Bt群体信号应答因子nprR基因的缺失对cry1Ac基因表达的影响

摘要：【目的】研究群体信号应答蛋白编码基因nprR在苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）HD-73菌株晶体蛋白形成过程中的作用。【方法】通过同源重组,构建了HD-73 nprR基因缺失突变菌株HD73（ΔnprR ）。利用启动子-lacZ融合、SDS-PAGE方法,测定不同培养基中nprR基因转录活性及nprR基因缺失对cry1Ac转录及表达的影响。【结果】启动子转录活性分析表明,在LB和SSM培养基中nprR基因从对数期结束（T0）开始表达,稳定期持续表达。在LB培养基中,nprR基因的缺失使cry1Ac基因在生长过渡期和稳定期前期转录活性显著提高,同时HD73（ΔnprR ）菌株Cry蛋白生成量也明显高于出发菌株HD-73,但是在芽胞形成释放后,Cry蛋白的表达没有明显的区别。【结论】在丰富培养基中苏云金芽胞杆菌nprR基因的缺失在生长过渡期和稳定期前期能够提高cry1Ac基因转录和表达,从而缩短了cry基因表达时间,并且Cry蛋白总产量与出发菌株相当。     

铁皮石斛茎段诱导丛生芽的研究

以铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.的茎段作外植体,比较不同的培养基、激素等因素对茎段分化丛生芽的影响,以及不同浓度的香蕉汁和活性炭对试管苗生根的影响。结果表明：1／2MS较好,BA作用优于KT、ZT,最适浓度为2．0mg/L;丛生芽培养于1／2MS 10％香蕉汁 0．5％AC的培养基上,生根效果最好。     

海水养殖区甲胺磷降解菌的分离筛选及降解特性的研究

目的 分离、筛选降解海水养殖区甲胺磷的降解菌及确定最适的降解条件.方法 从被有机磷污染的海水样中分离,以有机磷为唯一碳源反复驯化,分离筛选出1株高效降解甲胺磷的菌株M-1,并对其降解能力和所需条件进行测试.结果 初步鉴定菌株M-1属于蜡样芽胞杆菌,菌株M-1最适生长温度和pH分别为25和8.0.Zn^2＋（200 mg/L）,Cd^2＋（50 mg/L）与pb^2＋（200 mg/L）不影响菌株M-1对甲胺磷的降解作用,但Cu^2＋（50mg/L）,Cr^2＋（50 mg/L）对菌株M-1有毒性作用.结论 海洋微生物在甲胺磷污染的海水养殖区自净中起着重要作用.     

芽胞杆菌属产α-淀粉酶的研究进展

α-淀粉酶是一种重要的淀粉水解酶,可以从动物、植物或微生物中获得。但应用于工业生产的α-淀粉酶绝大多数来自芽胞杆菌。自α-淀粉酶工业化生产以来,研究人员针对其生产菌株芽胞杆菌进行了一系列的诱变选育和基因工程等分子生物学育种,使得菌种的产酶能力不断得到提高。另外,优化芽胞杆菌发酵培养基及发酵参数也是提高α-淀粉酶工业化生产产量的重要方法。     

利用新型雾化生物反应器培养青蒿不定芽生产青蒿素

利用新型的超声雾化内环流生物反应器进行青蒿（ＡｒｔｅｍｉｓｉａａｎｎｕａＬ．）不定芽多层培养生产青蒿素。在新型内环流超声雾化生物反应器中,营养雾沿中心导流筒上升并由其顶端和各开孔处溢出后从环隙落下,２～３ｍｉｎ营养雾充满整个反应器。青蒿不定芽在此反应器中生长健壮,形态正常,无玻璃化现象产生,在培养后期,青蒿不定芽长满整个培养空间,部分不定芽可生根。当雾化周期为３ｍｉｎ／９０ｍｉｎ（雾化时间／间隔时间）,通气量为０．５Ｌ／ｍｉｎ时,经２５ｄ分批培养,青蒿素产量为４６．９ｍｇ／Ｌ,分别为固体培养和摇瓶培养的２．９和３．２倍。     

崖白菜的愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导不定芽发生途径,建立了崖白菜的组培再生体系,研究了崖白菜幼嫩子房和不同植物生长调节剂对其愈伤组织诱导和不定芽发生的影响。结果表明,以崖白菜的幼嫩子房作为外植体,诱导子房分化形成愈伤组织的最适培养基为MS＋6．BA1．0mg·L-1＋2,4-D0．2mg·L-1,诱导率可达82．83％;最适的不定芽分化培养基为Ms＋6-BA0．5mg·L-1＋NAA0．1mg·L-1;诱导不定芽生根的最适培养基为1／2MS＋NAA0．1mg·L-1。     

沙田柚不同外植体离体培养与植株再生的研究

利用组织培养进行柑桔良种的快速繁殖可以克服常规方法费时的缺点 ,为进一步进行无病原体苗木繁育、诱变育种及遗传转化创造有利条件。目前我国开展此项工作较为广泛 ,已先后在红江橙 [1 ]、柠檬 [2 ]、金柑 [3]、甜橙 [4]及蕉柑 [5]等柑桔类中建立了组织培养的再生体系 ,但在柚类中相关的研究较少。笔者以沙田柚为材料 ,在离体培养条件下 ,成功诱导上下胚轴、根段及子叶的不定芽形成和植株再生。1 　材料与方法1 .1 　植物材料沙田柚种子 ( Citrus grandis Osbeck cv.Shatian Yu)经表面消毒后黑暗培养无菌苗 ,当苗长至 2 0 d左右时 ,将上…     

土地类芽胞杆菌(Paenibacillus terrae)NK3-4 EsxA结构与系统发育分析

前期研究在植物根际促生菌土地类芽胞杆菌(Paenibacillus terrae )NK3-4中发现一个EsxA编码基因,为明确该基因编码的蛋白的性质、结构及系统发生关系,对该基因进行了生物信息学分析。分析表明,该EsxA含有91个氨基酸,分子质量10 276.53 Da,理论pI 5.29,分子式为C₄₄₅H₇₁₁N₁₂₅O₁₄₆S₄,弱酸性,亲水,具有WEG保守基序,属于WXG超级家族成员;建模预测表明,自然状态下EsxA 形成不对称的同源二聚体,其中每个亚基都由一个β折叠连接两个α螺旋组成,两个α螺旋反向平行排列;二聚体中两个亚基的肽链呈反向排列,所有N末端和C末端均暴露在外,形成棒状表面形态,其中一个亚基的N端的不规则卷曲形成与棒状二聚体垂直的短柱形凸起;系统发育分析显示,EsxA在种内及种间进化关系虽是不保守的,但类芽胞杆菌源的EsxA与病原细菌的EsxA同源性较低,暗示类芽胞杆菌源EsxA可能与病原微生物的EsxA具有截然不同的功能。结果为包括NK3-4菌株在内的类芽胞杆菌属EsxA外源分泌表达条件,活性保持及功能的深入研究提供了理论依据。     

苏云金芽胞杆菌V4菌株cry杀虫基因的鉴定、表达及杀虫活性分析

旨在给生物防治提供更多的基因资源,以从本实验室分离的300株苏云金芽胞杆菌基因组为模板,利用cry1类全长通用引物进行PCR cry1类基因鉴定。经过PCR-RFLP鉴定出菌株V4含有cry1Ea基因,进一步研究发现该菌株还含有cry2Aa基因,并成功克隆到了这两个新基因,被Bt国际命名委员会正式命名为cry1Ea12和cry2Aa16。将两种基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,表达蛋白进行杀虫活性测定,结果表明两种蛋白杀虫活性不理想,但对试虫存在明显的体重抑制,而V4菌株蛋白具有较高的杀虫活性。     

鞑靼滨藜幼嫩花序的组织培养及植株再生

1 植物名称 鞑靼滨藜（Atriplex tatarica L．）。 2 材料类别 幼嫩花序。 3 培养条件 （1）不定芽诱导和增殖培养基：MS＋6-BA 3mg·L^-1（单位下同）＋IAA0．3;