原代小鼠肺微血管内皮细胞的培养及鉴定

目的建立一种简单高效的小鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法。方法选取2～3周ICR小鼠,剪开胸腹腔,取距离肺边缘约1.5mm组织,剪碎成米粒状,置于含有培养液的离心管中,离心洗涤后种瓶进行原代培养。通过细胞形态学观察、细胞Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色鉴定所培养的细胞。结果接种24h后,红细胞从贴壁的肺组织块边缘向四周游离;48h后,肺微血管内皮细胞爬出,单个细胞形态为多角形或短梭形,细胞间隙较大,胞核清晰,胞浆丰富;96h后细胞融合,呈典型的单层、铺路石样镶嵌式排列。细胞Ⅷ因子免疫细胞化学染色检测,胞质呈棕红色,表达为阳性,阳性细胞率达98%以上。结论随机组织块法能够成功高效分离培养出原代小鼠肺微血管内皮细胞。     

植物肉桂酰辅酶A还原酶基因克隆研究进展

木质素单体合成的过程中涉及了许多酶的参与,而肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是该过程中的一个关键酶。综述了CCR基因在植物体内的克隆、基因功能及在植物组织中的表达情况,并介绍了该基因在植物的抗病虫害和抗逆性研究、饲草和能源上的应用潜力,为进一步研究CCR基因生物学功能和利用奠定了基础。     

扶桑绵粉蚧组织蛋白酶B基因的克隆、原核表达和不同发育阶段表达分析

昆虫组织蛋白酶B在昆虫代谢过程中发挥重要作用。本研究利用RACE技术克隆了扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley组织蛋白酶B基因的开放阅读框（ORF）序列, 命名为PsCb （GenBank登录号: JQ727999）。生物信息学分析表明, 该基因的开放阅读框包含927 bp的片段, 编码308个氨基酸。多序列比对表明, 该基因编码的蛋白在N端变异较大, 在C端保守性高。组织蛋白酶B基因的系统进化树结果表明扶桑绵粉蚧组织蛋白酶独自成为一支。原核表达电泳检测到一条大约35 kDa的目的条带, 与预测的蛋白分子量相符。组织蛋白酶B基因在扶桑绵粉蚧各个虫态均有表达, 卵期表达量相对较低, 2龄若虫期达到最高峰, 然后下降。本研究为进一步研究该基因的功能并开发出组织蛋白酶抑制剂, 从而研制出扶桑绵粉蚧杀卵剂和胚胎发育抑制剂等提供理论依据。     

不同激素及其不同配比对绞股兰愈伤组织诱导的统计学分析

绞股兰的茎段和叶碎片外植体可在合适的激素调节诱导下形成愈伤组织．通过含有不同水平激素的MS培养基对绞股兰愈伤组织诱导试验,经统计学分析,可以找出对绞股兰脱分化形成愈伤组织细胞影响显著的激素及其适宜的激素水平．     

苹果园中凹唇壁蜂和紫壁蜂的生态位比较研究

本文对凹唇壁蜂Osmia excavata Alfken和紫壁蜂O.jacoti Cockerell的时间、空间、营养和筑巢生态位进行了研究。结果表明,在苹果园内人工释放和管理条件下,两种壁蜂在不同的资源序列上具有不同的生态位宽度、生态位重叠和不同程度的竞争关系。其中在营养上的竞争最为激烈,生态位重叠值和种间竞争系数分别高达0.9690和0.9994。日活动时间生态位竞争次之,其重叠值和种间竞争系数分别为0.7960和0.9350;时间生态位(季节)和空间生态位重叠值则分别为0.6500和0.6710,种间竞争系数为0.8213和0.8234;并且在人工巢管的选择上竞争性最小,生态位重叠值仅为0.4930,种间竞争系数为0.6052。凹唇壁蜂在营养生态位和时间生态位上较高的专一性均表现出其比紫壁蜂对苹果传粉作用更为显著。紫壁蜂在苹果开花后期的传粉作用较强。     

负压状态下压力变化导致鲫鱼身体组织的损伤

通过试验研究负压状态下压力变化过程对鲫（Carassius auratus auratus)的损伤,试验采用真空泵和空气压缩机在试验容器内形成不同的压力变化过程,统计不同体长的鲫经历压力变化过程后的损伤情况,并对部分受损伤的鲫进行解剖和组织观察。研究发现负压状态下压力时变导数较大的变化过程会对鲫的生存构成直接威胁,主要损伤是鱼鳔部分或全部受损,在肝胰脏、肾脏等处有明显出血点。综合分析不同试验条件对鲫损伤的情况,得到了对鲫尽可能安全的压力时变导数极限值,从而为新型环保水力设施的设计提供参考依据,起到保护渔业资源的作用。     

一个光合组织特异表达强启动子的分离及功能分析

用接头PCR技术克隆了长度为1415 bp的PNZIP基因启动子, 该启动子具有真核生物启动子的典型特征, 引物延伸实验证明转录起始位点位于翻译起始位点上游122 bp处. 根据PNZIP基因启动子的序列特征, 利用PCR技术对该启动子进行了有目的的缺失, 将5个长度不同的启动子片段分别与报告基因GUS相连接, 构建植物表达载体, 转化烟草. 荧光定量检测结果表明: 5个不同长度的PNZIP启动子均能驱动GUS基因在光合组织中专一表达, 它们的活性随着启动子5′端的逐步缺失而不断地下降; 在叶片组织中长度为1415 bp的PNZIP启动子活性比35S启动子高9倍; PNZIP启动子中存在2个可能与光合组织特异表达有关的新的顺式作用元件, 即GAAATA和GATACT, GATACT元件可能决定基因的光合组织特异性表达, 而GAAATA可能作为增强子提高基因在光合组织的表达强度.     

Those amazing dinoflagellate chromosomes

Dinoflagellates are a very large and diverse group of eukaryotic algae that play a major role in aquaticfood webs of both fresh water and marine habitats. Moreover, the toxic members of this group posea health threat in the form of red tides. Finally, dinoflagellates are of great evolutionary importance,because of their taxonomic position, and their unusual chromosome structure and composition. While the cytoplasm of dinoflagellates is typically eukaryotic, the nucleus is unique when compared to the nucleusof other eukaryotes. More specifically, while the chromosomes of all other eukaryotes contain histones,dinoflagellate chromosomes lack histones completely. There are no known exceptions to this observation: all dinoflagellates lack histones, and all other eukaryotes contain histones. Nevertheless, dinoflagellates remain a relatively unstudied group of eukaryotes.