茶树中2个NAC转录因子基因的克隆及温度胁迫的响应

利用茶树转录组数据库,检索得到2个NAC家族转录因子基因CsNAC1和CsNAC2。通过RT-PCR方法,将其从茶树‘迎霜’中分离克隆,利用荧光定量PCR方法,对CsNAC1和CsNAC2基因在‘迎霜’和‘安吉白茶’2个茶树品种不同组织以及温度胁迫处理下的表达进行分析,以探讨NAC家族转录因子在温度胁迫下的响应特征。结果表明:(1)CsNAC1和CsNAC2基因开放阅读框长度分别为1 044和1 047bp,分别编码347个和348个氨基酸;蛋白功能域预测和多重对比显示,CsNAC1和CsNAC2蛋白N端均含有典型NAC家族成员所具有的NAM保守结构域。(2)进化分析表明,CsNAC1和CsNAC2分别属于NAC家族的NAP和AtNAC3亚家族。(3)三维分子模型建模显示,CsNAC1和CsNAC2蛋白分别含有3个和2个α-螺旋,6个和7个β-折叠。(4)荧光定量PCR结果显示,CsNAC1在2个茶树品种中具有较相似的组织特异性,均在茶树成熟叶中表达量最高;CsNAC2则分别在‘安吉白茶’的幼叶中,‘迎霜’的根中表达量最高;高温(38℃)和低温(4℃)处理下,CsNAC1和CsNAC2基因的表达均受不同温度胁迫影响,不同茶树品种、不同时间段的表达存在差异。     

安徽农业大学

园艺学园艺学学科为我校传统优势学科,具有一级学科博士点和3个二级学科博士学位授权点(茶学、蔬菜学、果树学),1个园艺学博士后科硏流动站。茶学为国家重点学科(培育)、安徽省首批特聘教授设岗学科,省部共建茶树生物学与资源利用国     

云南茶树资源遗传多样性分析(英文)

利用EST标记对云南134份茶树资源遗传多样性和亲缘关系进行了分析.结果显示:(1)30对引物共检测到等位位点127个,平均每对引物产生4.23个;共检测到263个基因型,平均每对引物所扩增的基因型有8.8个,遗传多态性信息含量变异范围为0.014～0.736,平均达0.50l.(2)资源间的平均遗传距离和相似系数分别为0.413和0.597,聚类可将134份资源划分为4大组.(3)8个种群间的遗传相似系数变异范围为0.753～0.981,平均遗传相似系数为0.891.结果表明,云南茶树资源间的遗传差异比较大,遗传基础较宽,具有丰富的遗传多样性,而不同种间的遗传差异比较小.     

茶树CsCOR1基因的原核表达

将来自茶树的冷诱导基因CsCORI与pGEX-6p-1质粒上的谷胱甘肤-S-转移酶(GST)融合,构建为融合表达载体,最终实现了在0.8 mmol/L IPTC诱导下的原核表达,获得了36 kD的可溶性融合蛋白,为对CsCOR1基因功能的进一步研究奠定基础.     

Purification and Partial Characterization of β-Glucosidase from Fresh Leaves of Tea Plants （Camellia sinensis （L.） O. Kuntze）

β-Glucosidases are important in the formation of floral tea aroma and the development of resistance to pathogens and herbivores in tea plants. A novel β-glucosidase was purified 117-fold to homogeneity,with a yield of 1.26%, from tea leaves by chilled acetone and ammonium sulfate precipitation, ion exchange chromatography (CM-Sephadex C-50) and fast protein liquid chromatography (FPLC; Superdex 75, Resource S). The enzyme was a monomeric protein with specific activity of 2.57 U/mg. The molecular mass of the enzyme was estimated to be about 41 kDa and 34 kDa by SDS-PAGE and FPLC gel filtration on Superdex 200, respectively. The enzyme showed optimum activity at 50℃ and was stable at temperatures lower than 40℃. It was active between pH 4.0 and pH 7.0, with an optimum activity at pH 5.5, and was fairly stable from pH 4.5 to pH 8.0. The enzyme showed maximum activity towards pNPG, low activity towards pNP-Galacto, and no activity towards pNP-Xylo.     

茶树鲜花饮料澄清技术研究

茶树鲜花与茶叶具有相似的营养成分,榨汁后经调配可开发成适口性好、风味独特的鲜花饮料。对茶树鲜花饮料的壳聚糖絮凝、酶法澄清、超滤澄清效果进行了比较,结果表明,采用10万分子截留量的超滤膜处理获得能够较好的澄清效果,且对茶多酚造成的操作损失较小。     

云南茶树种质资源的研究进展及发展重点

云南是世界茶树的原产地和起源中心,茶树种质资源种类众多,遗传多样性丰富,在茶学研究中占有非常重要的地位。本文总结了60多年来云南茶树种质资源在考察征集、保存保护、鉴定评价与共享利用等方面的研究进展,阐述了云南茶树种质资源研究存在的问题及对今后发展方向的建议。提出今后应加强珍稀濒危茶树种质的收集保存、生态型及遗传多样性的研究和利用、生物技术在优良茶树种质创新的应用、优良基因的发掘和功能研究以及利用平台的构建、物种或种群保护的生物学基础等重点领域的研究。     

茶树α-tubulin基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立

目的:建立茶树α-tubulin基因实时荧光定量RT-PCR方法。方法:根据GenBank中茶树α-tubulin基因保守区域设计一对特异性引物,将PCR扩增得到的α-tubulin基因克隆到pTG19-T载体上,构建的重组质粒标准品经1/10梯度稀释后,用SYBR GreenⅠ染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析。结果:标准曲线Ct值检测范围为14.56~27.09,相关系数为0.991,溶解曲线分析显示产物为特异的单峰,其Tm值为81±0.3℃。结论:建立了茶树α-tu bulin基因实时荧光定量RT-PCR法,为以α-tubulin作为茶树内参基因进行功能基因表达差异研究奠定了基础。     

生物他感作用在防治茶树病虫草害中的初步探究

1研究背景 1．1康县阳坝茶树生长环境概况 康县位于陇南地区东南部,它东临陕西省,南接四川省,气候终年湿润温暖,年降水量在1000毫米以上,平均气温在15℃以上,森林覆盖面广,土质酸性较重,湿度、温度、土壤极利于茶树的生长。     

茶树种子脱水过程差异基因的研究

利用cDNA-AFLP方法在转录水平上对茶树无性系龙井43种子脱水前后基因表达的变化进行分析,探讨脱水差异和生物学中的衰老与死亡的联系,并为茶树等顽拗型种子植物的种质资源保存提供理论依据.结果显示:64对引物组合产生87条差异条带.对其中的6条克隆测序,发现4条与已知功能基因相关,包括植物衰老蛋白、PPR、硫氧还蛋白,翻译控制肿瘤蛋白,其中硫氧还蛋白在茶树种子中首次被发现.