丝裂原活化蛋白激酶基因CfMKK1调控果生炭疽菌的生长发育和致病力

【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶产量下降。本文研究果生炭疽菌中丝裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物学功能,旨在为解析油茶炭疽病菌的致病机理提供依据。【方法】根据同源重组原理构建CfMKK1基因敲除载体片段,采用PEG介导法将载体导入原生质体中筛选获得突变体菌株DCfmkk1;PCR扩增果生炭疽菌含有启动子的CfMKK1基因回补片段,构建回补载体pYF11::CfMKK1;采用PEG介导法把回补载体转化至突变体的原生质体中,荧光筛选回补菌株ΔCfmkk1-C。测定野生型菌株、突变体菌株DCfmkk1及基因回补菌株ΔCfmkk1-C在营养生长、附着胞形成、胁迫应答和致病力等生物学表型。【结果】与野生型和回补菌株相比,CfMKK1基因敲除突变体ΔCfmkk1菌丝生长速率明显减缓;在含刚果红的PDA培养基上菌丝生长受到明显抑制,无法穿透玻璃纸,丧失了侵染寄主的能力;而且无法形成附着胞。【结论】研究结果表明CfMKK1基因参与调控油茶果生炭疽菌的生长发育、附着胞形成、致病力以及响应外界胁迫过程。     

不同条件下几种虫生真菌对棉铃虫的侵染致病效应

用 5种真菌共 10个菌株 ,分别对不同虫龄和生理状态的棉铃虫幼虫 ,采用不同的孢子剂量 ,设置不同的温度进行了毒力测定 ,结果表明 :(1)球孢白僵菌和莱氏野村菌两个菌种对棉铃虫有明显的防治效果 ,且前者优于后者 ;在白僵菌中 5 S0 3菌株毒力最高 ,对棉铃虫 1- 2龄幼虫的致死中时 (L T50 )为 6 .70 - 7.0 2 d,校正死亡率为 86 .96 % - 91.30 % ,僵虫率为 2 0 .0 0 % - 36 .6 7%。 (2 )同一菌株对不同生理状态的棉铃虫毒力差异显著 ,刚脱皮幼虫极易受感染 ,僵虫率高达 85 .71% ,;同一菌株 (5 S0 3)对棉铃虫 1- 2龄与 3- 4龄幼虫的校正死亡率相差 35 %以上 ,L T50 相差 4 d多 ,低龄幼虫较为敏感。 (3) 5 S0 3防治棉铃虫的最适浓度为 7.8× 10 7孢子 / m l,最适温度为 2 0 - 2 5℃。     

铁磁热籽加温治疗肿瘤的研究

热疗治疗肿瘤是应用各种致热源的热效应,将肿瘤加热至有效治疗温度范围并维持一定时间,以杀灭肿瘤细胞的一种方法。本探讨了用于加温治疗肿瘤的铁磁热籽在治疗时的加热原理和自控温机制。与目前几种加温方式和测温方式的相比,得出铁磁热籽在肿瘤治疗中利用感应加温有效的克服了其它加温方式的缺点,并且利用居里点效应实现了、自控温。因此,有着诱人的前景。     

642株自胆道分离病原菌的病原学分析

目的调查引起胆道感染的主要致病细菌群分布及耐药性状况。方法用WHONET统计软件回顾性分析2000年1月至2004年12月5年问引起胆道感染的致病细菌的特点。结果5年问共分离出642株细菌,阳性率为20．1％;其中革兰阴性杆菌354株,革兰阳性球菌288株。分离率最高的革兰阴、阳性细菌分别为：肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和屎肠球菌。药敏统计结果显示各主要致病革兰阴性杆菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦和头孢吡肟总的敏感率最高。各主要革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁的总的敏感率最高。结论引起胆道感染的致病细菌发生明显的变迁．革兰阳性球菌的构成比有逐渐升高的趋势,胆道手术应合理进行预防性用药,以有效控制胆道感染。     

白假丝酵母天冬氨酸蛋白酶研究进展

白假丝酵母是免疫功能低下宿主条件致病感染中最常见的病原真菌之一,目前基本已肯定分泌型天冬氨酸蛋白酶(s印)在其致病过程中具有重要作用。现将近年来有关白假丝酵母Sap的研究从其编码基因、分子特性和表达以及在白假丝酵母致病中的作用等作一综述。     

Identification and analysis of genes present in Leptospira interrogans serovar lai but absent in L. biflexa serovar monvalerio

Genes present in virulent bacterial strains but absent in avirulent close relatives can be of great biologic and clinical interest. This project aimed to identify strain specific DNA sequences of Leptospira interrogens serovar lai, which is absent in the saprophytic L. biflexa serovar monvalerio, via suppression subtractive hybridization with the former as the tester while the latter as the driver. The mixture of PCR amplified DNA fragments from two subtractive hybridization experiments were cloned into pMD 18-T vector and the positive clones were identified by dot blotting against the chromosome DNA of the two strains individually. After DNA sequencing and analysis, the distribution of these genomic fragment sequences in a panel of pathogenic and nonpathogenic leptospires was investigated employing dot blot analysis. Among the 188 positive clones randomly chosen, 24 contained the tester strain specific genomic regions, of which, 5 were non-coding fragments while the others contained 23 distinct protein coding sequences. Besides 9 genes encoding functional proteins, 12 genes encode unknown proteins and the rest two genes encode proteins with recognizable domain structures, one for a putative leucine-rich repeats (LRR) family protein while the other as an outer-membrane protein. Our experiment results indicated that suppression subtractive hybridization is effective for screening specific DNA sequences between two leptospiral strains, and some of these sequences might be responsible for virulence determination. Further analysis of these DNA sequences will provide important information on the pathogenesis of Leptospira.     

丁香假单胞菌猕猴桃致病变种的遗传多样性及进化关系

猕猴桃细菌性溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害,在世界各大猕猴桃产区发病严重。引起该病的病原菌为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.Actinidiae,Psa)。综合当前国内外关于该病原菌的相关研究,就其分类地位、遗传多样性及起源进化等方面进行了系统综述。     

烟曲霉关键致病因子研究进展

烟曲霉是侵袭性真菌病常见的致病菌之一。近年来一些细胞表面蛋白（如GPI锚定蛋白）以及分泌的毒素被认为是烟曲霉的关键致病因子。现从烟曲霉的细胞壁蛋白、多糖,细胞外基质成分,烟曲霉的分泌产物几方面综述已发现的烟曲霉关键致病因子,并对未来的研究方向进行展望。     

结核分枝杆菌的致病机理

结核病仍是全球健康的主要威胁,其致病菌结核分枝杆菌的致闰机理与众不同。脂类代谢在致病中具有重要的作用。巨噬细胞被入侵的细菌修的机理也是研究细菌持续感染致病的重要突破点,研究细菌的致病机理可以为开发新的疫苗和治疗药物奠定坚实的基础。     

柑橘溃疡病菌II型分泌通道基因xpsD突变体的鉴定及功能分析

【目的】鉴定柑橘溃疡病菌胞外水解酶减弱突变体Mxac56-20的Tn5插入位点,及其在柑橘上的致病力。【方法】采用质粒拯救方法获得Tn5旁侧序列,与基因组信息比对后明确突变体的插入位点;构建功能互补载体对突变体进行功能互补,检测互补菌株胞外蛋白水解酶、纤维素酶和淀粉酶的恢复情况;在寄主植物柑橘上观察致病力变化。【结果】Mxac56-20的Tn5插入位点是II型分泌系统xpsD基因,所构建的互补载体使突变体的胞外水解酶活性和致病力得到恢复。【结论】柑橘溃疡病菌xpsD基因的突变,导致胞外水解酶活性降低,在寄主上的致病力减弱,说明柑橘溃疡病菌的II型分泌系统在与寄主互作过程中起到致病因子的作用。