全文获取类型
收费全文 | 717篇 |
免费 | 40篇 |
国内免费 | 313篇 |
出版年
2024年 | 8篇 |
2023年 | 34篇 |
2022年 | 35篇 |
2021年 | 34篇 |
2020年 | 34篇 |
2019年 | 26篇 |
2018年 | 15篇 |
2017年 | 13篇 |
2016年 | 19篇 |
2015年 | 35篇 |
2014年 | 71篇 |
2013年 | 42篇 |
2012年 | 51篇 |
2011年 | 44篇 |
2010年 | 50篇 |
2009年 | 42篇 |
2008年 | 147篇 |
2007年 | 30篇 |
2006年 | 39篇 |
2005年 | 56篇 |
2004年 | 45篇 |
2003年 | 37篇 |
2002年 | 28篇 |
2001年 | 28篇 |
2000年 | 13篇 |
1999年 | 14篇 |
1998年 | 8篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 5篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 10篇 |
1992年 | 5篇 |
1991年 | 6篇 |
1990年 | 9篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 2篇 |
1987年 | 2篇 |
1985年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 3篇 |
1966年 | 2篇 |
1963年 | 1篇 |
1959年 | 2篇 |
1950年 | 1篇 |
排序方式: 共有1070条查询结果,搜索用时 15 毫秒
91.
你漂浮在空中,头晕、恶习、脸肿胀而腿变细,你觉得浑身无力,肌肉和骨骼在一点一点慢慢消失……这不是哈里·波特的魔法,而是航天员在太空中的真实感受。 相似文献
92.
【目的】研究表明,细胞色素P450(CYP)在死体营养型真菌的毒素合成代谢中发挥重要作用,预测可能与病原菌致病相关。论文对苹果树腐烂病菌(Valsa mali)毒素合成基因簇中的1个上调表达的CYP基因Vmcyp5进行生物学功能研究,明确CYP基因对病原菌致病力影响,为细胞色素P450基因家族对苹果树腐烂病菌致病机理的进一步研究提供依据。【方法】通过Double-joint PCR和PEG介导的原生质体转化技术获得具有G418抗性的突变体,并对突变体进行PCR检测及Southern blotting验证得到单拷贝敲除突变体。将目的基因片段重新导入敲除突变体,筛选获得互补突变体。最终对野生型菌株及敲除突变体、互补突变体进行菌落、产孢及致病力观察,利用SPSS软件对数据进行差异显著性分析,并利用q RT-PCR技术分析突变体黑色素基因簇的表达水平。【结果】通过基因敲除技术获得1个Vmcyp5基因的敲除突变体。与野生型菌株相比,Vmcyp5基因的敲除突变体菌落呈白色,产孢量减少51.3%。q RT-PCR分析发现敲除突变体黑色素基因簇基因表达量降低。重要的是,敲除突变体致病力较野生型菌株降低24.5%。互补突变体菌落颜色、产孢及致病力近似恢复至野生型菌株水平。【结论】Vmcyp5基因与病原菌黑色素合成、子实体的产生和致病力相关。 相似文献
93.
炭疽病是油茶的主要病害,造成巨大经济损失。果生刺盘孢是油茶炭疽病优势致病菌。本研究旨在探讨果生刺盘孢中组蛋白乙酰化转移酶Rtt109的生物学功能,为油茶炭疽病防治提供理论依据。通过构建基因敲除载体,根据同源重组原理,敲除目标基因CfRTT109,进一步筛选获得突变体ΔCfrtt109;构建CfRTT109基因回补质粒,转化至突变体ΔCfrtt109,通过荧光筛选回补菌株。生物学表型测定结果显示:相比于野生型,突变体ΔCfrtt109生长速率下降了51.23%,分生孢子的形成率下降了71.89%;在含有5.0mmol/L内质网胁迫剂二硫苏糖醇的PDA培养基中,突变体ΔCfrtt109的生长抑制率为50.75%,显著高于野生型和回补菌株;荧光定量PCR结果表明,与野生型和回补菌株相比,内质网相关的基因HAC1、SCJ1与PDI1基因在突变体中显著上调表达;在含有DNA损伤试剂甲基磺酸甲酯的PDA培养基中,突变体ΔCfrtt109停止生长;进一步研究发现,在甲基磺酸甲酯胁迫下,突变体ΔCfrtt109中的DNA损伤修复基因RHM52、RHM54与REV1表达量上调幅度显著低于野生型;致病力测... 相似文献
94.
黄翠芬 《中国生物工程杂志》1990,10(5):1-5
引起腹泻的细菌主要有大肠菌、志贺氏痢疾菌、沙门氏伤寒菌、霍乱弧菌等。国内外针对这些菌的致病因子,用生物新技术研制疫苗巳获得良好的进展。本文针对当前的进展,对广谱预防腹泻疫苗的必要性与可能性提出了看法。 相似文献
95.
<正> 位于美国布法罗的纽约州立大学中的Roswell Park Memorial Institute(RPMI)探索出一种制备疫苗的新方法,这为制备疫苗防治癌症之类的疾病开辟了新途径。以往用疫苗防治癌症未获成功。常规疫苗以弱的或死的致病微生物为基础,这些致病微生物是全部抗原或抗原的一部分,而新的疫苗却不是这样,新疫苗是以抗体防治个体决定簇。个体决定簇是 相似文献
96.
链格孢菌原生质体的制备与限制性内切酶介导整合(REMI)转化的致病性诱变 总被引:10,自引:0,他引:10
以链格孢菌Alternariaalternata菌株NEW为供试菌株,研究了菌龄、酶系统、酶解时间、酶解温度及稳渗剂对链格孢菌原生质体制备的影响。结果表明,制备链格孢菌原生质体比较适宜的条件为PD液体培养基培养20h,以0.7mol/LNaCl为稳渗剂、1%LysingEnzyme、1%Drislase和1%Snailase3种酶溶液混合使用,30℃酶解3h。对原生质体进行了限制性内切酶介导整合(REMI)转化,筛选到了链格孢菌弱致病突变株NEW001,为致病相关基因的标记和克隆打下了基础。 相似文献
97.
全球变化与野生物种:观测和预测 总被引:2,自引:0,他引:2
由于人类活动的影响,世界正在变暖。迅速的全球变化很可能对野生物种产生巨大影响,同时伴随着城市化、农垦和造林实践所引起的自然生境的丧失和破坏。观测和预测的气候变化对野生物种的影响着眼于4个方面:生活史的时间、物种分布与种群格局、迁移对策以及重要地点。许多物种可能因气候的变化而灭绝,而气候变化所造成的野生物种分布的变化很可能对人类产生长期久远的影响。 相似文献
98.
简要综述了目前根瘤菌结癌基因研究的3个热点方向,即结瘤因子、nodlD基因的调控和结瘤基因系统发育分析的新进展。结瘤因子的骨架核心是结瘤基因中的共同性基因nodABC表达的产物,宿主专一性基因则进行骨架结构的修饰,所形成的特异性结瘤因子是根瘤苗宿主范围的主要决定因素。结瘤调控基因nodD的作用方式与其存在的拷贝数目和产物NodD蛋白活性有关,同时NodD的敏感性还影响到根瘤菌的宿主范围。结瘤基因的系统发育揭示出根瘤菌宿主范围与共同性结瘤基因间比其它基荫的相关性更高。结瘤基因与豆科宿主之间存在一定的共进化关系。 相似文献
99.
冠状病毒(CoV)属于套式病毒目冠状病毒科,为有包膜的单股正链RNA病毒,基因组约27~32 kb。近年来,冠状病毒对人类的生命健康造成了巨大的威胁,如2002年出现的严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARSCoV)以及2012年出现的中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV),特别是2019年出现并流行至今的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2),其在全世界范围内暴发,严重危害了人类健康和社会秩序,引发了人们的高度关注。迄今为止,SARS-CoV-2已经演化出了多个变体,且仍处于不断变异中。目前流行株型以Omicron为主,同时伴有其他多个变异型。当前我国新冠疫情防控已进入“乙类乙管”常态化防控阶段,SARS-CoV-2依然是未来一段时间内重要的公共卫生问题之一。本综述总结了SARS-CoV-2 Omicron主要株型的关键突变以及其与病毒传染致病、免疫逃逸等特性的关系,为了解SARS-CoV-2演化传播、流行现状等提供了参考。 相似文献
100.
果生刺盘孢是油茶炭疽病的主要致病菌。研究果生刺盘孢RNA结合蛋白基因CfNOP12的生物学功能,阐述果生刺盘孢致病的分子机制,为油茶炭疽病的防治提供理论基础。根据同源重组原理,在果生刺盘孢中敲除目标基因CfNOP12,PCR验证获得正确的突变体ΔCfnop12;进一步构建PYF11::CfNOP12回补质粒,导入突变体原生质体中,筛选成功互补菌株ΔCfnop12-C。对这些菌株进行生物学表型测定,发现突变体ΔCfnop12营养生长速率显著下降,分生孢子的产量及附着胞形成率显著降低;在含有细胞壁胁迫剂的PDA培养基上,突变体ΔCfnop12的抑制率相较于野生型和回补菌株显著升高,在低温条件下,突变体的生长速率表现出明显下降;野生型和回补菌株几丁质聚集在菌丝顶端,突变体ΔCfnop12尖端几丁质分布不正常;相比于野生型和回补菌株,突变体致病力显著降低。综上所述,潜在RNA结合蛋白基因CfNOP12参与调控了果生刺盘孢生长发育、低温胁迫响应和致病力。 相似文献