2010～2012年华中地区猪流行性腹泻病毒分子特征和遗传进化分析

2010年底开始,猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)在中国境内出现严重暴发。为探讨该病突然再次暴发的原因,对2010年10月至2012年6月于华中地区11个地市收集的12株猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemic diarrhea virus,PEDV)S、M和ORF3基因进行RT-PCR扩增、克隆及测序,并对其序列变化、遗传进化关系、抗原位点、糖基化位点和多肽极性进行分析。结果显示,12株PEDV流行毒株S、M和ORF3基因部分核苷酸及氨基酸的改变使其关键序列明显不同于以往毒株,其中有11株流行毒株的S基因比现用疫苗毒株CV777多9个核苷酸,而且在其S1区N′端存在大量的氨基酸突变。遗传进化分析显示,12株PEDV华中地区毒株与2007～2009年韩国毒株、2007～2008年泰国毒株、2009～2010年越南毒株、2011年日本毒株及2010～2012年中国其它地区流行毒株亲缘关系均较密切,而与欧洲株(CV 777、Br1/87)、中国现用疫苗株(CV777)及2003～2007年中国分离株(LJB/03、JS-2004-2、DX、QH、LZC)亲缘关系均较远。与现用疫苗株(CV777)相比,流行毒株S蛋白的抗原位点、糖基化位点和跨膜螺旋均有明显改变,提示PEDV在近年呈现快速变异和进化的趋势,因而可能需要选择更有效的疫苗株来控制PEDV的暴发。     

弗劳地枸橼酸盐杆菌基因种与小儿腹泻关系、耐药性的研究

从１４５７例腹泻患儿大便中分离出１６４株弗劳地枸橼酸盐杆菌复合群的菌株,而对照组中分离率仅４．２６％,具统计学差异。为探讨其致病性,采用不耐热性肠毒素,耐热性肠毒素基因探针,菌液直接ＬＴ－ＰＣＲ,家兔肠袢结扎和刚果红结合试验检测细胞的腹泻毒力因子,证实４７．１％的菌株产生ＬＴ,系腹泻重要毒力因子,不具侵袭性因子。     

慢性阻塞性肺病急性加重期下呼吸道病原菌感染及药敏结果分析

目的探讨慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)下呼吸道病原菌群的分布及分析药敏试验结果。方法对仙居县人民医院呼吸病房收治的128例AECOPD患者的痰细菌培养和药敏试验结果进行分析。结果 AECOPD患者感染的病原菌中,革兰阴性杆菌占61.95%,以铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌为主;革兰阳性球菌占21.43%,以金黄色葡萄球菌、粪肠球菌为主;真菌占14.88%;2种以上病原菌混合感染占20.31%。体外药敏试验发现:亚胺培南对大部分革兰阴性杆菌有较好敏感性,万古霉素对大部分革兰阳性球菌有较好敏感性,检出的真菌对氟胞嘧啶、两性霉素、氟康唑、依曲康唑均保持较高敏感性。结论 AECOPD患者下呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,真菌感染率和混合感染率较高,应引起重视,应根据药敏结果合理选用抗菌药物。     

尿液中细菌L型检出情况及耐药性分析

目的了解泌尿感染患者尿液标本细菌L型的检出情况,分析尿常规结果、病原菌分布情况及耐药性特点,为临床提供诊疗依据。方法对2014年1月至2015年12月1 532例住院和门诊泌尿感染患者的清洁中段尿标本的尿常规结果和微生物培养结果进行回顾性分析。严格按照《全国临床检验操作规程》要求采集患者尿液标本,2 h内完成尿液普通培养、高渗培养、尿常规检查及尿液离心后沉渣镜检。培养出细菌L型进行菌株鉴定和药敏试验,结果采用SPSS 13.0统计软件进行分析处理。结果共检出细菌L型132例,检出率为8.6%。132例细菌L型阳性病例中,白细胞酯酶阳性19例,阳性率14.4%;尿沉渣镜检白细胞阳性105例,阳性率79.5%。细菌L型检出率排名前三位的分别为大肠埃希菌、粪肠球菌、葡萄球菌,分别占40.9%、22.7%、12.1%。大肠埃希菌对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、复方新诺明耐药率较高;粪肠球菌对克林霉素、奎奴普丁/达福普汀、红霉素、四环素耐药率较高;葡萄球菌对青霉素G、红霉素、头孢西丁、甲氧西林、环丙沙星耐药率较高。结论尿常规、尿沉渣镜检有助于细菌L型感染的辅助诊断,临床医生应根据尿培养结果合理、足疗程选用抗菌药物。     

槟榔烂果病的病原菌鉴定

本研究分别从台湾槟榔病果中分离出病原菌Ar8904、Ar8905;从海南槟榔病果中分离出病原菌Ar8801、Ar8802、Ar8904以及从云南槟榔病果中分离出病原菌Ar8901、Ar892.将这些病原菌进行对比实验.研究结果表明,这7株病原菌在菌株形态、培养形状、寄主范围、致病性以及症状特征都十分的相似.因此,根据炭疽菌现代分类标准,我们可以初步确认台湾、海南、云南的槟榔病果均为同一种炭疽菌引起的.     

新成人腹泻轮状病毒J19株的全基因组克隆和VP4、VP6和VP7基因序列分析

为了进一步了解新成人腹泻轮状病毒J19株的基因和蛋白特征,利用一种改良的非依赖核酸序列的单引物扩增方法扩增J19株的11个基因,克隆到pMD18-T载体中并进行测序。在此基础上,将主要抗原蛋白VP4、VP6和VP7的蛋白序列与其它轮状病毒的相关蛋白序列进行比较分析并对VP6蛋白序列做遗传进化分析。结果获得J19株11个基因的全长基因序列。基因序列分析表明J19株的第3、6和第9基因分别长2 512bp、1 287bp和820bp,它们分别预测编码抗原蛋白VP4(823aa)、VP6(396aa)和VP7(258aa)。组成J19株的VP4、VP6和VP7蛋白序列对B组轮状病毒的CAL株、IDIR株以及ADRV株的相关蛋白序列的一致性分别是27.6%、38.5%和22.3%。对分组抗原蛋白VP6的遗传进化分析表明,J19株在进化树上的位置靠近外群蛋白分支以及A、B和C组轮状病毒分支的根部,而且它比较偏向于B组轮状病毒的分支。J19株的VP4、VP6和VP7蛋白序列与其它轮状病毒的相应蛋白序列存在显著差异。VP6蛋白序列的遗传进化分析表明J19株可能是一个新组轮状病毒的代表性毒株;同时,它也可能是一个与B组轮状病毒的起源和进化密切相关的毒株之一。关于新成人腹泻轮状病毒J19株11个基因的克隆及VP4、VP6和VP7基因的序列分析,这是第一次报道。     

猪流行性腹泻病毒功能性受体的鉴定

为研究猪氨基肽酶(Porcine Aminopeptidase N,pAPN)是否作为猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的细胞感染受体,通过转染技术,使PEDV非容许性细胞MDCK表达pAPN,并用PEDV感染转染细胞。结果发现转染的MDCK细胞可以感染PEDV,并且该病毒可以在转染细胞中连续传代。免疫荧光法鉴定存在病毒抗原。进一步实验证实,抗pAPN血清可以抑制PEDV感染转染的MDCK细胞。这些结果展示转染的MDCK细胞、pAPN表达及PEDV病毒复制之间存在直接联系,证明pAPN是PEDV的细胞感染受体之一。     

黑胫病菌侵染过程中油菜响应基因的表达分析

油菜黑胫病是造成油菜产量损失的病害之一,致病菌为Leptosphaeria biglobosa.该研究采用形态学观察和转录组测序技术,分析油菜接种病原菌Leptosphaeria biglobosa 4、12、24、36、48和96 h后的表型及基因表达变化情况,以探讨响应死体营养型真菌L.biglobosa侵染时油菜...     

外生菌根真菌对植物根病原菌拮抗作用的研究

■的15株外生菌根真菌在琼脂平板上对6株植物病原菌的拮抗作用试验结果表明,美味红菇、劣味乳菇、毛边滑锈伞、大毒滑锈伞等菌根菌对试验病原菌的营养菌丝具有明显的拮抗作用。菌根菌的培养液中含有抑制根病原菌的活性物质,且对高温稳定。外生菌根菌在纯培养条件下对病原菌的拮抗作用包括菌丝体对峙生长作用,重寄生作用和拮抗活性物质作用。其中菌丝体的重寄生作用在抗病效应中起重要作用。     

牛病毒性腹泻病毒的分子生物学研究进展

牛病毒性腹泻病毒（Bovineviraldiarrheavirus,BVDV）,也称牛病毒性腹泻一粘膜病病毒（Bovinevlraldi。h。一mucosaldi。。virus,BVD一MDV）,在分类学上属黄病毒科（Flaviviri－d。）,瘟病毒属（Pestiv＿）［l］。鉴于其基因结构及分子生物学特征近来也有人提议新设一瘟病毒科［’,’l。BVDV是瘟病毒属的代表病毒,与属内的猪瘟病毒（HOgCh。le。Vi。,HCV;或称CI。icalswinefevervi。s,CSFV）及羊边界病病毒（Borderdi。asevirus,BDV）,在血清学上有交叉反应［‘］,BVDV感染牛可引起多种临床症状,如：高热、流…