流加发酵提高产胡萝卜素红酵母产量的研究

本文对产胡萝卜素的红酵母进行了间歇、恒速及变速流加发酵实验,建立了简单的数学模型控制流加。实验结果表明,变速流加可显著地提高红酵母的产量,当流加控制因子K为88×10－5,变速流水发酵比间歇发酵红酵母产量提高了56．2％。     

SERS观察在Pd OECC薄膜中β—胡萝卜素的基频和高阶拉曼模

利用有极高检测灵敏度的表面增强拉曼散射（ＳＥＲＳ）技术,对吸附在银镜表面上的浓度较低的纯化的放氧核心复合物（Ｐｄ ＯＥＣＣ）薄层进行了频移在２５０～３ １００ｃｍ＾－１范围内的拉曼光谱测量,除得到β－胡萝卜素分子的基频拉曼振动模外,在高频端还得到了许多弱峰。根据泛音和组合谱带选择定则分析,这些振动模式来自β－胡萝卜素分子的高阶拉曼光谱。还进行了Ｐｄ ＯＥＣＣ在强光破坏前后的ＳＥＲＳ光谱研究。在强光     

不同浓度NaCl和光照强度对杜氏藻体内β-胡萝卜素含量的影响

以2种杜氏藻即巴氏杜氏藻和盐生杜氏藻为实验材料,在不同NaCl胁迫和光照(紫外线和高光照强度)进行培养的结果表明,细胞生长的最适盐度是2.0mol·L-1,高产β-胡萝卜素的最适盐度是3.5mol·L-1;紫外线下诱导的藻株环境适应能力较强,β-胡萝卜素含量较高;高光照强度(1080μmol·m-2·s-1)下诱导的杜氏藻β-胡萝卜素含量高;二步法培养的β-胡萝卜素含量比正常培养的提高2倍以上。     

产辅酶Q1O酵母的发酵条件研究

研究了豆油、豆粉、胡萝卜汁、西红柿汁、烟叶、β -胡萝卜素、桔子皮汁等自然物的添加对酵母发酵生产CoQ₁₀ 的影响 ,结果表明它们均能大幅度提高酵母菌中CoQ10 的含量。其中豆油、豆粉、西红柿汁、桔子皮汁是富含CoQ₁₀ 和胡萝卜素合成途经中的前体物质因而提高了CoQ₁₀ 的产量 ;烟叶和 β -胡萝卜素阻断了合成 β -胡萝卜素的途经从而起到提高CoQ₁₀ 合成的作用 ;胡萝卜汁的作用可能两     

观赏向日葵ζ-胡萝卜素脱氢酶基因HaZDS的克隆与表达分析

采用RT-PCR和RACE技术,从观赏向日葵新品种闽葵3号黄色花瓣中克隆获得类胡萝卜素合成途径关键酶基因ZDS,命名为Ha ZDS(Gen Bank No.KF263657),该基因c DNA全长2069 bp,具有一个1761 bp的完整开放阅读框(ORF),编码587个氨基酸。推导氨基酸序列分析表明,Ha ZDS蛋白在N-末端区域含有一个叶绿体转运肽序列,含有一个典型的氨基氧化酶结构域和NAD(P)结合结构域,存在一个特征序列。系统发育分析表明,观赏向日葵Ha ZDS与万寿菊、菊花蛋白的同源性分别达96.4%、90.1%,亲缘关系较近。利用实时荧光定量PCR技术分析结果显示,Ha ZDS基因在盛花期表达量最高,不同组织中的表达量舌状花瓣绿色管状花苞片叶片黑色管状花,随着花瓣黄色的加深,基因表达量逐渐增加。推测Ha ZDS基因在转录水平上参与观赏向日葵花色形成的调控。     

β-胡萝卜素发酵过程中关键的代谢产物——三孢酸*

利用三孢布拉氏霉菌(Blakelea trispora)发酵生产β-胡萝卜素发现:使用(+)、(-)菌混合的培养物与分别使用“+”、“-”菌的培养物相比,β-胡萝卜素产率可提高3-15倍;既使用膜将(+)、(-)菌株隔开培养,这种作用仍然很明显。究其原因,主要是混合培养物中生成的β因子或称三孢酸在起作用。主要介绍了三孢酸的性质、作用机理和功能、合成路线及其分离纯化,以期为类胡萝卜素实现工业化生产提供依据。     

β-胡萝卜素高产丛霉菌株的筛选及发酵

从自然界中分离出 2 7株丛霉菌 ,筛选了β -胡萝卜素高产菌株 ,考察了液态发酵和半固态发醇生产胡萝卜素的适宜条件。在含糖蜜和尿素的液态培养中进行静态发酵时 ,每升发酵液中生成 2 0mg～ 90mgβ -胡萝卜素。在用玉米胚、糖蜜和尿素制成的半固态培养基上进行发酵时 ,获得较高浓度 (0 84 6mg/g干基 )的 β -胡萝卜素。     

法夫酵母β-胡萝卜素转化酶(Asy)基因的克隆及可溶性表达研究

[目的]从高产虾青素的法夫酵母(Phaffia rhodozyma) 7B12菌株中克隆β-胡萝卜素转化酶基因(β-Carotene converting enzyme gene,asy),并将该基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行可溶性表达,为深入研究该酶的性质及应用提供基础.[方法]采用cDNA末端快速扩增技术,克隆得到asy基因全长cDNA序列,将其克隆到表达载体pET32a中,通过优化温度和IPTG浓度提高其可溶表达量;进一步在E.coli BL21(DE3)中共表达携带asy基因的重组质粒和pACCAR 16△crtx质粒(携带由乙酰辅酶A合成β-胡萝卜素的基因链),用液相色谱分析共转化菌株中类胡萝卜素种类的变化,鉴定可溶性表达的Asy酶活性.[结果]法夫酵母7B12菌株asy基因的cDNA序列与GenBank能检索到的唯一一条asy基因mRNA序列(Accession No.DQ002007.1)一致性达到97％,该序列总长1 971 bp,最大开放阅读框为1 614 bp,编码538个氨基酸,在E.coli BL21 (DE3)中表达的Asy融合蛋白分子量约为70 kD;条件优化后转化asy基因的重组菌在26℃、0.5 mmol/L IPTG的条件下诱导时,可溶性融合蛋白比例达85％.与pACCAR16△crtx单质粒转化相比,共转化pACCAR 16△crtx及asy基因的菌株类胡萝卜素产物的成分发生了明显的变化,其中α-胡萝卜素的含量明显减少,伴随出现了3种新的色素,根据出峰时间判断其中一种为β-胡萝卜素和虾青素的中间产物——β-隐黄质.[结论]从法夫酵母中克隆得到asy基因,通过优化诱导温度及IPTG浓度等条件提高了该基因在E.coli BL21(DE3)中的可溶性表达量,经鉴定可溶性的Asy融合蛋白具有转化β-胡萝卜素的活性.     

菌株HYR-08色素的理化性质的初步研究

目的:探讨菌株HYR-08分泌的生物活性物质-色素的理化性质.方法:收集刚进入生长平稳期的菌株,采用酸热、研磨、酶解和超声波四种不同的破壁方法进行破壁,随后用丙酮萃取法获得色素粗产品.比较了该色素在蒸馏水、无水乙醇、甲醇、丙酮、四氢呋喃、氯仿中的溶解情况.同时我们也分析了酸碱度、光照和温度对该色素稳定性的影响.结果:超声波裂解法的提取效率最高.色素提取物在上述溶荆中的溶解能力由高到低依次为:四氢呋喃、丙酮、氯仿、无水乙醇、蒸馏水、甲醇.色素的稳定性对碱的耐受性明显强于酸.该色素提取物的稳定性与温度的升高及水浴时间的延长呈负相关.相同功率紫外光对该色素提取物的破坏能力要强于日光.结论:超声波裂解法是一种相对高效、经济简单的提取菌株HYR-08中色素的好方法.菌株HYR-08的色素提取物具有良好的对酸碱、温度和光照的耐受能力,提示该色素具有良好的生物医药开发前景.     

不同类型西双版纳黄瓜果实成熟期营养成分分析

西双版纳黄瓜（Cucumis sativus L．vat．xishuangbannanesis Qi et Yuan）是我国特有的黄瓜变种,老瓜果肉橙黄是区别于普通黄瓜的主要特征之一。本文以不同类型西双版纳黄瓜为研究对象,分析果实成熟期主要营养成分及其变化规律。结果显示,18份西双版纳黄瓜老瓜的平均β-胡萝卜素含量为106．58mg／kgDW,叶黄素0．48mg／kgDW,Vc4．96mg／100g,可溶性糖1．97％,Ca173．21mg／kg,Fe1．28mg／kg,Mg121．89mg/kg,P 339．67mg／kg,Zn1．47mg／kg。不同种质的β-胡萝卜素含量差异较大,变异范围1．34～261．55mg／kgDW,变异系数67．68％。随着果实成熟期的延长,β-胡萝卜素和α-胡萝卜素含量呈显著增高的趋势,而叶黄素含量明显下降。在果实成熟期未检测到番茄红素。β-胡萝卜素积累是西双版纳黄瓜果肉颜色形成的主要原因。