利用正交方法进行藻类细胞生长抑制试验制定稳定塘入水标准的研究

藻类细胞生长抑制试验在单项毒物条件下进行时,常未考虑毒物对藻类细胞的联合作用（拮抗效应、叠加效应和协同效应）。本研究采用单项毒物试验和多种毒物同时存在时的正交试验（Ｌ１６＜４￣５＞）,评价了进入武汉市墨水湖中试稳定塘的主要污染物（硫化物、挥发酚、石油类）对羊角月牙藻的９６ｈ的毒性效应。结果表明,正交试验的ＥＣ５０值都比单项毒物试验低得多,其９６ｈＥＣ５０降低２０－８０％,受试的几种主要污染物对藻类有协同毒性效应或叠加毒性效应。采用正交试验方法进行藻类细胞生长抑制试验以制定稳定塘的入水标准,更接近真实。     

草鱼肾脏和脾脏血细胞发育过程的观察

鱼类肾脏、脾脏是机体造血的主要器官。印迹涂片显示:草鱼肾脏和脾脏内血细胞的发育过程大致经历了三个阶段,即原始阶段、幼稚阶段、成熟阶段。本文着重描述了各阶段细胞的形态特征井对草鱼血细胞的发育及命名等问题作了初步的探讨。       

中国仓鼠与草鱼体细胞融合的一初步研究

以仙合病毒作徽合处理,在所观察的分裂相中,有。．,一1％的细胞为含两种动物染色体的新型细 胞— 鼠1鱼杂种细胞。 关徽询：中国仓鼠,草鱼,细胞融合     

草鱼AMBP基因cDNA的克隆与序列分析

α1-微球蛋白和Bikunin是由同一基因翻译表达出的两种功能不相关联的血浆蛋白。本文通过快速扩增cDNA末端的方法,首次从草鱼肝脏组织克隆了α1-微球蛋白和Bikunin前体蛋白(α1-microglobulin/Bulinin precursor, AMBP）基因全长cDNA。其cDNA全长1230bp,包含5′非翻译区23 bp,3′非翻译区160 bp和开放读码框1047 bp。开放读码框编码348个氨基酸,包含182个氨基酸的α1-微球蛋白和145个氨基酸的Bikunin。草鱼AMBP与其他物种的氨基酸序列分析结果表明,它们具有较高的同源性(44.7%－84.4%),其中草鱼与斑马鱼同源性最高(84.4%)。结果表明AMBP序列结构和α1-微球蛋白与Bikunin共翻译表达特点在动物机体中具有着重要的生理意义。     

草鱼鳃上台湾棘带吸虫囊蚴内种群的月变化

通过对草鱼鳃上台湾棘带吸虫囊蚴内种群１２个月的周期性研究,发现草鱼的感染率范围为６２．１％－１００％,感染强度范围为８．７－２２．９,囊蚴的平均密度范围为６．７－２１．４;感染率、感染强度及平均密度三项指标与水温的周期性季节变化关系不明显;囊蚴在草鱼鳃上的分布呈聚集分布,且聚集的强度随囊蚴内种群密度的增高而增高;不同组鳃叶其囊蚴的分布具有相似的月变化规律。     

鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞凋亡

采用荧光显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析等技术研究鱼呼肠孤病毒诱导草鱼细胞（ＣＩＫ）调亡。结果显示,鱼呼肠孤病毒感染ＣＩＫ细胞后,光镜下可见空斑形成;荧光染色观察到细胞调亡碎裂核;且电镜下呈现细胞核裂解,核周裂隙增大,细胞膜内陷并出泡形成调亡小体现象;琼脂糖凝胶电泳出现１８０－２００ｂｐ整数倍的ＤＮＡ梯形带;流式细胞仪检测到典型的细胞调亡峰,在病毒感染４８ｈ,细胞调亡百分率达１５     

草鱼基因组DNA一些RAPD位点的遗传分析及分子标记筛选

RAPD技术的实验结果很容易因实验条件和反应参数的不同而造成差异。为了建立能通用的草鱼基因组多态性分析RAPD分子标记体系,需要利用RAPD位点按照孟德尔共显性规律遗传的特点,用不同遗传背景的材料对多态性的RAPD位点进行统计遗传学比较分析以判断其真实性。为此,本实验选择具有遗传多态性的湘江流域草鱼群体和经连续两代人工诱导雌核发育获得的雌核发育草鱼品系,对一些可能作为草鱼基因组DNA分子标记的RAPD位点进行了遗传学比较分析。所用的10条多态性随机引物共检测到30个多态性RAPD位点。两个不同遗传背景群体的遗传统计对比分析结果表明:这30个多态位性位点在湘江流域草鱼群体和雌核发育草鱼群体中的分布符合孟德尔遗传规律,可以作为草鱼基因组DNA分析的可靠分子标记。本实验的观察结果还表明:在人工诱导雌核发育过程中,存在RAPD位点的快速丢失现象,两次人工诱导雌核发育过程中共丢失了17个多态性位点。因此,加强对自然水体中草鱼种质资源多样性的保护和利用各种现代生物学技术纯化、筛选和组合优良性状基因,是草鱼遗传育种中同样重要和不可或缺的两个方面。       

利用草鱼CIK细胞和MTT法测定镉和铬毒性试验的优化

本文利用主要养殖鱼类草鱼的肾脏细胞系CIK为靶细胞,从MTT法的细胞接种浓度、MTT 浓度及温育时间等几个重要参数,研究了对CIK细胞应用MTT法进行化合物毒性测定的条件,并根据最适条件,测定了氯化镉(CdCl2) 和重铬酸钾(K2Cr2O6) 对草鱼CIK细胞的毒性,建立了一种利用鱼类细胞系(草鱼CIK细胞) 进行化合物毒性测定的方法。由于每种细胞系各具有不同的生物学特性及对有毒物质不同的敏感性,因此该测定方法的建立,在水产养殖环境毒理的领域中,将具有一定的应用价值。       

不同发育阶段草鱼肾脏蛋白质组差异的初步分析

为了研究草鱼在不同发育阶段抗病能力差异的发育遗传学原因,以1龄草鱼和3龄草鱼的免疫器官肾脏为材料研究其在蛋白质组水平的差异。提取1龄草鱼和3龄草鱼肾脏的全蛋白,用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质的分离,染色后,扫描成像,经PDQUST软件分析,分别检测到大约900个蛋白质点。这些蛋白质点主要分布在pH4.5-7之间,其分子量大部分在66.2kDa以下。在3龄草鱼中检测到了3个在1龄草鱼中没有的差异蛋白质点,和20个上调、下调的差异点。经MALDI-TOF质谱分析和数据库搜索,证明在3龄草鱼肾脏中上调的差异点中有4个是与免疫或肾脏发育相关的蛋白质。这些初步的研究结果提示草鱼在不同发育阶段抗病能力的差异可能具有其发育遗传学基础。