大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因的克隆与真核表达载体的构建

根据Ｇｅｎｂａｎｋ中大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）基因的核苷酸序列,设计并合成了一对引物,以大肠杆菌基因组ＤＮＡ为模板,进行ＰＣＲ扩增,并将扩增产物定向连接到克隆、测序及真核表达载体ＰＣＤＮＡ３中,进行酶切鉴定、测序及序列分析。结果表明ＰＣＲ扩增出７４１ｂｐ大小的片段,通过酶切和序列分析证明含完整的ＰＮＰ基因序列且基因插入方向正确,此序列与文献报道的ＰＮＰ基因的同源性为９９．７％。说明克隆的ＰＮＰ基因与文献报道的基本一致,ｐｃＤＮＡ３－ＰＮＰ的构建成功为今后用其进行基因转染来研究ＰＮＰ／Ｍｅｐ－ｄＲ自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用打下了基础。     

Mechano-Stimulation Triggers Turgor Changes Associated with Trap Closure in the Darwin Plant Dionaea muscipula

The Darwin plant, also known as the Venus flytrap, Dionaea muscipula, has fascinated people since Darwin＇s time. The plant lives in nutrient-poor habitats but has been able to overcome the limitations of its surroundings by evolving a carnivorous lifestyle, particularly by modifying its leaves into active traps to catch animals. When flies, ants, or other small animals touch mechano-sensitive hairs protruding from the inner surface of the bi-lobed trap, it shuts within a fraction of a second.     

含自杀基因回路的大肠杆菌的生长和变异规律

具有鲁棒性的基因回路构建是合成生物学的基础工作.基于群体感应的自杀基因回路转化大肠杆菌后赋予宿主菌在一定菌群密度时启动自杀的特性.为了使基因回路更具鲁棒性,在转化后以不同浓度的IPTG为诱导剂,观察宿主菌的表型特征以及在自杀过程中突变菌产生的规律,并通过基因测序确定变异位点.结果表明:IPTG浓度与细菌自杀率呈正相关,自杀强度愈大,突变菌株出现得越早,蔓延的速度也越快.基因测序结果表明,在基因回路质粒上,luxR基因中间有转座子插入,从而破坏了群体感应系统.实验也表明:仅需该突变,就足以使宿主菌逃避自杀.结果为下一步优化基因回路设计,实现细菌密度的连续振荡提供了思路.     

猪霍乱沙门氏菌C500株△crp△asd缺失株平衡致死载体系统的构建及鉴定

猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法致弱、用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力。为了研制更加安全并保持C500株良好免疫原性的弱毒株,及将C500开发为适于粘膜免疫的疫苗活载体,本文构建了猪霍乱沙门氏菌C500株△crp△asd双缺失株平衡致死载体系统。首先构建含缺失320bp的crp(cAMP受体蛋白)基因与蔗糖敏感基因(sacB)的重组自杀性质粒,与C500接合转移,两步法筛选无抗性的△crp缺失株,用PCR证实基因组crp基因的缺失突变。用同样方法在crp缺失株基础上构建asd(天冬氨酸β-半乳糖脱氢酶)基因缺失株。该缺失株生长必需外源DAP(二氨基庚二酸)。进一步鉴定△crp缺失株的表型、生长特性、毒力等,结果表明△crp△asd缺失株构建成功。△crp△asd缺失株可以用来作为宿主载体平衡致死系统来高效表达外源基因,为深入研究以C500株为载体的口服多价疫苗奠定了基础。     

基因工程微生物的环境监测及生物防御体系研究进展

随着生物技术的发展, 研究人员构建出了大量具有特定功能的基因工程微生物, 这些基因工程微生物在实际应用时常受到限制, 因为它们释放到环境中有可能带来新的污染。为了减少或消除其对环境的潜在危害, 有必要采取措施对这些基因工程微生物进行监测和安全控制。通常要求这类基因工程微生物带有便于监测的检测标记以及能进行自消亡的主动生物防御体系。对基因工程微生物的检测标记以及主动生物防御体系的研究现状进行了综述。     

色彩背后的陷阱——仿瓷餐具揭秘

仿瓷餐具又称密胺餐具,由于其坚固耐用、品种繁多,近几年来广泛使用于餐馆、食堂和家庭中,尤其是一些造型美观、色彩艳丽的仿瓷餐具,更是受到了儿童的喜爱,成为家长们为孩子首选的餐具。但是,就在2008年底,一次非正式的调查却揭开了仿瓷餐具生产的内幕,几乎酿成又一次“三鹿奶粉事件”。     

抑郁症与自杀

自杀是一种社会现象也是医学问题,自杀意念是抑郁症主要症状之一,抑郁症与自杀之间存在密切的关系,抑郁症患者甚至视自杀为一种解脱.本文从社会文化的角度探讨抑郁症病患自杀的原因与特征,旨在有效识别抑郁症患者的自杀倾向,及早防护,降低抑郁症患者自杀率,同时丰富我国抑郁症研究的医学社会学内容.     

投喂，“爱”的陷阱

北京动物园的志愿者队伍,两年来已达到300多人。他们没想到的是,大量精力陷在了这样一件事上：劝阻游客投喂。在人海中他们手持扬声器口干舌燥地呼喊,却收效甚微。接受我们采访的时候,他们讲述起许多无奈的故事……[编者按]     

EGR-1启动子在肿瘤基因治疗中的应用

EGR-1的启动子为早期生长反应因子-1基因上游约-550-0bp的一顺式作用元件。其活性受控于一些诱导剂,如电离辐射,联合EGR-1的启动子与治疗基因（如TNF-α、自杀基因）,用辐射能在肿瘤局部从时,空调控治疗基因的表达,使其产物局限于肿瘤局部,并发挥放疗的杀肿瘤效应,而放疗与转基因产物又有协同作用。放射治疗与基因治疗的配伍为肿瘤的治疗提供了新思路。     

植物吸收利用有机氮营养研究进展

植物矿质营养学问世以后,人们一直认为无机氮是植物吸收氮素的主要形态.随着研究手段的改进和研究内容的不断深入,现已证实许多没有菌根的维管植物都可以直接吸收可溶性有机氮,特别是小分子的氨基酸.由此引起了人们对植物有机营养、植物营养方式多样化问题的重视.研究表明：氨基酸可以通过多种方式释放到土壤溶液中,土壤中的氨基酸主要来源于微生物、动植物及其代谢产物等.土壤氨基酸含量受土壤温湿度、所施的有机肥料、生长的植物种类及其生长发育时期的影响.植物对氨基酸的吸收是一个主动吸收过程,受载体调节,并与能量状况有关,同时受介质中pH和温度的影响.但是有关植物吸收氨基酸的机理及其生态过程还需进行深入的研究.