亮氨酸和L-苯丙氨酸的吸收

利用离体灌注法研究草鱼肠道对Ｌ－亮氨酸和Ｌ－苯丙氨酸的吸收规律。结果表明,草鱼肠道对两种氨基酸的吸收是一种逆浓度、需要转运载体的主动吸收方式。通过动力学特征分析表明,草鱼肠道对Ｌ－亮氨酸的吸收率强于Ｌ－苯丙氨酸,而肠道对Ｌ－苯丙氨酸的跨壁运输能力强于Ｌ－这氨酸。由氨酸酸浓度对吸收率的影响建立的动力学参数为Ｌｅｕ：Ｊｍａｘ＝０．７３２μｍｏｌ／ｇ．ｍｉｎ,ｋｔ＝５１．６０ｍｍｏｌ／Ｌ;Ｐｈｅ：Ｊｍａ