SAHA对TGF-β诱导人胚肺成纤维细胞α-SMA蛋白及前胶原蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨在转化生长因子-β 1(TGF-β1)刺激下,组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对人胚肺成纤维细胞系HELF向肌成纤维细胞(MF)分化时,α-SMA蛋白及前胶原蛋白mRNA表达的影响.方法:体外培养人胚肺成纤维细胞系HELF,并根据不同的实验目的分为空白对照组,TGF-β1处理组以及SAHA干预组.细胞处理结束后,用Western blot检测α-SMA表达,RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原的mRNA表达水平.结果:空白对照组中几乎无α-SMA蛋白表达,TGF-β1处理后α-SMA水平显著增高,而SAHA能有效降低α-SMA的水平.SAHA孵育24h后,能够明显抑制TGF-βl刺激后的细胞表达Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白mRNA,并且具有明显的剂量依赖性.结论:SAHA能降低TGF-βl诱导HELF细胞向MF转化时α-SMA表达以及前胶原蛋白表达.     

产邻苯二酚工程菌的构建及发酵条件的优化

从实验室保存的一株能高效降解苯胺的不动杆菌中克隆到完整的苯胺双加氧酶基因簇,序列分析表明该基因簇包含6个完整的ORF,全序列与已报道的不动杆菌YAA的苯胺双加氧酶基因簇在氨基酸水平上有较高的同源性。将该基因簇连接于pLAFR6载体,电转化至E.coli,构建了该基因簇的工程菌。发酵条件优化表明,在苯胺浓度0.5mg/mL,采用pH7.0的LB培养基,E. Coli DH5α为宿主菌,于37℃培养,接种量为3％的条件下,邻苯二酚产量在20h达到0.546mg/mL,底物分子水平转化率可达92.4％。     

高通量脂肪酶稳定性测定法-ANS法的建立

根据蛋白质变性后结构变化的特点和荧光探针8-苯胺基-1-萘磺酸 (8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS) 的特性,建立了一种快捷而准确的脂肪酶热稳定性 (Tm) 测定的新方法——ANS脂肪酶稳定性测定法,即将脂肪酶在25 ℃~65 ℃的不同温度下保温30 min后,加入到ANS反应体系 (0.2 mg/mL酶蛋白,0.05 mmol/L ANS,20 mmol/L Tris-HCl (pH 7.2),100~500 mmol/L NaCl) 中。在激发波长378     

对—氯代苯胺（PCA）在填充床生物反应器中的降解作用

以氯代苯胺（ＰＣＡ）为选择基质,用驯化技术从降解对二氯苯（ｐＤＣＢ）的富集培养物中得到了以同化ＰＣＡ为唯一碳源和氮源的混合微生物．将这种固定在填充床反应器中的微生物用于ＰＣＡ的降解作用研究中．在该反应器里,ＰＣＡ的生物降解遵循Ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程ｑ＝ｑｍａｘ／（１＋ｅα－βＵｖ）．由方程求出了主要的动力学常数,Ｋｓ（半速率常数）和ｑｍａｘ（最大比基质降解速率）．于ＰＣＡ降解的同时,释放氯离子到培养基中．在水力停留时间３ｈ,进水ＰＣＡ浓度为３６０ｍｇ·Ｌ－１情况下,基质的体积降解率达到１２５ｍｇ·Ｌ－１·ｈ－１;基质的百分去除率为９１％．     

甲烷利用细菌HG06的筛选鉴定及其对三种有毒物质降解的研究

通过传统微生物学方法,从广西玉林市广西玉林师范学院西校区池塘里土壤中筛选到一株甲烷利用细菌HG06,能以甲烷为惟一碳源和能源的无机培养基上生长.通过形态观察及16S rRNA编码序列同源性比较分析,该菌株初步鉴定为甲基孢囊菌.同时对HG06菌株在不同温度、pH值的生长条件进行研究,初步确定了HG06的最适生长的温度为32℃,最适pH值为7.0.TCE最高的耐受浓度为30mg/L;苯胺最高的耐受浓度为1 500mg/L;苯酚最高的耐受浓度为800mg/L.该菌在环保上有一定的应用价值.     

处理印染废水的厌氧折流板反应器中的微生物种群组成及分布规律

设计出一个由12个隔室组成的厌氧折流板反应器(ABR),并将其应用于高浓度、高色度的印染废水生物处理,取得了良好效果。研究着重考察该反应器在处理印染废水过程中不同隔室的微生物种群构成,并分析与印染废水处理效率密切相关的具有脱色功能和苯胺降解功能的两类细菌的分布规律。结果表明,在处理印染废水的ABR反应器中,可培养的优势菌群以芽孢杆菌属(Bacillus)、不动杆菌属(Acinetobacter)、丛毛单胞菌属(Comamonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)和水螺菌属(Aquaspirillum)为主,且在ABR的前段、中段及后段隔室中不同种类的优势菌群存在数量差异;好氧及兼性厌氧优势菌群的数量随着废水在ABR隔室中的折流前进而逐渐减少;厌氧微生物的数量变化规律则是先增多,后减少;产甲烷活性在前段隔室中相对较低,后段隔室则相对较高。脱色菌在ABR的前段隔室中分布相对较多,后段隔室中分布相对较少;苯胺降解菌则呈现出在前段隔室中分布相对较少,后段隔室中分布相对较多的规律,这两类功能菌的分布与ABR不同隔室中色度下降、苯胺产生和消减之间密切相关。     

紫外分光光度计法与酶标仪微量法测定酚氧化酶蛋白含量及活力的比较

分别采用紫外分光光度计比色法与酶标仪微量法测定菜青虫Pieris rapae(L.)体内酚氧化酶蛋白含量和活力,以水杨醛缩对硝基苯胺为抑制剂,对2种方法的结果进行比较。结果表明,微量法和比色法在检测酚氧化酶(PO)蛋白含量、酶活力和抑制剂对PO抑制作用时结果无显著性差异。因此,微量法可以替代比色法,使用试剂量大大降低,重复性好,操作简单、快捷。     

全反式维甲酸联合辛二酰苯胺异羟肟酸诱导MCF-7 细胞凋亡

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)和辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)单独及联合应用对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法:培养人乳腺癌MCF-7细胞,待细胞进入对数生长期,加入一定浓度的ATRA和(或)SAHA,采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。结果:ATRA和SAHA单药及联合应用早期凋亡率均高于对照组,但24 h时测得联合组早期凋亡率低于单药组,48 h、72 h联合组早期凋亡率高于SAHA组却低于ATRA组,差异均有统计学意义(P0.05);联合组死亡细胞和晚期凋亡细胞率之和高于单药组及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:ATRA和SAHA单独或联合作用于乳腺癌MCF-7细胞均可促进细胞凋亡,两药联合应用时诱导细胞凋亡作用更强。     

一株苯胺降解菌的分离及其苯胺降解特性的研究

目的:筛选高效苯胺降解菌并研究其降解特性,为利用微生物进行苯胺环境污染物修复奠定基础.方法:利用含苯胺的A15培养基分离筛选苯胺降解菌,探讨苯胺降解最佳条件、降解代谢途径,利用16S rDNA基因扩增测序法对株菌进行分子鉴定.结果:获得了一株以苯胺为惟一碳源、氮源生长的高效苯胺降解菌AN6-4.该菌降解苯胺的最高浓度为2500mg/L,降解苯胺的最适温度和pH值分别为30℃、7.0;该菌在60h内可以将1500mg/L浓度的苯胺完全降解;重金属离子对该菌株降解苯胺有不同程度的抑制作用;代谢机制研究表明,该菌株可以诱导合成邻苯二酚-2,3-双加氧酶并分泌到胞外降解苯胺;16S rDNA基因序列同源性比较结果表明该菌属芽孢杆菌的一种.结论:所获得的苯胺降解菌对于研究苯胺降解机制和苯胺环境污染物的生物修复具有重要的理论和潜在应用价值.